鸭流感的临床病型

禽流感(Avian Influenza,AI)是由A型流感病毒 (Avian Influenza Virus,AIV)引起禽类的一种疾病综合征,鸡、火鸡以及鸭、鹅、鹌鹑、海鸥等家禽、水禽、野鸟均可感染,引起禽类出现高度死亡、产蛋量下降、严重的呼吸道病、系统综合征或隐性感染等多种病型,对养禽业可造成巨大经济损失。目前AI已成为威胁全球养禽业的头号大敌。众所周知A型流感病毒最复杂的生态系统在于禽类,尤其是水禽。关于水禽(鸭、鹅等)流感,尤     

雏野鸭大肠埃希氏菌性窦炎的诊断与治疗

2003年5月，福建省罗源县某野鸭场18日龄野鸭出现眶下窦肿胀、失明，剖检见纤维素性心包炎或典型纤维素性心包炎、肝周炎和气囊炎病变。并从病死鸭眶下窦中分离出大肠埃希氏菌，经实验室鉴定其血清型为O57，以该菌株通过滴鼻接种北京雏鸭进行动物回归试验，成功复制出与自然病例相同的鸭窦炎。由此可见O57大肠埃希氏菌经滴鼻途径感染可引起鸭窦炎。     

鸭巴泰病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立

为建立鸭巴泰病毒(Batai virus,BATV)SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测方法,研究根据鸭BATV非结构蛋白(NSs)基因特征,设计引物,经条件优化后建立检测BATV感染的qRT-PCR方法。用建立的qRT-PCR方法对临床72份疑似BATV感染的病料进行检测,并对阳性样品进行病毒分离,评价两种方法的符合率。结果表明,当病毒NS基因含量为3.59×10~2~3.59×10~7拷贝/μL时有良好的线性扩增,其扩增相关系数为0.9994,扩增效率为98%。最低检测限为3.59×10~2拷贝/μL;扩增产物的熔解曲线分析只出现1个单特异峰,无引物二聚体,Tm值为(81.60±0.16)℃,对鸭源常见病毒(如鸭甲肝病毒、禽坦布苏病毒、禽Ⅰ型副黏病毒、H9N2亚型禽流感病毒、新型鸭呼肠孤病毒和番鸭呼肠孤病毒)检测均为阴性,组内变异系数和组间变异系数分别为0.49%~1.99%和0.58%~2.18%。临床送检的72份病料SYBRⅠ实时荧光定量PCR方法的阳性率为4.17%(3/72),并分离到2株鸭源BATV,2种方法的阳性符合率为66.67%(2/3)。建立的基于SYBRⅠ检测BATV的qRT-PCR方法、特异性强、灵敏度高、重复性好,可用于BATV的分子流行病学研究。     

宿迁市湿地资源的现状及保护对策

<正>湿地是陆地与水域之间相互作用形成的自然综合体,不仅具有蓄洪抗旱、调节气候、纳污解毒等作用,而且是众多野生动植物,特别是珍稀水禽的繁殖和越冬场所,被誉为"地球之肾"。宿迁市地处江苏北部,属于暖温带季风气候,境内拥有"两湖"(洪泽湖、骆马湖)、"两河"(古黄河、京杭大运河),河流密布,水系纵横,河湖、低地、沼泽面积占27.0%,自然湿地资源丰富。随着工业化、城镇化的发展,全市自然湿地资源面临严重     

番鸭关节炎病例鸭疫里默氏菌的分离与鉴定

为探究跛行番鸭的发病原因,采集关节内的脓性渗出物进行细菌分离,PCR鉴定细菌种属,琼脂扩散试验鉴定其血清型,纸片法分析其药物敏感性。结果,分离鉴定到1株血清1型鸭疫里默氏菌。该菌敏感的药物有阿米卡星、庆大霉素、新霉素、氟苯尼考和头孢氨苄等。此结果为该鸭场防治鸭疫里默氏菌病疫苗选用和临床用药提供了科学理论依据。     

猪源ST9型耐甲氧西林金黄色葡萄球菌中前噬菌体的流行状况与转导分析

本研究旨在分析猪源ST9型耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,MRSA)中前噬菌体的流行情况、结构特点和转导能力,探究前噬菌体在猪源MRSA流行克隆形成中的作用。基于全基因组信息,分析了近年来从我国多省分离的131株ST9型MRSA中前噬菌体的流行率、分型、亲缘关系和结构特征;选取含不同分型前噬菌体的菌株进行诱导,对诱导获得的噬菌体颗粒进行转导,测定转导子的耐药表型及体外适应性。研究结果显示：猪源ST9型MRSA的前噬菌体携带率为78.6%(103/131株),其中,63株携带完整前噬菌体序列,所有前噬菌体序列均不含耐药基因,仅2.9%(3/103株)的前噬菌体序列含毒力基因;前噬菌体谱型丰富,其整合酶分型主要为Sa2int和Sa4int;各型别前噬菌体结构同源性较高,完整前噬菌体可被诱导为长尾噬菌体;噬菌体颗粒可包装供体菌的aadD、tet(L)耐药基因并转导至受体菌中;转导子可获得卡那霉素、四环素耐药表型,体外生长能力与受体菌株无明显差异(P>0.05)。研究结果表明：猪源ST9型MRSA的前噬菌体携带率较高,谱型丰富,不携带耐药基因,部分噬菌体可包装供体菌的耐药基因转导至受体菌,产生的适应性代价小。     

中国福建地区H5Nx水禽流感病毒Clade 2.3.4.4分支分子特性分析

为了明确中国福建地区HA基因序列遗传进化关系及氨基酸变异特征,本研究对福建省近5年分离的8株H5N8和H5N6亚型病毒进行HA基因序列测定及遗传进化分析,并通过同源序列比对、同源建模、空间三维结构比对方法对HA蛋白抗原进化、受体结合特性、氨基酸关键位点进行分析。研究结果表明,分离得到的毒株HA基因属于Clade 2.3.4.4分支,HA氨基酸序列裂解位点含有多个连续碱性氨基酸,具备高致病性禽流感特征。HA受体结合位点分析表明,福建省分离的这8株病毒受体结合位点相对保守,仅第193和227位点有变异,具有典型的禽源受体结合特性。本研究丰富了我国福建省禽流感病毒的分子流行病学信息,为福建省禽流感的预警及科学防控提供了依据。     

鹅细小病毒于番鸭成纤维细胞上的适应性研究

为进一步了解鹅细小病毒（GPV）在番鸭成纤维细胞（MDEF）上的适应性及病毒增殖情况,将GPV在MDEF上连续传12代培养,通过PCR、免疫荧光、流式细胞等方法分析其生物学特性。PCR检测结果显示,扩增到大小为734bp的非结构蛋白基因片段,将10倍梯度稀释的病毒悬液接种细胞培养65h后,10-6倍接种的细胞仍能检测到病毒核酸。免疫荧光检测显示,兔抗GPV阳性血清能对染毒的病灶产生特异性荧光染色。流式细胞试验结果进一步证实,GPV在MDEF上增殖速度比较慢,病毒的感染会造成MDEF的早期凋亡。说明该GPV株感染MDEF后虽未产生细胞病变,但病毒能在MDEF中增殖,为GPV开展细胞依赖性相关研究奠定基础。     

胰腺炎型鸭1型甲肝病毒结构蛋白VP1基因的克隆和表达

通过RT-PCR方法扩增出MPZJ1206株胰腺炎型鸭1型甲肝病毒结构蛋白VP1基因,将其与原核表达载体pGEX-6P-1连接获得重组表达质粒pGEX-VP1,进行条件优化诱导表达,将表达的重组蛋白经SDS-PAGE分析。结果表明,分子量约为52 kDa的重组目的蛋白得到表达。该研究为开发胰腺炎型鸭1型甲肝病毒诊断方法和研究VP1蛋白功能奠定基础。     

鸭1型甲肝病毒亚型VP3基因的克隆与原核表达

参照鸭1型甲肝病毒亚型(DHAV-1a)的基因组序列设计了1对VP3基因特异性扩增引物,通过RT-PCR方法扩增获得了DHAV-1a结构蛋白VP3基因,将纯化的VP3基因与pEASYTM-Blunt Zero Cloning Vector连接,构建DHAV-1aVP3基因克隆重组质粒,然后将VP3基因片段插入pET-32a(+)表达载体,转化E.coli BL21(DE3)感受态细胞。以1.0mmol·L-1 IPTG于37℃诱导表达,经SDS-PAGE和Western blot分析表明VP3基因于大肠杆菌中成功表达,其分子量为47kDa,且表达的VP3蛋白能够与Anti-His Mouse mAb发生特异性反应,具有良好的生物活性,为进一步研究DHAV-1aVP3蛋白功能和以VP3蛋白为抗原研制DHAV-1a诊断试剂盒奠定基础。