运用纳米磁珠技术结合RT-PCR方法检测李痘病毒

以李痘病毒为对象,研究探索采用RT-PCR方法结合纳米磁珠技术来提高植物病毒的检出率.结果表明该技术不仅能够检测到极低浓度的病毒,而且操作简单快速,非常适合口岸一线对病毒的检测要求.     

我国口岸从进口货物中截获痔皮蠹

2007年7月16日,中山检验检疫局小榄办事处从日本进口的废塑料中截获活体皮蠹害虫,经中山局技术中心植检实验室鉴定和中国检验检疫科学院张生芳研究员复核认为痔皮蠹Dermestes haemorrhoidalis Kuster。     

菜豆荚斑驳病毒外壳蛋白大小亚基的原核表达及其抗血清制备

本研究对菜豆荚斑驳病毒大、小亚基编码的基因密码子进行了优化并人工合成了这两个基因,然后克隆到原核表达载体p ET-22b(+)中,通过转化大肠杆菌BL21(DE3)菌种并在IPTG的诱导下进行了成功表达,大亚基表达产物分子量为41 k D、小亚基表达产物分子量为22 k D,并制备出了大小亚基基因表达产物的抗血清。测试结果表明,优化后的CP的大、小亚基基因在37℃、1.0 mmol/L IPTG诱导下,3 h后得到了成功的表达,制备的两种抗血清特异性强、效价都达到1∶3.2×10~4,可以对BPMV CP 3个不同的区域同时进行检测,提高了检测的准确度。     

中山口岸截获眉斑并脊天牛

2008年,中山口岸小榄办事处从一批来自印度尼西亚装有蓝湿牛皮的集装箱中截获一头色彩艳丽的天牛,经植检实验室鉴定为眉斑并脊天牛Glenea cantor (Fabricius).     

热处理对昆虫生理生化的影响及其在进境水果检疫处理中的研究和应用

随着水果贸易的发展,越来越多的有害性生物也被夹带入境.热处理作为一种有效的除害方式,已经在口岸检疫中沿用多年.热处理主要对昆虫的代谢系统、呼吸系统、神经系统以及内分泌系统产生干扰和影响.目前应用的热处理方法主要包括蒸汽热处理,热水处理和干热处理3种,研究表明前两者的杀虫和保鲜效果较好于后者.近年来对最佳的热处理温度和热处理时间也开展了相应的研究,以获得杀灭害虫和保持产品品质之间的最大平衡.     

李痘病毒CP基因在大肠杆菌中的表达、纯化及其抗血清制备

用RT-PCR的方法克隆李痘病毒的外壳蛋白(CP)基因,然后将其连接到原核表达载体pET29(a)上,得到pET29a-PPV重组载体,将该载体转化大肠杆菌BL21(DE3)后,IPTG诱导表达产物经过SDS-PAGE分析,结果表明PPV CP基因在大肠杆菌中得到了高效表达.分别用亲和柱法和切胶法回收特异性表达蛋白,再免疫家兔,获得PPV特异性抗血清,经过酶联免疫吸附法测定其效价分别为3.2×104和4×103,且具有较高的特异性.     

栎红天牛

近来，栎红天牛随木包装多次由欧洲输入我国，吉林和大连等检验检疫局均有截获报道。笔者就该虫的部分资料进行了收集，简单总结如下。     

非放射性核酸探针的特点及其应用

在动植物病害检疫中,为了准确而迅速地诊断出病原物,可以采用核酸探针进行分子杂交的方法来检测动植物病原物的特殊核酸序列,但是,探针的制备通常采用放射性元素标记,如~(32)P、~(35)S等,由于放射性元素本身对人的危害性、不稳定性及难以管理等特点,都限制了放射性探针的广泛应用,囚此,用非放射性物质标记制作探针的技术应运而生,这种非放射性物质可以是半抗原,也可以是蛋白质,但最常用的是生物素(Biotin),即维生素H。     

青霉素酶（Penicillinase—PNC）在酶联免疫吸附试验（ELISA）中的应用

酶联免疫吸附试验（ELISA）是重要的血清学检测方法。主要是依靠两种酶：一是辣根过氧化物酶HRP（horseradishperoxidase），二是碱性磷酸酶ALP（alkalinepholphtase）。HRP与抗体结合稳定，价格便宜，但其反应物中的邻苯二氨对人体有毒，还易产生非特异性反应．ALP灵敏度和稳定性比HRP高，且可加入NaN3作为防腐剂，但该酶及其底物硝基苯磷酯价格昂贵，因此，这两种都有一定的局限性。而青霉素酶PNC克服了上述两种酶的不足，主要特点为:1．PNC价格便宜，约为ALP的十分之一，2PNC适应性广，可运用于对不同动物、植物病毒的检测…     

商陆抗病毒蛋白基因导入玉米幼胚愈伤组织研究初报

以87-1自交系,87-1×综3,郑22×87-1,郑22×HI(A×B)4个基因型的玉米幼胚愈伤组织为受体,利用基因枪介导法将商陆抗病毒蛋白(PAP)基因和抗卡那霉素筛选基因以共转化的方式导入玉米胚性愈伤组织,然后在含有25～40 mg@L-1G 418培养基上筛选愈伤组织并分化得到再生植株.PCR和Southern杂交结果表明,PAP基因已经转入由抗性愈伤组织再生出的玉米植株中.