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为观察绵羊正常卵巢组织的形态结构,采用苏木精-伊红(hematoxylin-eosin ,HE)染色法制作绵羊卵巢组织石蜡切片。结果显示,在切片制作过程中存在的问题主要包括染色不均、染色对比不明显、过度染色、染色过浅和切片出现斑点等。在试验过程中可通过充分分化、蓝化、充分水洗等因素的控制来提高切片的染色效果,该方法可为动物卵巢及卵泡染色切片制作提供技术指导。 相似文献
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通过在公鸡日粮中添加不同水平亚硒酸钠,研究硒对公鸡睾丸组织中细胞周期基因Cdc25A表达的影响,进而为硒调控精子发生周期和生精细胞凋亡的机理提供参考依据。选取80只体重接近、健康无疾病的海兰白成年公鸡,随机分成4组,每组20只,分别在日粮中添加0、0.5、1.0和2.0 mg/kg的亚硒酸钠,试验结束时,采集睾丸备用。采用qRT-PCR 检测硒对公鸡睾丸组织中 Cdc25A 基因的表达差异。结果表明,0.5 mg/kg组Cdc25A表达量显著高于其他处理组,且各组之间差异显著(P<0.05)。由此可见,日粮中硒的最适添加量为0.5 mg/kg,此时,Cdc25A mRNA表达量最高,高硒(超过0.5 mg/kg)则会抑制该基因的表达。 相似文献
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通过在日粮中添加亚硒酸钠,研究不同水平无机硒对公鸡睾丸组织细胞结构的影响。选取80只体重接近、健康无疾病的海兰白成年公鸡,随机分成4组,每组20只鸡。对照组饲以基础日粮;硒处理组分别在基础日粮中添加0.5、1和2 mg/kg的亚硒酸钠。H-E染色的结果表明:0.5 mg/kg组公鸡睾丸发育最好,各级生精细胞数量最多;1 mg/kg组睾丸各级生精细胞较多,但细胞间存在明显间隙,成熟精子较少;而2 mg/kg组睾丸组织结构已经发生一定程度的损伤,各级精细胞数量都较少。试验说明,日粮添加适宜浓度的硒可促进公鸡睾丸的发育,而较高的硒添加量会使睾丸发育不良。 相似文献
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[目的]本试验旨在探究不同繁殖力湖羊直肠内容物代谢产物及肠道菌群结构的变化特点,分析湖羊繁殖性能与肠道微生物间的相关性.[方法]选取体型均一、生理状态相似的连续三胎产三羔(高繁组,HP组)和产单羔(低繁组,LP组)空怀湖羊各6只,每组3只,对其进行同期发情处理,分别在撤栓时(发情前,LP1组、HP1组)和发情时(LP2... 相似文献
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旨在研究AMPK激活剂二甲双胍(metformin,Met)和阿卡地新(acadesine,AICAR)对绵羊精液冷冻保存效果的影响。本研究首先在冷冻基础稀释液中分别添加不同浓度(0、100、200、300、400、500 μmol·L-1)的Met和AICAR,冷冻解冻后根据精子活力、运动性能和结构完整性指标筛选出最佳的添加浓度(400 μmol·L-1 Met、200 μmol·L-1 AICAR);然后分别使用不同的冷冻稀释液(对照组:稀释液;Met组:含400 μmol·L-1 Met的稀释液;AICAR组:含200 μmol·L-1 AICAR的稀释液)冷冻精液,解冻后检测精子中AMPK蛋白表达、顶体酶活性、代谢指标、线粒体功能以及抗氧化酶活性。结果表明,稀释液中添加400 μmol·L-1 Met和200 μmol·L-1AICAR均可显著提高解冻后精子活力、运动性能及精子结构完整性(P<0.05),其中400 μmol·L-1 Met组精子总活力达43.20%,顶体完整率为91%,质膜完整率为46%。与对照组相比,Met组和AICAR组解冻后精子中AMPK磷酸化水平显著升高(P<0.05);顶体酶活性显著提高(P<0.05);丙酮酸水平显著下降(P<0.05),乳酸脱氢酶活性、乳酸以及ATP含量均显著升高(P<0.05);与对照组相比,Met和AICAR组稀释液更有利于维持线粒体膜电位(P<0.05),提高ATP酶(P<0.05)以及抗氧化酶的活性(P<0.05)。添加适当浓度的AMPK激活剂可以提高绵羊精液冷冻保存的效果。 相似文献
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[目的]本试验旨在建立一个实时追踪山羊细胞自噬发生状况的工具,以探讨细胞自噬对睾丸支持细胞(SC)和生殖细胞的影响。[方法]通过PCR法扩增mCherry-EGFP-LC3基因序列1 884 bp,将其导入真核表达载体pEX-3中,得到重组质粒pmCherry-EGFP-LC3;将pmCherry-EGFP-LC3及对照质粒p EX-3分别转染体外分离培养的山羊SC,饥饿处理12 h后用荧光显微镜观察融合蛋白在细胞中的表达,用RT-qPCR和Western blot检测细胞中自噬相关基因和蛋白表达变化,用透射电镜观察细胞自噬体的形成。[结果]成功构建了双荧光自噬报告载体,该载体能在山羊SC中表达,荧光显微镜下可见绿色荧光和红色荧光表达;饥饿处理后,该载体可以指示细胞中自噬泡的形成过程,且细胞自噬相关标记Beclin1 mRNA以及LC3Ⅱ/LC3ⅠmRNA比值和蛋白水平均显著上调,并能观察到初始自噬体的形成。[结论]获得的山羊SC可以作为后续试验的细胞模型;构建的双荧光pmCherry-EGFP-LC3自噬报告载体可为进一步研究山羊SC的自噬发生提供有效的工具。 相似文献