辽西驴血液生化指标和血常规的测定分析

为辽西驴个体选择、品种培育、疾病防治及健康状况监测等提供较为有效的参考数据,开展了辽西驴血液生化和常规指标的测定,选择健康的辽西驴共10匹,每匹采取1mL全血,对采集的血样进行了46项常规血液指标检测。生化检测包括:血糖(GLU)、肌酐(CREA)、尿素(UREA)、血尿素氮(BUN)、磷离子(PHOS)和钙离子(CA)等22项;血常规检测包括:红细胞(RBC)、红细胞比容(HCT)、血红蛋白(HGB)、平均红细胞体积(MCV)、平均血红蛋白量(MCH)和平均血红蛋白浓度(MCHC)等24项。结果表明:幼驴与公驴组,肌酸激酶呈现显著性差异(p0.05);磷离子、碱性磷酸酶、单核细胞呈现极显著性差异(p0.01);幼驴与母驴组,血糖、白蛋白、谷氨酰转移酶、甘油三酯、中性粒细胞、淋巴细胞、血小板压积呈现显著性差异(p0.05);磷离子、胆固醇、平均红细胞体积、平均血红蛋白浓度、网织红细胞百分比、白细胞、单核细胞、血小板均呈现极显著性差异(p0.01);公驴与母驴组,球蛋白、甘油三酯、中性粒细胞呈现显著性差异(p0.05);网织红细胞百分比呈现极显著性差异(p0.01)。本研究测定的辽西幼驴的肌酸激酶、碱性磷酸酶、磷离子和单核细胞比母驴和公驴高;辽西母驴的白蛋白、胆固醇和甘油三酯比幼驴和公驴高;辽西公驴的球蛋白和中性粒细胞比幼驴和母驴高。     

羊绒细度候选基因靶标miRNAs筛选和鉴定

为筛选和验证辽宁绒山羊粗型和细型个体羊绒细度相关候选基因ALX4、NT-3、POLD2和AKT1表达调控潜在靶标miRNAs及其表达差异,提取辽宁绒山羊细型和粗型皮肤组织DNA和RNA,先采集辽宁绒山羊粗型和细型肩胛部皮肤组织,根据NCBI上的序列克隆获得ALX4、NT-3、POLD2和AKT1基因的3'UTR,利用Primer 5.0设计并合成功能引物,通过常规PCR扩增ALX4、NT-3、POLD2和AKT1基因的3'UTR序列,在miRBase数据库中,筛选羊绒细度候选靶基因3'UTR靶标miRNAs,然后与辽宁绒山羊(LCG)和内蒙古绒山羊(MCG)品种间皮肤miRNAs高通量测序结果共聚焦,筛选和验证羊绒细度相关候选基因表达调控潜在靶标miRNAs,在NCBI中检索到miRNAs的前体序列,应用RNAfold获得二级结构图及势能图,通过qPCR验证细型辽宁绒山羊(Fine type LCG)和粗型辽宁绒山羊(Coarse type LCG)皮肤组织中羊绒细度候选基因ALX4、NT-3、POLD2和AKT1靶标miRNAs的表达量。结果表明:通过miRBase数据库预测,羊绒细度候选基因ALX4、NT-3、POLD2和AKT1分别获得104,27,19和32个靶标miRNAs,与绒山羊品种间皮肤miRNAs高通量测序结果聚焦分析,ALX4基因聚焦到3个靶标miR-m13,miR-433-5p和miR-671,其表达量是56,2和27;NT-3基因聚焦到1个靶标miR-1296,表达量是41;POLD2基因聚焦到1个靶标miR-130b,表达量是177;AKT1基因聚焦到2个靶标miR-345-3p和miR-2331-3p,其表达量是52和5。其中前体序列的二级结构表明miR-2331-3p的结构最不稳定,miR-1296最小自由能的绝对值最大,结构最为稳定。用qPCR验证miR-m13,miR-433-5p,miR-671,miR-1296,miR-345-3p和miR-2331-3p在辽宁绒山羊细型皮肤中的表达量都显著高于粗型皮肤中的表达量,可能对羊绒细度候选基因发挥重要的正调控作用,而miR-130b在LCG粗型的表达量高于LCG细型表达量,可能miR-130b对羊绒细度相关候选基因起负调控作用。