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应用RT-PCR方法从鸡脑中扩增P物质(Substance P,SP)基因片段,将其连接于pGM-T质粒并转化大肠杆菌,挑取阳性克隆,测序鉴定为目的片段。分别利用pGM-T质粒中T7和SP6启动子及T7和SP6RNA聚合酶,以线性化的SP/pGM-T为模板转录合成正、反义DIG标记RNA探针。通过原位杂交(in situ hybridization histochemistry,ISHH)技术,用新合成的探针探查SP-mRNA在鸡肠Remak神经(Intestinal nerve of Remak,INR)中的分布情况。结果表明,鸡INR中SP-mRNA阳性神经元数量众多,在空、回肠段和直肠段INR中的阳性细胞分别占总神经元的82.98%和98.01%。阳性细胞呈多突起的椭圆形或梭形,在INR神经节中较有规律地层状分布或成群出现,在神经节边缘分布更为密集,并且在节间束也有少量的阳性细胞分布。本研究从基因水平证明INR中大部分神经元有SP的mRNA转录,这些神经元作为外来的SP神经纤维可以支配到肠道和输卵管。 相似文献
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肠Remak神经(Intestinal nerve of Remak,INR)是禽类特有的一条神经节链。取鸡INR制备冰冻切片并将切片分别进行苏木精-伊红和甲苯胺蓝染色。在光镜下观察INR内神经元的形态,统计神经元的数量,测量神经元的面积并用SPSS软件对数据进行分析。通过观察发现,不同肠段INR内神经元的形态存在差异。数量统计显示INR神经节内包含大量的神经元胞体,每只鸡的INR内神经元的总数平均为31821个,并且直肠段INR内的细胞数量最多,为27109个。空肠段INR内神经元的平均面积最大,达到478.46μm2,面积较大的神经元所占的比例也最高;而直肠段INR内单个神经元的平均面积最小,约为391.74μm2。可以推测不同段INR中神经细胞的形态、大小和数量具有一定差异,这种差异可能与其对胃肠道功能的调节有关。 相似文献
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猪尿中6种β-受体激动剂残留的超高效液相色谱-串联质谱法同时测定 总被引:1,自引:0,他引:1
建立了猪尿中苯乙醇胺A、莱克多巴胺、克仑特罗、西马特罗、特布他林、沙丁胺醇等6种β-受体激动剂在多反应监测模式下超高效液相色谱.串联质谱同时检测的方法。尿样经酶解,调至酸性,经固相萃取技术(SPE)净化富集。6种受体激动剂在0.2-5ng/mL的浓度范围内线性关系良好。方法的检出限和定量限分别为0.2ng/mL和0.5ng/mL。考察了0.5ng/mL、1ng/mL和2ng/mL三个添加浓度的回收率。6种化合物的加标回收率为87.2%-106.6%:RSD为1.2%-13.8%。该方法精密度好,灵敏度高,重现性好,能简便、快速、准确地测定猪尿中六种β-受体激动剂。 相似文献
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