猪凝血酶的亲和层析纯化及其酶原的激活研究

采用柠檬酸钡作吸附剂，ＥＤＴＡ溶解的方法从猪血浆提取凝血酶原，建立了凝血酶原激活的简单方法。并以环氧氯丙烷活化的Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ４Ｂ为载体。采用１－乙基－３－（３－二甲氨丙基）碳二亚胺进行肝素的固定化，将固定化肝素用于猪凝血酶的亲和层析纯化。结果表明，通过一步亲和层析将猪凝血酶粗品提纯了８．２倍，获得了比活超过１１００Ｕ／ｍｇ的凝血酶，收率为６０％。     

猪凝血酶的亲和层析纯化及其酶原的激活研究

采用柠檬酸钡作吸附剂、ＥＤＴＡ溶解的方法从猪血浆提取凝血酶原，建立了凝血酶原激活的简单方法。并以环氧氯丙烷活化的Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ为载体，采用１－乙基－３－（３－二甲氨丙基）碳二亚胺进行肝素的固定化，将固定化肝素用于猪凝血酶的亲和层析纯化。结果表明，通过一步亲和层析将猪凝血酶粗品提纯了８．２倍，获得了比活超过１１００Ｕ／ｍｇ的凝血酶，收率为６０％。     

猪凝血酶的分离纯化及部分性质研究

经等电点沉淀,DEAE离子交换纤维素柱层析和Sephadex G-100 分子筛层析从猪血浆中纯化得到猪凝血酶,酶比活力为2 000 U/m g,纯化倍数为100,酶活力回收为56% ,酶反应的最适pH 和温度分别为7.0 和37℃,SephadexG-100层析测得酶分子量为36 000。猪凝血酶的稳定性较差,40℃保温27 h, 酶活力下降84% 。高浓度的盐对酶稳定性有较大的影响,在2 m ol/LNaCl下放置3 h,酶活力下降50% 。     

枯草芽孢杆菌86315α-淀粉酶的研究 Ⅱ.分离提纯、性质及动力学

采用壳聚糖絮凝、淀粉吸附、乙醇沉淀等步骤,从枯草芽孢杆菌86315发酵液中提取了α-淀粉酶,然后用Sephadex G-100凝胶过滤、DEAE-纤维素柱层析进一步提纯,得到DISC-电泳一条带的α-淀粉酶制剂。用SDS-PAGE测出其分子量为54000。用等电聚焦测出其p~1为5.2。动力学实验表明:最适温度60℃;最适pH5.6;对可溶性淀粉的Km值是3.0mg/ml;Ca~(2+)、Mg~(2+)、Ba~(2+)对α-淀粉酶活性稍有激活作用;Mn~(2+)不影响酶活性;Fe~(2+)、Fe~(3+)、Cu~(2+)、Ag~(1+)、甲醛、EDTA以及戊二醛都明显抑制酶活性。该酶在50℃以下是稳定的,pH稳定范围是5.6～8.8,对60％乙醇有高度的稳定性,易被尿素变性。     

枯草芽孢杆菌86315α-淀粉酶的研究(Ⅰ)热稳定性

研究了温度对枯草芽孢杆菌86315α—淀粉酶的活性和荧光光谱的影响,发现该酶在50℃以下是稳定的;70℃加热10min,酶活性全部丧失,荧光光谱发生了较大的变化;在0.02mol/L CaCl~2和0.02mol/L NaCl同时存在下,70℃加热     

猪凝血酶的分离纯化和部分性质研究

以猪血为材料,采用等电点沉淀和７２４树脂离子交换柱层析分离提纯,得凝血酶原,经ＣａＣｌ２激活后,通过ＤＥＡＥ－纤维素离子交换柱层析,获得比活为１２００ＩＵ／ｍｇ的凝血酶制剂,其收率为３２．１％。研究发现,ＮａＣｌ浓度对猪凝血酶活力有较大的影响,加１ｍｏｌ／ＬＮａＣｌ于凝血酶溶液中,室温（２５℃）放置３ｈ后,活力丧失５０％。猪凝血酶的最适温度和最适ｐＨ分别是３７℃和ｐＨ７．０。猪凝血酶在ｐＨ７．０、４０℃下放置２７ｈ,活力丧失８４％。通过ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００凝胶层析,测出猪凝血酶的分子量为３０ｋｄ。     

虾头蛋白质的提取及营养分析

虾头蛋白质的提取及营养分析史永昶姜涌明赵国骏（江苏农学院基础部，扬州２２５００９）河虾头和龙虾头是虾仁生产过程中的下脚料，目前只有小部分用来作饲料，大部分则被废弃，这不仅是资源的浪费，且污染环境。目前越来越多的企业开始以龙虾头和河虾头为原料提取甲壳素...