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【目的】制备斑马鱼zgc113227多克隆抗体和卵形鲳鲹EVM0008813多肽抗体,为后续深入研究斑马鱼zgc113227基因和卵形鲳鲹EVM0008813基因的功能特性提供重要工具。【方法】以卵形鲳鲹EVM0008813基因为查询序列,通过BLASTp搜索获得斑马鱼同源基因zgc113227(NP_001014341),以同源重组方式构建原核表达载体并转化大肠杆菌B21感受态细胞进行诱导表达,再以诱导表达获得的融合蛋白为抗原免疫日本大耳兔制备多克隆抗体,采用间接ELISA检测抗体效价,然后通过Western blotting鉴定及SDS-PAGE检测zgc113227多克隆抗体特异性,并以高效液相色谱—质谱联用(HPLC-MS)纯化鉴定EVM0008813多肽抗体。【结果】斑马鱼zgc113227和卵形鲳鲹EVM0008813均属于亲水性蛋白,二者的氨基酸序列相似性达58.12%,同时表现为潜在抗原位点多、柔性较强、表面可及性高,且无跨膜结构和信号肽存在。斑马鱼zgc113227和卵形鲳鲹EVM000881的保守结构域均包含5个保守基序(Motif 1~Motif 5),且发现1个... 相似文献
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为研究β‐胡萝卜素对妊娠后期母猪繁殖性能、免疫功能和抗氧化能力的影响,选取繁殖条件基本一致的长大母猪48头,随机分成4 组,对照组饲喂基础日粮,试验组分别添加微囊化β‐胡萝卜素40、100、160 mg·kg-1 ,试验期从妊娠80 d 至分娩,在妊娠第95天和110天每组随机选取5头猪采血,测定血清免疫球蛋白含量和抗氧化能力,分娩后采集初乳,测定IgG 水平.结果表明:添加40、100、160 mg·kg-1β-胡萝卜素显著提高仔猪初生质量、母猪初乳中IgG 含量以及妊娠第110 天血清总抗氧化能力( P<0.05) .与对照组相比,添加160 mg·kg-1β-胡萝卜素组初生仔猪窝质量以及妊娠第95天和110天血清IgG、IgM 和IgA 水平显著提高,而血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)和超氧化歧化酶(SOD)活性显著降低( P<0.05) .综上所述,妊娠后期母猪日粮中添加适宜剂量β-胡萝卜素微囊能显著提高仔猪的初生质量,增强妊娠母猪的免疫功能和总抗氧化能力,其中添加量以160 mg·kg-1较为适宜. 相似文献
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本试验旨在研究β-胡萝卜素微囊制剂的生产工艺和β-胡萝卜素对怀孕后期母猪类固醇激素水平的影响。微囊制备试验采用喷雾干燥法,研究其最佳生产工艺参数,并测定产品的稳定性和溶出度;饲养试验选用繁殖性能基本一致的长×大母猪48头,随机分成4组,对照组饲喂基础日粮,试验I、II、III组在此基础上分别添加含β-胡萝卜素40、100、160 mg/kg 3个水平的微囊制剂。结果表明:当喷雾干燥工艺参数为进风温度200℃,固形物浓度25%时β-胡萝卜素微囊产率最高;在光照条件下β-胡萝卜素微囊较未经处理的原粉稳定性显著提高(P<0.05),在培养箱中持续光照4 d,保留率仍有75.39%。β-胡萝卜素微囊在人工模拟胃液和肠液中的溶出度分别为89.23%和95.69%;在妊娠110 d时,160 mg/kgβ-胡萝卜素组母猪血清中雌二醇和孕酮含量均显著高于对照组和其他试验组(P<0.05)。综上所述,微囊化能够提高β-胡萝卜素的稳定性,在怀孕母猪日粮中添加160 mg/kgβ-胡萝卜素有利于提高母猪类固醇激素水平。 相似文献
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