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研究牦牛胃溶菌酶基因(yak stomach lysozyme gene, ys LYZ)在解脂耶氏酵母中的异源表达、分离纯化及抗菌机制。通过人工合成构建p INA1297-ys LYZ,转化至宿主解脂耶氏酵母(Polh)菌株,分别培养24、48、72 h及96 h。发酵上清液经纯化后得到重组牦牛胃溶菌酶(recombinant yakstomach lysozyme, rys LYZ)。通过十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate poly-acrylamide gel electrophoresis, SDS-PAGE)检测rys LYZ的分子量,用检测试剂盒测定其比活,通过电镜观测其对金黄色葡萄球菌的作用,并对rys LYZ在模拟猪胃液中的降解情况进行了观察。结果表明:rys LYZ的分子量为15 k Da,其表达量在培养72 h时最高,纯化后比活为1 855.42 U/mg。电镜下观察到rys LYZ作用金黄色葡萄球菌后,菌体出现孔洞,最终崩解。在模拟猪胃液中,rys LYZ可在胃蛋白酶作用4 h后仍保持部分完整,表明其具有优良的抗胃蛋白酶... 相似文献
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