毛白杨PtAUX1超表达诱导体状胚发生

体状胚的发生由一个生长素信号级联系统控制,其发生过程需要大量的生长素,随后在去除生长素或降低生长素浓度的条件下,体状胚趋于成熟。除植物激素外,环境胁迫也是体状胚发生所必须的,激素和环境胁迫协同诱导细胞的脱分化、再分化和体状胚的发生。目前发现的参与体状胚发生的主要基因有SERK、PKL和BBM等,它们作用于体状胚的不同发育阶段。本研究中,在毛白杨35S::PtAUX1超表达植株中发现叶片表面产生大量体状胚,体状胚分散在叶片主脉及侧脉两侧或聚集在叶片边缘,其中部分体状胚可发育成成熟体状胚。将成熟体状胚取下,置于MS0培养基上进行培养,体状胚发芽并缓慢产生根。研究结果表明,PtAUX1通过建立新的生长素浓度梯度,诱导体细胞转化成胚性细胞,从而使叶片产生出体状胚。除上述基因外,PtAUX1也参与体状胚的发生,这一研究发现现尚未见报道。     

毛白杨 PtAUX1超表达对光照反应的影响

利用构建好的PtAUX1的表达载体,转化毛白杨,获得转基因植株。通过PCR技术检测PtAUX1的转基因植株,分析转化植株在不同的光照长度和光照强度下的形态变化。结果表明:PtAUX1基因影响毛白杨对光照的敏感性,在低光照强度下,转基因毛白杨生长缓慢且叶片卷曲;表明PtAUX1基因通过生长素输入载体的不对称分布影响生长素的极性运输,进而参与叶片极性的建立,影响了器官形态和发育过程。     

秋水仙素诱导白皮松多倍体的研究

以白皮松成熟胚的子叶作为外植体进行组织培养,利用秋水仙素诱导多倍体。将子叶预培养10 d后,用质量体积分数为0.01%、0.03%、0.05%的秋水仙素分别浸泡6 h、12 h、24 h,观察子叶生长状态及芽分化状况,20 d后鉴定染色体加倍情况。结果表明:不同浓度的秋水仙素均对子叶生长状态产生影响,浓度越高、处理时间越长,死亡率越高;秋水仙素处理过的子叶芽再生缓慢,且芽再生率随浓度增高而降低;秋水仙素处理后的子叶染色体产生加倍,但随着秋水仙素浓度的提高和处理时间的延长,多倍体诱导率呈现出下降的趋势。数据显示质量分数为0.03%的秋水仙素处理12 h的组合,多倍体诱导率最高,为40.5%。本研究初步建立了白皮松多倍体诱导体系。