过表达ZmIBH1-1提高玉米苗期抗旱性

【目的】干旱是严重影响玉米生长发育进程的一个重要因素。挖掘玉米抗旱相关基因,通过转基因功能验证和转录组分析,解析关键基因在响应干旱胁迫过程中的分子调控机制,为抗旱分子育种和遗传改良提供理论依据。【方法】以玉米自交系B104（WT）为背景材料,利用农杆菌介导方法构建过表达ZmIBH1-1转基因株系（ZmIBH1-1-OE）;通过对转基因植株进行草铵膦抗性筛选、标记基因和目的基因PCR检测,以及运用实时荧光定量PCR检测目的基因的表达情况,鉴定阳性植株和株系;以WT和ZmIBH1-1-OE转基因株系为材料,通过干旱处理（20% PEG6000）,进行表型鉴定和耐旱生理生化指标测定,验证ZmIBH1-1的抗旱功能;通过对干旱胁迫下玉米4叶期转录组的比较分析,鉴定出差异表达的基因（differentially expressed genes,DEGs）;结合DAP-seq（DNA affinity purification sequencing）分析,初步确定ZmIBH1-1蛋白直接调控与抗旱相关的下游靶基因,利用基因组可视化软件IGV（integrative genomics viewer）分析ZmIBH1-1蛋白结合候选靶基因的位置,然后通过Dual-Luciferase试验验证ZmIBH1-1蛋白与靶基因的调控关系。【结果】通过玉米遗传转化获得12个转化事件;T₃代中,能同时检测到标记基因Bar和目的基因ZmIBH1-1的植株有458个,实时荧光定量PCR检测结果表明,ZmIBH1-1-OE中ZmIBH1-1的表达量显著高于WT,株系3和株系8表达量最高,将其自交获得T₄代转基因株系用于后续试验。在干旱胁迫条件下,ZmIBH1-1-OE株系存活率、叶片相对含水量、叶绿素含量、可溶性蛋白含量及其生理生化指标（超氧化物歧化酶、过氧化物酶、过氧化氢酶活性）均显著高于WT,说明玉米中过量表达ZmIBH1-1赋予玉米更高的耐旱性。转录组分析结果表明,WT与ZmIBH1-1-OE株系在干旱胁迫下有1 214个差异表达基因;Gene Ontology（GO）功能富集分析结果表明,差异表达基因主要涉及生物过程、细胞组分和分子功能,如在生物过程中主要涉及到光合作用、应激响应、脱水响应等;KEGG富集分析表明,差异表达基因主要参与植物激素信号传导、新陈代谢等过程。结合转录组显著差异表达基因和DAP-Seq分析所得到ZmIBH1-1蛋白的靶基因,初步确定ZmIBH1-1蛋白直接调控与抗旱相关的11个候选靶基因,包括2个钙信号相关基因、3个半胱氨酸代谢相关基因、1个bHLH转录因子、1个应激响应蛋白、1个谷胱甘肽转移酶、1个氧化还原过程蛋白和2个乙烯响应因子;基因组可视化结果显示ZmIBH1-1蛋白可以结合靶基因启动子区;随后通过Dual-Luciferase试验进一步表明,ZmIBH1-1蛋白可以直接作用于11个候选靶基因,其中,ZmIBH1-1蛋白可以促进ZmCa-M、ZmSYCO、ZmbHLH54、ZmGlu-r1、ZmCLPB3和ZmP450-99A2的表达,抑制ZmAGD12、ZmCYS、ZmCYSB、ZmERF-107和ZmEIN3的表达。此外,在干旱胁迫下NAC、WRKY、MYB等转录因子在ZmIBH1-1-OE和WT株系中也存在差异表达。【结论】ZmIBH1-1的过表达可以增强玉米苗期的耐旱性;ZmIBH1-1蛋白通过直接调控乙烯信号通路中的ZmERF-107和ZmEIN3的表达提高玉米的耐旱性;ZmIBH1-1蛋白通过直接调控钙信号相关基因ZmCa-M和ZmAGD12增强玉米的耐旱性;ZmIBH1-1蛋白可能通过间接调控NAC、WRKY、MYB等转录因子响应干旱胁迫。     

反贫困背景下的四川蚕桑产业发展路径

正四川历来是蚕桑生产大省,最高年发种量曾经高达1200万张,生丝产量占据全国70%。四川也是我国扶贫攻坚的重点省份,全省有36个国定重点贫困县(全国592个国定贫困县),52个省定贫困县,11501个贫困村,主要分布在四大片区(见表1)。全省40个蚕桑基地县,有28个属于"老少边穷"地区,全省有698个     

圈养小爪水獭繁殖期日行为节律及时间分配的观察

正小爪水獭又名亚洲小爪水獭,属于食肉目鼬科,属国家Ⅱ级重点保护动物,是世界上最小的水獭种,体长一般为60～94 cm。小爪水獭分布于印度、斯里兰卡、尼泊尔、巴基斯坦、缅甸等多个国家,主要生活于海拔1 500 m以下的亚热带山地河谷中。小爪水獭过着一夫一妻制的生活,多在春、夏两季繁殖产仔,每年繁殖1～2胎,每胎产2～4仔,生下的小爪水獭哺乳3个月后就能独立生活。我国拥有占世界近1/4的水獭物种,对水獭的研究主要集中在饲养管理、生态分布和     

植物在风景园林建筑设计中的应用

植物作为一种非常重要的景观元素,在风景园林建筑设计中应用十分广泛。在风景园林设计中应用植物能有效突出该设计的观赏性,与周围的构筑物形成组景,使整个设计富有生态气息。本文将主要分析植物在风景园林建筑设计中的作用以及存在的问题,最后有针对性地提出植物在风景园林设计中如何应用的策略。     

孔雀痘病的诊治

我市某珍禽养殖场饲养的孔雀自２００２年７月份以来，发生一种以生长发育不良、精神萎顿、致死率高为特征的疾病，８月１０日来我站就诊。根据临床症状、剖检变化、实验室检查，确诊为孔雀痘病。经对症治疗，病情很快得到控制。由于痘病多见于鸡、火鸡、鸽、金丝雀发病，孔雀发生痘病在我市尚属首例。１发病情况据场方有关人员介绍，该场共饲养幼龄孔雀２２只，由于管理粗放，防疫意识淡薄，引进后一直未按有关防疫程序搞防疫。自７月份以来，陆续有个别孔雀出现精神萎糜、食欲不振甚至废绝等症状，身体日渐消瘦，每隔三五天死亡一只孔雀，…     

农用抗生素SH-62对柑桔贮藏防腐的效应

为了从微生物农药的角度研究和寻找对柑桔青霉、绿霉、酸腐、黑腐等病原菌有较强抑制作用的有效药剂,我们以从不同土样中分离获得的2000多株放线菌,通过菌块法筛选得到一些对上述病菌具有抑制性能的菌株,然后将这些菌株发酵,进行活性测定,并利用其发酵液进行实验室柑桔防腐试验     

森林保护工作需要注意的几个问题

西部大开发将生态环境建设作为根本和切入点，又将林业建设作为生态建设的主体，为林业工作提供了千载难逢的历史机遇，提出了更高的要求。为抓住机遇，把阿盟林业工作搞上去，当前，在森林保护方面要特别注意以下几个方面的问题。 　　一、森林防火问题。贺兰山、额济纳两大林区自新中国成立以来未发生重大森林火灾。但目前防火形势十分严峻，其主要原因：一是贺兰山林区山高坡陡，额济纳胡杨林线长、面广，加之两大林区实施退牧还林、围栏封育工程后，林区内林草生长茂盛，地表植被增多，火险隐患明显增加；二是去冬今春以来全盟干旱少…     

国家林业局原局长王志宝在中西部地区退耕还林还草工作座谈会上的讲话

1　关于试点工作进展情况　　国务院西部地区开发会议决定开展退耕还林还草试点工作以来 ,国家林业局、国家计委、财政部联合下发了《关于开展 2 0 0 0年长江上游、黄河上中游地区退耕还林 (草 )试点示范工作的通知》(林计发〔2 0 0 0〕111号 ) ,并印发了试点实施方案 ,对退耕还林还草工作进行了安排部署。二是经专家充分论证 ,编制下发了《长江上游、黄河上中游地区 2 0 0 0年退耕还林 (草 )试点示范科技支撑方案》。三是对 174个试点县的主管领导和技术骨干进行了政策、技术培训。四是组织专业队伍 ,对先行启动的四川、陕西、甘肃 3省 199…