猴头菌素分离纯化、结构鉴定及体外活性研究

为探究猴头菌功效成分的结构构成及其生物活性,对猴头菌发酵菌丝体中猴头菌素进行分离纯化和结构鉴定,并对其抑菌活性、抗肿瘤活性及刺激神经细胞分泌生长因子能力进行分析。采用乙醇回流提取,并依次通过石油醚、乙酸乙酯萃取得到粗萜物质,粗萜物质经硅胶柱层析和半制备高效液相色谱分离纯化得到组分Fr-3-1,红外光谱及质谱分析表明其为猴头菌素A类似物。采用滤纸片法测定Fr-3-1抑菌活性,MTT法测定其体外抗肿瘤活性,酶联免疫吸附法测定其刺激神经细胞分泌生长因子能力。结果表明,Fr-3-1对金黄色葡萄球菌具有良好的抑菌活性,对人胃癌细胞MGB-523有一定的抑制效果,其最小抑菌浓度(MIC)值分别为0.781 mg·mL~(-1)和453.14μg·mL~(-1)。当浓度为100μg·mL~(-1)时,Fr-3-1促进大鼠星型神经细胞的分泌神经因子浓度为46.63 pg·mL~(-1),显著高于同浓度的肾上腺素。本研究结果为猴头菌作为治疗老年痴呆症和神经衰弱等症状的备选药物及保健食品的开发利用提供了理论依据。     

柠檬酸渣生物转化为酸性蛋白酶饲料的研究

以柠檬酸渣为主要原料进行固态发酵生产酸性蛋白酶的试验,研究了不同培养基成分及培养条件对产酶的影响,并进行了曲盘扩大试验和酶学性质探索。结果表明,曲盘扩大培养中,适宜的发酵培养基为：柠檬酸渣６５％、麸皮２４２５％、豆饼粉１０％、尿素０２５％、ＫＨ２ＰＯ４０５％;在３０℃时,培养时间为４８ｈ,酸性蛋白酶酶活力可达到４０００ｕ／ｇ。     

L-精氨酸抑制非对称性二甲基精氨酸对内皮祖细胞的增殖作用

目的研究非对称性二甲基精氨酸对人脐带血内皮祖细胞增殖的影响及观测L-精氨酸对非对称性二甲基精氨酸的抑制作用。方法从脐带血中分离出单个核细胞,体外培养7天,在贴壁细胞中加入不同浓度的非对称性二甲基精氨酸(1、5和10μmol/L)作用不同时间(24、48和72h),用MTT比色法和细胞克隆计数法评价非对称性二甲基精氨酸对内皮祖细胞增殖的影响;加入L-精氨酸后采用MTT比色法和高倍荧光显微镜下DiI标记的乙酰化低密度脂蛋白染色细胞计数法分析L-精氨酸对非对称性二甲基精氨酸作用内皮祖细胞的影响;硝酸还原酶法测定培养基上清液一氧化氮含量,采用化学比色法测定培养基上清液总一氧化氮合酶活力。结果非对称性二甲基精氨酸呈量效和时效性地减少内皮祖细胞数目和增殖能力;随着L-精氨酸浓度的增加,L-精氨酸能有效抑制非对称性二甲基精氨酸对内皮祖细胞的作用。结论非对称性二甲基精氨酸可能通过抑制内皮祖细胞的增殖促进内皮功能不全的发展,而外源性L-精氨酸能抑制非对称性二甲基精氨酸的作用。     

杜仲叶绿原酸的微波提取及高速逆流色谱分离纯化

以杜仲叶为原料,正交试验优化了微波辅助提取绿原酸的工艺条件。应用高速逆流色谱（HSCCC）分离制备高纯度杜仲叶绿原酸,通过质谱技术与核磁共振技术进行结构鉴定。结果表明,杜仲叶最佳提取工艺条件为微波辅助50%的丙酮水溶液浸提,料液比1∶30,提取时间25min,提取功率400W,绿原酸的提取率达2.28%;高速逆流色谱法...     

基于rDNA-ITS序列建立LAMP检测水稻潜根线虫的方法

水稻潜根线虫(Hirschmanniella oryzae)在水稻产区普遍存在,是水稻(Oryza spp.)的主要植物寄生线虫,在世界范围内造成产量损失.本研究通过比较GenBank数据库中潜根属线虫相关序列,以水稻潜根线虫ITS-rDNA序列为靶标,设计了水稻潜根线虫LAMP的一组特异性引物,包括一对外引物(F3:...     

我国蜂产品质量安全问题分析

中国蜂产品现阶段存在一些发展以及质量安全方面的问题.本文对其中的一些主要问题做了一个综合性地概述,并提出相关的解决方案.蜂产品的质量问题是影响中国蜂产品发展的关键,只有加大研发力度,从源头解决质量问题,才能使蜂产品得到更进一步的发展.     

氧化型低密度脂蛋白对人脐静脉内皮祖细胞增殖、凋亡及bcl-2表达的影响

目的探讨氧化型低密度脂蛋白对人脐静脉内皮祖细胞增殖、凋亡及bcl-2表达的影响。方法密度梯度离心法获取人脐静脉血单个核细胞,培养7天后,收集贴壁细胞并加入不同浓度氧化型低密度脂蛋白(分别为5、10及20mg/L)干预48h。MTT法检测氧化型低密度脂蛋白对内皮祖细胞增殖能力的影响,流式细胞仪检测氧化型低密度脂蛋白对细胞凋亡率的影响,逆转录聚台酶链反应检测bcl-2mRNA的表达,免疫细胞化学法检测bcl-2蛋白的表达。结果氧化型低密度脂蛋白呈浓度依赖性抑制内皮祖细胞增殖,诱导内皮祖细胞凋亡(P<0.01);基础状态下内皮祖细胞表达bcl-2mRNA及蛋白,氧化型低密度脂蛋白处理能抑制其表达,并存在量效关系(P<0.05)。结论氧化型低密度脂蛋白通过下调bcl-2的表达诱导内皮祖细胞凋亡、抑制内皮祖细胞增殖,这可能影响血管内皮的修复及新生血管的形成。     

中环属(Nematoda:Criconemoidea)两个广东新纪录种记述

【目的】对在广东省农作物上发现的中环属(Mesocriconema Andrásy, 1965)种类进行鉴定。【方法】利用传统形态分类学进行形态测计和描述。【结果】鉴定为奥诺中环线虫(M. onoense Luc, 1959)和华丽中环线虫[M. ornatum (Risk, 1958) Loof&De Grisse, 1989]。奥诺中环线虫的鉴别特征为体环纹111～122个，侧区无背腹环纹愈合处；头环纹3个，第1环非常窄，向前倾，亚中唇瓣较小，口针长47.2μm (43.2～53.9μm)；阴门口开放，阴道直，受精囊椭圆形，有精子，卵母细胞双行排列；肛门距离阴门约1个体环，阴门到尾端7～10个体环；阴门后虫体圆锥形，末端圆形，多瓣状。华丽中环线虫的鉴别特征为体环纹83～91个，侧区偶见背腹环纹愈合处；头环纹2个，第1环略向内凹，亚中唇瓣大且向前伸出，口针长53.7μm (50.3～57.9μm)；阴门口闭合或略开放，阴门前壁形成齿形突起，阴道直，受精囊未见精子，卵母细胞单行或双行排列；肛门距离阴门约0～2个体环，阴门到尾端6～8个体环；阴门后虫体圆锥形，末端圆形，多瓣状。【...