猪IFN-α14的表达、纯化及抗病毒活性分析

干扰素(interferon, IFN)是一类具有抗病毒和免疫调节功能的细胞因子,目前已经应用于多种人和动物病毒病的预防和治疗。不同猪干扰素亚型的抗病毒活性差异较大,为了解猪IFN-α14的抗病毒活性,将猪IFN-α14基因序列进行分析,去除信号肽、优化密码子,并采用基因合成的方法合成了猪IFN-α14亚型基因,将其克隆入pCSMH原核表达载体,优化诱导条件,利用Ni琼脂糖凝胶纯化柱进行亲和层析,获得高纯度的重组猪IFN-α14蛋白,Western blot检测证明重组蛋白具有较好的特异性。用不同浓度的重组猪IFN-α14处理Vero细胞后,接种1 000 TCID₅₀猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus, PEDV),24 h收集细胞和上清,通过荧光定量检测细胞内病毒的RNA水平,同时测定细胞上清中病毒的TCID₅₀。猪IFN-α14蛋白被成功表达并纯化,证明了10μg/L的重组猪IFN-α14干扰素能够显著抑制PEDV的复制。与本实验室前期表达纯化的猪IFN-α2、8相比,猪IFN-α14抑制P...     

丁酸梭菌对肉鸡生长、肠道形态及屏障功能的影响

为研究日粮中添加丁酸梭菌（Clostridium butyricum）对肉鸡生长性能、肠道形态以及肠道屏障功能的影响,选取健康且规格一致的1日龄爱拔益加公仔鸡324只,随机分为3个处理,每个处理6个重复,每个重复18只。对照组（CON）饲喂基础日粮,抗生素组（ANT）和丁酸梭菌组（CB）分别饲喂含10 mg/kg维吉尼亚霉素和1×109cfu/kg丁酸梭菌的日粮。试验周期为42 d。分别于21、42日龄,以重复为单位统计分析各组的生长性能和肠道组织形态,以及肠道黏膜细胞焦亡和肠道屏障相关基因mRNA表达丰度等指标。结果表明,与对照组相比,抗生素组和丁酸梭菌组的平均日增质量（ADG）以及末质量（FBW）分别显著升高6.31%、8.43%和6.26%、8.31%。42日龄,丁酸梭菌组半胱天冬酶-1(Caspase-1)、白介素-18(IL-18)和白介素-1β(IL-1β)水平较对照组分别显著下降24.91%、42.96%和19.91%。与对照组相比,丁酸梭菌组空肠绒毛高与绒毛高/隐窝深（V/C）比值分别显著提高13.40%和54.20%;回肠隐窝深度显著降低32.62%,V/C比值显著升...     

河南省小麦肉鸡代谢能预测方程的建立

本试验采用化学分析和肉鸡代谢试验建立了河南省小麦养分含量与代谢能的回归方程。试验1:选取河南省11种不同的成熟小麦,测定概略养分含量和容重,分析养分含量变化范围。试验2:用小麦、次粉、麸皮、面粉按照总戊聚糖含量梯度配制人工小麦,再添加一定量的维生素和矿物质,配制成人工小麦代谢饲粮。选取常规饲养的商品代罗斯308雄性白羽肉鸡进行代谢试验,分别在11~13日龄和25~27日龄,用全收粪法测定人工小麦代谢饲粮的表观代谢能(AME)、真代谢能(TME)、氮校正表观代谢能(AMEn)和氮校正真代谢能(TMEn),并采用逐步回归法建立AME、TME、AMEn和TMEn的回归方程。结果表明:1)河南省小麦粗脂肪(EE)、中性洗涤纤维(NDF)、酸性洗涤纤维(ADF)及总磷(TP)含量的变异系数相对较大,分别为16.67%、15.84%、14.96%、19.32%。2)肉鸡对人工小麦代谢饲粮的养分表观代谢率在11~13日龄和25~27日龄存在差异,25~27日龄肉鸡对人工小麦代谢饲粮ADF、粗纤维(CF)的表观代谢率高于11~13日龄,AME、TME、AMEn和TMEn也高于11~13日龄。3)采用逐步回归法建立河南省小麦肉鸡代谢能的预测方程为:11~13日龄,AME=14.628-0.184NDF(R2=0.842,P<0.01),TME=15.49-0.197NDF(R2=0.854,P<0.01),AMEn=14.571-0.184NDF(R2=0.847,P<0.01),TMEn=15.49-0.197NDF(R2=0.854,P<0.01);25~27日龄,AME=15.462-0.217NDF(R2=0.797,P<0.01),TME=16.124-0.214NDF(R2=0.809,P<0.01),AMEn=15.179-0.208NDF(R2=0.801,P<0.01),TMEn=16.123-0.214NDF(R2=0.809,P<0.01)。4)通过预测方程计算所得人工小麦代谢饲粮AME、TME、AMEn和TMEn的预测值与实测值很接近,计算所得的河南省小麦AME、TME、AMEn和TMEn符合预期值。由此得出,不同品种河南省小麦之间EE、NDF、ADF及TP的含量差异相对较大;不同日龄阶段的肉鸡对小麦代谢能存在差异,设计肉鸡饲粮配方时,不同阶段饲粮代谢能应采用对应的代谢能值;低于14日龄的肉鸡,预测方程为AME=14.628-0.184NDF,TME=15.49-0.197NDF,AMEn=14.571-0.184NDF,TMEn=15.49-0.197NDF;14日龄以上的肉鸡,预测方程为AME=15.462-0.217NDF,TME=16.124-0.214NDF,AMEn=15.179-0.208NDF,TMEn=16.123-0.214NDF。     

猪IFN-α8的原核表达及抗猪繁殖与呼吸综合征病毒活性研究

为确定猪干扰素α8(poIFN-α8)蛋白对猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）的抗病毒作用,合成poIFN-α8基因,克隆入pCSMH大肠杆菌表达载体,将重组表达载体转化DH5α感受态细胞,进行温度诱导表达后,收集菌体进行SDS-PAGE电泳。将表达的目的蛋白利用Ni-琼脂糖凝胶纯化柱纯化后,采用Western blot试验检测重组poIFN-α8的反应原性,利用猪肺泡巨噬细胞（PAM）检测0.01、0.05、0.1、1 ng/mL的重组poIFN-α8蛋白对PRRSV的抗病毒活性,并检测重组poIFN-α8蛋白对下游干扰素刺激基因（ISG）Mx1、OAS1、ISG15的诱导激活作用。结果表明,成功构建了pCSMH-IFN-α8表达载体,实现了poIFN-α8在大肠杆菌中的包涵体表达,且重组poIFN-α8蛋白具有良好的反应原性;0.05 ng/mL的重组poIFN-α8蛋白可显著抑制PRRSV在PAM中的复制,poIFN-α8的抗病毒效果显著优于猪干扰素α2(poIFN-α2)、猪干扰素α5(poIFN-α5),且重组poIFN-α8能有效激活ISG的表达。综上,表达的重组poIF...     

龙须菜多糖对肉鸡生长性能、抗氧化能力及免疫功能的影响

本试验旨在研究饲粮中添加龙须菜多糖(GLP)对肉鸡生长性能、血清抗氧化能力及免疫功能的影响.试验选取体重相近的1日龄健康爱拔益加(AA)肉仔鸡288只,随机分成3个组,每组6个重复,每个重复16只鸡(公母各占1/2).对照(CON)组饲喂基础饲粮,龙须菜多糖和抗生素(ANTI)组分别饲喂在基础饲粮中添加0.1％龙须菜多...     

青蒿素及其衍生物在肉鸡生产中的应用

青蒿素是从中药青蒿中提取的一种具有抗寄生虫、抗氧化、抗炎等生理功能的倍半萜内酯类化合物,系天然的饲料添加剂.在饲粮中添加青蒿素及其衍生物可抗鸡球虫、缓解热应激对肉仔鸡造成的损伤、改善生产性能等.文章阐述了青蒿素及其衍生物的生理功能和作用机制,在肉鸡生产中的应用,为更好地研究和应用青蒿素及其衍生物提供参考依据.     

不可溶性纤维对幼龄肉鸡生长性能以及肝脏脂质代谢的影响

本试验旨在研究不可溶性纤维对幼龄肉鸡生长性能以及肝脏脂质代谢的影响。选取1日龄爱拔益加（AA）肉仔鸡360只,随机分为3个组,每组6个重复,每个重复20只鸡。对照组饲喂基础饲粮;试验Ⅰ组在基础饲粮中添加8 kg/t的不可溶性纤维,并适当调整其他原料用量使其营养水平与对照组基础饲粮保持一致;试验Ⅱ组在基础饲粮的基础上额外添加8 kg/t的不可溶性纤维。试验期14 d。结果表明：1）与对照组相比,试验Ⅰ组和试验Ⅱ组肉鸡1～14日龄末重和平均日增重均显著降低（P<0.05）,同时料重比均显著提高（P<0.05）;试验Ⅱ组肉鸡平均日采食量显著降低（P<0.05）。2）与对照组相比,试验Ⅰ组和试验Ⅱ组肉鸡14日龄血清和肝脏总胆固醇和甘油三酯含量以及腹脂率均显著降低（P<0.05）;试验Ⅱ组肉鸡肝脏相对重量显著降低（P<0.05）,但与试验Ⅰ组相比无显著性差异（P>0.05）。3）与对照组相比,试验Ⅰ组和试验Ⅱ组肉鸡肝脏中硬脂酰辅酶A去饱和酶1(SCD1)、苹果酸脱氢酶（MDH）和载脂蛋白A(ApoA)的mRNA相对表达量显著降低（P<0.05）,肝脏中载...     

丁酸梭菌介导TLRs/NLRs信号通路调控仔猪肠道损伤分子机制的研究进展

近年来,丁酸梭菌作为一种良好、安全的添加剂,正在被越来越多地应用到畜牧业中。尽管已在丁酸梭菌的特征、营养作用及畜禽饲粮中的应用效果等方面开展过较深入的研究,但是对于丁酸梭菌调节肠道黏膜免疫通路方面的研究尚不系统,对丁酸梭菌调节致病菌感染仔猪肠道损伤的分子机制也未完全认识。因此,本研究对丁酸梭菌介导TLRs/NLRs信号通路调控仔猪肠道损伤的分子机制进行了综述。 [关键词] 丁酸梭菌|仔猪|信号通路|肠道损伤     

纤维对家禽生理调控作用的研究进展

由于近年来抗生素在畜禽养殖生产上的滥用,给动物肠道健康以及食品安全带来了威胁。随着各个国家陆续实施了禁抗的措施,通过营养调控等手段来解决动物肠道健康及促生长作用逐渐成为大家探寻的方向。在集约化养殖生产中纤维一直被认为是一种抗营养因子,其在日粮中的使用量被严格控制,但近年来很多研究发现在家禽日粮中添加适量纤维源不仅可改善家禽的肠道健康,对生产性能的提高也有促进作用。本文主要从纤维的理化性质,纤维对家禽生产性能、肠道健康以及脂质代谢的影响等方面综述纤维对家禽的生理调控作用,从而为纤维在家禽生产上科学高效的应用提供科学支持。[关键词] 纤维|理化性质|家禽|生长性能|肠道健康|脂质代谢     

酶解青蒿联合地衣芽孢杆菌对肉仔鸡生长性能和盲肠菌群的影响

本试验旨在研究酶解青蒿联合地衣芽孢杆菌饲喂肉仔鸡对其生长性能和盲肠菌群的影响.选取1日龄科宝(Cobb)肉仔鸡480只,随机分为4组(每组6个重复,每个重复20只):对照组饲喂基础饲粮,抗生素组、试验Ⅰ组和试验Ⅱ组分别在基础饲粮中添加20 mg/kg抗生素(主要成分为维吉尼霉素)、1 g/kg酶解青蒿以及1 g/kg酶...