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旨在研究母猪Nhlh2基因启动子活性及其与转录因子之间的调控关系,为探索该基因的表达调控提供分子水平的依据,也为研究母猪繁殖机制提供一定的参考。本研究以猪卵巢组织DNA为模板,PCR扩增Nhlh2不同长度的启动子缺失片段,克隆到pGL3-basic载体构建启动子报告基因重组质粒,并将其转染到猪卵巢颗粒细胞,测定相对双荧光素酶活性值;通过染色质免疫共沉淀技术(ChIP),研究Nhlh2启动子与YY1、C/EBPβ蛋白之间的相互作用;随后构建转录因子超表达、突变载体和小干扰RNA(siRNA),利用双荧光素酶检测系统进行活性验证。经双荧光素酶报告系统检测发现,Nhlh2基因的P7(-238~+129)区域启动子转录活性最高,-654~-238片段范围可能存在负调控元件,-238~-20区域可能存在正调控元件;通过生物信息学分析和ChIP验证,Nhlh2启动子区-101~-85和-153~-140区域分别是转录因子YY1和C/EBPβ的结合位点;突变YY1和C/EBPβ的结合位点后,P7的双荧光活性显著上调;超表达YY1和C/EBPβ后,P7的双荧光活性显著下调;干扰YY1和C/EBPβ的表达后,P7的双荧光活性显著上调。本研究确定了猪Nhlh2基因的核心启动子区域为-238~+129,YY1和C/EBPβ分别结合在Nhlh2基因启动子区的-101~-85和-153~-140区域,抑制猪Nhlh2基因的转录活性。 相似文献
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分析了8个生食型牛奶玉米品种(组合)在四川(正季)和云南(反季)种植条件下的适应性、产量和品质表现,为当地筛选适应性品种提供参考。2021-2022年连续两年分别在四川和云南,对供试品种(组合)主要农艺性状、经济性状和品质性状进行了考察。结果表明：生育期、株高、穗位高等性状在品种(组合)、年份和地点间差异均达显著水平,云南反季生育期较四川正季要长,株高、穗位高要明显高于四川点;供试品种(组合)云南点平均产量均高于四川点,在两点间产量表现较为稳定的是新选组合3和雪甜232,除雪甜232外,其余品种的单穗产量均低于250 g。品种(组合)云南点和四川点的平均商品率表现较为稳定,新选组合1在四川和云南两季表现相对较好,商品率均超过80%。皮渣率在不同品种(组合)间存在显著差异,但同一品种(组合)在不同年份和地点间差异不显著,皮渣率较小的品种有雪甜7401和雪甜118;在总糖和还原糖含量方面,大部分供试品种(组合)间存在显著差异,同一品种(组合)在不同地方和年份间也存在显著差异,绝大部分品种(组合)在云南点的总糖和还原糖含量均显著高于相应四川点,其中总糖含量较高且较为稳定的品种(组合)有新选组... 相似文献
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