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为了能在野外调查中和野生动物执法检查、打击虎产品走私工作中对发现的可疑虎残余物或虎产品等样品进行快速,准确的鉴定,东北林业大学野生动物资源学院近日建立了可以对虎线粒体DNA进行特异性扩增的PCR方法。 虎线粒体DNA细胞色素B(Ctyb)段由1140个碱基组成,通过用Wdnasis软件比较10只苏门达腊虎、15只东北虎、7只孟加拉虎、3只印支虎及5只华南虎Ctyb的碱荃序列,寻找到它在Ctyb段的保守区域,再与猞猁、雪豹、狮、豹猫、金钱豹、云豹、猎豹及家猫等多种猫科动物和梅花鹿,黑麂、赤鹿、獐、… 相似文献
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根据Genbank上发表的水貂阿留申病毒基因序列数据,设计了3对引物,采用PCR的方法分别对ADV-DL1、ADV-DL2株非结构蛋白基因进行扩增,将各片断克隆至pMD18-T载体,经PCR鉴定后进行了序列测定和分析。结果显示,ADV-DL1、ADV-DL2与GenBank上公布的ADV毒株相比,核苷酸序列同源率NS1为85.9%~90.0%,NS2为85.1%~92.7%,NS3为83.0%~95.1%。ADV-DL1与ADV-DL2同源率NS1为93.7%,NS2为95.6%,NS3为98.5%。氨基酸同源率NS1为82.8%~85.8%,NS2为80.7%~92.1%,NS3为72.9%~95.4%。ADV-DL1与ADV-DL2同源率NS1为90.3%,NS2为92.1%,NS3为95.4%。 相似文献
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水貂阿留申病毒VP2基因主要抗原表位区的原核表达 总被引:1,自引:0,他引:1
根据GenBank中已发表的水貂阿留申病毒(ADV)VP2基因核苷酸序列分别设计合成两对引物,用PCR方法扩增ADV国内分离株VP2基因中主要抗原表位区的两个片段,分别将其克隆到原核表达载体pMAL-c2的多克隆位点中。经酶切、PCR扩增和测序分析证实其已正确插入到表达载体中,且阅读框是正确的,构建原核表达载体pMAL-VPa和pMAL-VPb。阳性重组质粒转化宿主菌TB1,用IPTG进行诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE检测和免疫印迹分析。结果表明两段蛋白均获得了表达,表达产物的分子质量分别约为63、65kD,与理论推测的分子质量一致;并在终浓度为1mmol/L的IPTG诱导下,4h时其表达量达到高峰;Western blot分析表明表达蛋白能被兔抗MBP抗体所识别,具有一定的抗原性。 相似文献
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应用PCR技术进行Puumala病毒核酸片段的特异性扩增.将为进一步研究Puumala病毒和相关病毒.以及检测此类病毒感染提供更加特异、敏感、快速的方法。依据已知的Puumala病毒核酸序列,从M节段选出5对寡核苷酸作为PCR反应中的引物,以Puumala病毒RNA作为模板。做PCR。PCR产物分别经凝胶电泳和核酸杂交的方法进行测定,结果表明。目的核酸片段得到了很好的扩增。 相似文献
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根据GenBank已知的H6N1亚型流感病毒的NA基因序列,设计扩增NA基因的特异性引物,通过RTPCR技术扩增5株H6N1亚型禽流感病毒NA基因序列,并将其克隆到pMD18-T载体后进行了测序分析.同时通过生物学软件对5株禽流感病毒NA基因进行了分析研究.结果表明:5株禽流感病毒NA基因全长1 410 bp,编码47... 相似文献
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大熊猫传染性疾病的研究概况 总被引:1,自引:0,他引:1
大熊猫的传染性疾病作为大熊猫的重要疾病之一,愈来愈受到人们的重视。为了给大熊猫传染性疾病的防治和研究提供一些基础资料,我们收集了有关研究论文和病例报道共26篇,涉及多种病毒性和细菌性传染病。其中,瘟热病、病毒性肠炎、大肠杆菌病等对大熊猫威胁较大。这些疾病较为多见,对其发病原因、临床症状、病理变化、防治措施等都有人做过较为细致地研究和 相似文献
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2007年秋我们从迁徙水禽绿头鸭(Anas platyrhynchos)中分离出一株H6N1亚型低致病性禽流感病毒A/Mallard/Heilongjiang/301/2007.通过设计特异性引物对其非结构蛋白基因(NS)进行了全序列的扩增,并在GenBank中的序列进行比较,发现A/Mallard/Heilongjiang/301/2007属于欧亚系禽流感病毒,此株病毒NS基因与duck/Hokkaido/Vac-1/2004 H5N1株NS基因同源率高达98.5%,可能与北海道地区禽流感病毒具有共同起源.另外此株病毒NS基因在263~277位并没有发生15碱基的缺失,所以应属于等位基因A,亚系Ⅰ型. 相似文献
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参照已发表的犬瘟热病毒(CDV)核蛋白基因(N)序列设计合成了1对引物,用RT-PCR方法对从发病狐、貉中分离的MS01、SC01、ZD01三株CDV的N基因进行扩增,并分别将其PCR产物进行克隆和测序。测序结果表明:3病毒分离株N基因阅读框架全长均为1572bp,编码523个氨基酸。利用DNAstar的MegAlign生物软件,将3病毒分离株与Genbank数据库中现有的CDV毒株的N基因序列及推导出的氨基酸序列进行了同源性比较和系统进化树分析,结果发现:3病毒分离株与强毒参考株A75/17等野毒株高度同源,核苷酸同源为96.2%~99.1%,氨基酸同源为96.0%~99.8%,而与疫苗株Onderstepoor相对较远,核苷酸同源为93.6%~94.0%。N基因的系统进化关系分析显示:3病毒分离株均归为强毒株,并且与中国新疆的TN株、中国台湾的Kaohsiung株基因型最近,表现出一定的地理位置相关性。 相似文献
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为了解猪源多重耐药大肠杆菌中整合子的流行状况和分子特性,分析整合子在细菌多重耐药中的作用,采用PCR方法检测75株多重耐药大肠杆菌中整合酶基因和整合子基因盒。结果显示,猪源大肠杆菌Ⅰ型整合子流行普遍,75株猪源大肠杆菌中检出Ⅰ类整合子56株,检出率为74.7%;检出Ⅱ类整合子4株,检出率5.3%;未检出Ⅲ类整合子。共检出5种Ⅰ型整合子,各种Ⅰ型整合子整合不同种类、不同数目的耐药基因盒。这表明Ⅰ型整合子对细菌多重抗药性的产生和传播起着重要作用,整合子是介导细菌多重耐药性的重要分子机制。 相似文献