猪圆环病毒和大肠杆菌混合感染的诊断

黑龙江省大庆市某猪场暴发猪病,临床主要表现猪体温升高、腹泻、日渐消瘦等症状。为了确诊该猪场的发病原因,实验室无菌提取病猪肺脏的DNA、RNA,经分离纯化进行PCR检测,同时进行细菌鉴定,生化试验等,最终PCR扩增结果诊断为猪圆环病毒和大肠杆菌的混合感染。药敏试验结果分析表明该分离菌对畜炎宁(克拉维酸+阿莫西林注射液)、头孢唑啉、阿米卡星和头孢噻呋高度敏感,并给猪场提出了有效的防治措施,为猪场对该类疾病的防控提供了参考。     

牛病毒性腹泻/黏膜病毒抗体间接ELISA检测方法的建立

为建立一种检测牛病毒性腹泻、黏膜病病毒抗体的间接ELISA方法,利用昆虫细胞真核表达系统成功表达E2蛋白并纯化,使用纯化后的蛋白作为包被抗原。确定最佳抗原包被浓度为6μg·m L-1,最佳血清稀释度为1∶80,最佳包被液为碳酸缓冲液,最佳盐封闭液为5%脱脂乳,最佳血清作用时间为60 min,酶标抗体作用最佳浓度为1∶10 000;最佳底物作用时间为5 min,阳性临界值为D450 nm≥0.282。与IDEXX的BVDV间接ELISA试剂盒比较,总符合率为91.5%,板内和板间重复性试验变异系数均小于10%。该方法与牛副流感病毒Ⅲ型、牛传染性鼻气管炎病毒、牛呼吸道合胞体病毒和牛冠状病毒阳性血清无交叉反应。因此,该ELISA诊断方法可用于大批量样本抗体水平监测和流行病学调查。