颗粒胶等电聚焦电泳

蛋白质分离纯化的方法很多,如离心、色谱、电泳等等。但是要想得到纯度较高的某种蛋白质,往往需要经过很多繁琐复杂的过程,在这“几经周折”的过程中,会因种种因素而影响到纯品的获得量。近几年来,蛋白质纯化的新趋势是使用制备型等电聚焦电泳技术。此技术的最大优点是它的浓缩能力和“一步”达到高度纯化。所以。比较省时     

鹌鹑的行为

鹌鹑属于鹑鸟目,雉科,是一种两性异态禽类。雄鹑的胸部呈深的黄橙色,颊部通常有黑色素沉着,雌鹑无此现象。雌鹑的体型通常要大些,胸部的色泽较明亮,散缀着小黑点。家鹑由野(生鹌)鹑驯养而来。现存的野鹑仍然过着迁徒的候鸟生活,分布范围很广:大西洋群岛,中国的西北部、日本的北部、朝鲜、巴基斯坦北部、印度西北部、西伯利亚东部、蒙古、北非部分地区、中东以及非洲东部和南部与马达加斯加岛。巢区范围北部可延伸到北纬65度处,向南直到好望角。     

鹌鹑的行为(续)

5.攻击行为及其调控鹌鹑的好斗行为主要包括啄,抓头颈部,特别是眼睛周围。在亚洲某些地区,如日本雄鹑被用作“斗鹑”,因而有机会更充分认识鹌鹑的攻击行为。据Kuo(1960)描述,营养和激素因子仅对激发战斗习性起次要的影响。一旦养成战斗习性,当两只经训练的“斗士”对峙时,食物或配偶等强有力的刺激作用都不能阻止这场较量。一系列环境因素均能影响攻击能力,如早期隔离、物理和群居的环境等。鹌鹑所处环境条件的剧烈改变可使先前形成的战斗习性发生暂时的或永久性的巨大变化。     

蛋白质的分离纯化

蛋白质的分离纯化是一件细致的工作、有时制备一个纯度较高的蛋白质要付出艰巨而长期的努力.制备工作涉及物理学、化学和生物学等较广的知识,在这个繁杂的过程中需要许多复杂的技术操作.到目前为止,还没有一个单独的或一套现成的方法能够把任何一种蛋白质从复杂的混合蛋白质中提取出来,但是对于任何一种蛋白质都有可能选择一套适当的分离程序以获得高纯度的制品.所以,提纯某种蛋白质时,各种方法都要尝试.实验前要进行充分的调查研究,对自己欲分离提纯的蛋白质有一定的了解,同时要建立相应的分析鉴定方法,以指导分离纯化工作的顺利进行.1 蛋白质分离纯化的常用方法     

SDS—PAGE的蛋白质染色方法

在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)中,常用考马斯亮蓝或硝酸银给凝胶中的蛋白质条带染色,这两种方法是当前电泳染色中的主要方法,应用广泛.最近几年,又出现了新的染色方法—曙红Y染色法和尼罗红染色法.四种染色法各有特点.现把四种染色法介绍如下,以供同行们染色时参考与选择.1 考马斯亮蓝染色法考马斯亮蓝染色法是SDS-PAGE中蛋白质带染色的常规方法.该法重复性好,但灵敏度不高,检出下限约为0.1μg的蛋白质,样品中每种蛋白质的浓度应为20～30ng/μl.考马斯亮蓝染色法的染色强度依赖于蛋白质的特性.碱性蛋白质、低分子量蛋白质在醇、酸固定时容易从凝胶中洗脱下来.用此染色法不能使糖蛋白染色.