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选取6 种常用的限制性内切酶(Acc I、Ban II、EcoR I、Hind III、Sac I、Sca I)用于检测其直接在PCR 缓冲液中完全酶切DNA 的活性。结果表明:在PCR 缓冲液中,需要加入MgCl2作为激活因子的前提条件下,除了EcoR I 表现出星状活性外,其他酶均能完全酶切无甲基化λDNA,其结果与在酶生产厂商推荐的反应缓冲液中进行的酶切反应结果一致;在完成PCR 扩增的PCR 缓冲液中,所有酶(包括RcoR I)均能功能正常地对PCR 产物完全酶切,表明可在PCR 扩增完毕后的反应体系中直接加入限制性内切酶进行酶切反应,无需对PCR 产物进行预先纯化;镁离子浓度在2.5 mmol·L-1至10 mmol·L-1范围内对PCR 缓冲液中的限制性内切酶的活性无显著影响。上述方法可用于限制性片段长度多态(RFLP)以及单链构像多态(SSCP)研究中,但能否用于分子克隆有待进一步实验。图3 表1 参7。 相似文献
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为选择适合在沿河县推广的水稻品种,引进11个杂交水稻新品种进行同田对比试验。结果表明:中浙优10号产量最高,达676.73公斤/亩,比对照中优169(526.34公斤/亩)增产150.39公斤/亩,增长28.57%。综合各品种的表现,认为中浙优10号、中浙优1号、秀香优8号、宜秀优800、晶两优华占等5个品种可在沿河县相应区域大面积推广。 相似文献
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