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将质粒pWR306中包含ED35s启动子、Omega元件及TNOS终止子的一段核苷酸序列定向克隆到质粒pCAMBIA1300,构建了植物中间表达载体pWR-II;将重组质粒pGEM-T-ALDH的醛脱氢酶(ALDH)基因片段定向克隆到pWR-II,构建了葡萄ALDH基因的植物过量表达载体pWR-II-ALDH。采用改进冻融法将其导入农杆菌EHA105,采用花序浸蘸法转化拟南芥,获得了潮霉素抗性的转化拟南芥植株。PCR检测证明外源基因已整合进拟南芥基因组,Real-timePCR结果表明ALDH基因在转化植株的表达量远高于野生种。转化植株和野生植株在形态上有一定的差异,说明葡萄ALDH基因在拟南芥中表达对其生长发育有一定影响。 相似文献
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2009年11月至2011年10月期间每月对深圳湾红树林保护区6个采样点进行土壤样本采集,并对土壤的理化性质和营养元素含量进行测定,结果发现:土壤含水量高,存在一定的季节性变化;土壤pH值在6.5~7.5之间;土壤电导率高,含盐丰富;土壤粉粒含量所占比例最大;有机质含量极其丰富,各样点差异较大;各采样点速效氮含量在100 mg/kg左右;有效磷含量在30 mg/kg左右;速效钾含量在750 mg/kg左右,比农田土壤丰富得多;说明流经市区的两条河流将丰富的营养物质带入深圳湾.在2011年年初,监测到的各项营养元素的含量骤然降低,与深圳筹备26届世界大学生运动会期间环境治理密切相关,而在2011年年底各项指标出现反弹. 相似文献
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2004年5月17日深夜,武汉市22岁的男青年赵四美与同伴黄某等4人宵夜后,由赵驾驶一辆别克赛欧轿车乘载这一行人,次日凌晨2时许,车行至武汉市蔡甸区永安街附近时,车辆突然失控撞到路边树木后,翻入旁边一水塘内,坐在车内的黄某等4人当场溺水身亡,仅赵逃生捡回一命。后经交管部门鉴定,赵四美系酒后且疲劳驾驶,应负事故全责。今年元旦前夕,肇事司机赵四美被法院一审以交通肇事罪判刑6年,并与车主其父一并赔偿4名死者家属45万余元。 相似文献
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依据中国野生葡萄(Vitis pseudoreticulata)抗黑痘病(Sphaceloma ampelinum)基因RAPD标记OPS03-1354的全长序列,设计合成了两个寡聚核苷酸R1(5'-CAGAGGTCCCTAGCTAAT-3')和R2(5'-ACA ATCACCCAACTCCTC-3')作为引物.首先对获得该RAPD标记的种间杂交组合白河-35-1(V.pseudoret-iculata clone Baihe-35-1)×佳利酿(V.vinifera cv.Carignane)亲本及其F2 51株进行PCR分析,其中寡聚核苷酸R2能在抗黑痘病植株中扩增出约1100 bp的DNA片段.进一步用R2对另一种间杂交组合广西-1(V.pseudoreticulata clone Guangxi-1)×京可晶(V.vinifera cv.Jingkejing)F1 339株进行PCR检测,R2能在抗病植株中扩增出约1100 bp的DNA片段.最后用R2对48份葡萄资源包括中国野生葡萄、美国野生葡萄和欧洲葡萄进行了PCR检测,在抗病株系和品种中也能扩增出这一片段.结果表明,获得的约1100bp特异片段为葡萄抗黑痘病基因的序列特异性扩增区(SCAR)标记,凡扩增出该SCAR标记的植株即是抗黑痘病基因的携带者和抗黑痘病性状的表达者.将该SCAR标记克隆与测序,其实际长度为1110 bp,命名为SCS03-1110.获得该SCAR标记的18 bp寡聚核苷酸R2(5'-ACAATCACCCAACTCCTC-3')具有检测葡萄抗黑痘病基因的DNA探针作用. 相似文献
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以抗白粉病华东葡萄(Vitis pseudoreticulata W.T.Wang)株系白河-35-1为材料,在经葡萄白粉病病原菌(Uncinula necator(Schw.)Burr.)诱导后获得的EST序列的基础上,本研究通过RACE技术克隆了一个具有转录域的转录因子全长1324bpcDNA序列,其阅读框为1053bp,编码350个氨基酸,命名为VpRFL1(GenBank登录号:FJ356672)。应用PCR技术,进一步获得了转录因子VpRFL1基因的DNA序列,其序列全长1599bp,VpRFL1基因包含3个外显子,2个内含子。生物信息学分析表明,华东葡萄白河-35-1VpRFL1基因编码的氨基酸序列在N端含有核定位信号,C端含有C4C4型RING锌指结构域。VpRFL1/PBI221-GFP在洋葱(Alliumcepa)表皮细胞中的瞬时表达分析表明,该转录因子主要定位于细胞核内。VpRFL1的序列特征与定位分析结果初步表明该转录因子基因在核内起作用,并可能参与了抗逆反应的相关途径。 相似文献
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