排序方式: 共有38条查询结果,搜索用时 15 毫秒
1.
为了建立一种能够方便、高效检测溶血性曼氏杆菌(Mannheimia haemolytica)的方法,试验将溶血性曼氏杆菌重组质粒pET-32a-PlpE转化至BL21(DE3)感受态细胞,然后经IPTG诱导表达并纯化。以重组蛋白PlpE为包被抗原,通过优化抗原最佳包被浓度、一抗及二抗最佳稀释度、最佳反应时间和最佳显色时间等试验条件,建立了检测PlpE抗体的间接ELISA方法。结果表明:重组质粒pET-32a-PlpE转化至感受态细胞BL21(DE3)后利用IPTG诱导,重组蛋白主要在沉淀中大量表达,经包涵体纯化试剂盒纯化后获得纯度较高的目的蛋白。重组蛋白PlpE具有良好的反应性,且蛋白大小符合预期。确定的检测条件为抗原包被浓度2μg/mL,一抗稀释度1∶300,酶标二抗稀释度1∶80 000,反应时间45 min,一抗反应时间30 min,显色时间15 min。用该方法检出溶血性曼氏杆菌阳性血清的最低效价可达1∶1 280,检测牛病毒性腹泻病毒阳性血清、牛传染性鼻气管炎病毒阳性血清、口蹄疫病毒阳性血清、副结核分枝杆菌阳性血清、布鲁氏杆菌阳性血清,结果均为阴性;批内重复性试验和批间重复性... 相似文献
3.
为体外表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)糖基化囊膜蛋白GP5,以及制备其多克隆抗体,以PRRSV PC疫苗株RNA为模板,应用RT-PCR扩增GP5基因,并克隆至原核表达载体pET-32a(+),构建重组表达载体pET-32a-GP5。经过酶切和测序鉴定后,将阳性重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,加入IPTG低温诱导表达。使用亲和层析法纯化PRRSV GP5蛋白。然后将纯化的蛋白免疫北京大耳白兔制备多克隆抗体,并进行酶联免疫吸附试验(ELISA)和间接免疫荧光分析(IFA)。结果显示,表达的PRRSV GP5原核蛋白以可溶性和包涵体两种形式存在,相对分子质量大约30 kDa;制备的GP5蛋白多克隆抗体ELISA效价可达1:64 000;IFA检测显示,制备的多克隆抗体能够识别PRRSV。重组PRRSV GP5蛋白及其多克隆抗体的成功制备为PRRSV血清学检测方法的建立提供了良好的生物学材料。 相似文献
4.
某3000头母猪场伪狂犬病成功转阴的案例及启示 总被引:1,自引:0,他引:1
自2011年新流行的猪伪狂犬病(Pseudorabies,PR)变异毒株暴发以来,PR给我国的养猪业带来了巨大的经济损失,是中国养猪业的主要传染病,猪场伪狂犬病野毒感染现象较为严重。阳性率>10%的母猪群全部做淘汰处理会严重影响猪场的正常生产经营,为保证猪场的均衡生产,该案例通过实验室检测确定猪群的感染时间点,及时淘汰阳性公猪,制定科学的免疫程序,采取严格的生物安全管理和强化生产管理,在PR阳性猪场培育出阴性的后备母猪和肥育猪,有效提高了猪群的生产成绩和获得了较好的生产效益。 相似文献
5.
江苏省猪伪狂犬病流行病学调查及两种疫苗免疫效果评估 总被引:1,自引:1,他引:0
为了掌控江苏地区规模化猪场伪狂犬病野毒的感染情况及其流行性趋势,比较变异株猪伪狂犬病疫苗(C株)和Bartha-K61疫苗的免疫防控效果。于2017年5月份至2019年1月份对江苏地区59个规模场进行采样,通过间接ELISA方法检测猪群中的gE抗体来鉴定猪群是否被伪狂犬病野毒感染。另外,在一猪伪狂犬病阳性的规模猪场进行变异株猪伪狂犬病疫苗(C株)和Bartha-K61疫苗的防控效果的实验,通过检测猪伪狂犬病gE,gB抗体及中和抗体来判定猪群的猪伪狂犬病抗体保护水平。显示4 608份检测血样中,gE阳性1 681份,阳性率36%,母猪群gE阳性率46%,育肥猪群gE阳性率28%,59个猪场中育肥阶段gE阳性的猪场22个,占比37%。在其中一个商品猪群gE抗体100%阳性猪场进行2组猪伪狂犬病疫苗的实验,通过实验2组商品猪gE抗体18周龄至出栏前均为阴性,同时检测发现变异株疫苗(C株)对经典株和变异株的中和抗体效价均高于Bartha-K61疫苗。结果表明,江苏地区猪伪狂犬病感染压力较大,另外C株疫苗相对于进口的Bartha-K61株疫苗在本场的免疫效果更佳。 相似文献
6.
猪繁殖与呼吸综合征(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome,PRRS),又称猪蓝耳病,是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus,PRRSV)引起的一种高度传染性疾病,其主要临床特征表现为母猪繁殖障碍和仔猪、育肥猪的呼吸困难。自1987年在美国发现以来,该病已在全世界范围内流行。在美国,每年因PRRS造成的损失高达5.6亿~6.6亿美元[1-2]。我国自1996年证实了PRRS的存在以来,特别是发生于2006年春的“无名高热”(即高致病性猪蓝耳病),给我国养猪业造成了巨大的经济损失。 相似文献
7.
口蹄疫疫苗免疫程序大数据监测分析 总被引:1,自引:1,他引:0
随着养殖业的快速发展,疾病防控备受广大养殖者的关注。对于口蹄疫病毒来讲,现阶段还没有一种有效的治疗药,只能通过疫苗接种提高易感动物的免疫力来控制口蹄疫的发生。对于养猪者来讲,一定要正确认识疫苗的作用,使用疫苗的种类不是越多越好,同一种疫苗的免疫次数不是越频繁越好,免疫的剂量也不是越大越好。在疫苗使用方面,一定要正确认识和了解疫苗、正确评估口蹄疫母源抗体的衰减情况、确定仔猪最佳免疫接种时间、科学合理地制定免疫程序,筛选出与本场相适应的疫苗类型进行免疫接种,这样才能起到事半功倍的效果。 相似文献
8.
上期回顾:随着现代生物学技术的发展,越来越多的新型诊断技术不断出现,也为更快速、敏感和特异性地诊断鹅细小病毒(Goose Parvovirus,GPV)感染奠定了基础,上文介绍了琼脂糖凝胶沉淀试验、免疫酶琼脂扩散试验、病毒中和试验、酶联免疫吸附试验、免疫荧光诊断法、反向间接血凝试验、精子凝集试验、胶乳凝集试验等8项血清学诊断技术。 相似文献
9.
[目的]利用大肠杆菌可溶性地表达鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)VP2蛋白。[方法]根据IBDV vp2全长序列(Gen Bank登入号AY704912),设计一对缺失VP2蛋白N-端80个氨基酸残基的特异性引物,克隆IBDV HQ株的vp2基因,插入质粒p ET-22b中构建大肠杆菌周质表达质粒p ET-22b-vp2,经IPTG诱导后表达重组蛋白。[结果]在SDS-PAGE中可见大小约为39 k Da重组蛋白。重组蛋白纯化后,Western Blot检测表明其具有良好的反应原性。[结论]在大肠杆菌细胞周质中可以高效地可溶性地表达鸡传染性法氏囊病毒IBDV VP2蛋白,并且该重组蛋白有较好的免疫原性,可以为后续亚单位疫苗及检测试剂盒开发提供所需的蛋白。 相似文献
10.
为研究免疫塞内卡病毒(SVA)灭活疫苗后豚鼠、家兔与猪血清中和抗体的相关性,分别用0.25、0.5、1.0、2.0 mL的SVA灭活疫苗接种豚鼠和家兔,同时以2.0 mL的SVA灭活疫苗接种猪,分别于免疫前以及免疫后第7天、第14天、第21天、第28天采血液,测定各动物血清中SVA中和抗体,利用Microsoft Excel软件对所得结果进行整理并分析豚鼠与猪血清SVA中和抗体、家兔与猪血清SVA中和抗体之间的线性关系,进一步采用IBM SPSS Statistics 19软件对线性关系的显著性进行分析。结果显示,豚鼠和家兔均可产生SVA中和抗体,且免疫剂量越大,免疫动物产生的SVA中和抗体滴度越高。猪免疫后产生了SVA中和抗体,监测期内随着时间的延长,SVA中和抗体水平逐渐升高。当家兔和豚鼠免疫剂量为1.0 mL时,二者产生的SVA中和抗体与猪SVA中和抗体呈正相关,相关性分别为0.990和0.998,相关性极显著。研究表明,采用1.0 mL的剂量免疫豚鼠或家兔,能间接反应SVA灭活疫苗在猪体的SVA中和抗体水平。 相似文献