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1.
利用重组酶聚合酶扩增技术(RPA),以猪圆环病毒2型Cap基因的保守序列为靶序列设计并筛选出一组特异性的引物和探针,建立了快速检测猪圆环病毒2型核酸的RPA方法。试验结果表明,该方法特异性强,猪圆环病毒1型(PCV1)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪细小病病毒(PPV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)核酸检测结果均为阴性,灵敏性高,最低可检出核酸浓度为0. 87×10-4ng/μL,简单快速,且重复性好。利用所建立的RPA方法对183份临床样品进行检测,结果与实时荧光PCR方法符合率为98. 9%。本研究为猪圆环病毒2型核酸的快速检测提供了一种新方法,尤其适合基层实验室或养猪场的快速检测。 相似文献
2.
为了制备一种新型基因工程疫苗BTV-16 VLP疫苗,将蓝舌病病毒16型VP3与VP7基因片段插入杆状病毒双表达载体pFastBac Dual质粒中,通过转染Sf9细胞,同时表达VP3与VP7蛋白。经负染后电镜观察到有与蓝舌病病毒形态相似的核心样颗粒,表明蓝舌病VP3与VP7蛋白能自主组装形成核心样颗粒,并通过Western Blot试验验证该核心样颗粒与蓝舌病病毒具有相同的抗原性。因此本研究成功构建出16型蓝舌病病毒核心样颗粒,为病毒样颗粒装配打下了基础,为制备16血清型BTV VLP疫苗做好前期准备。 相似文献
3.
4.
克隆内蒙古白绒山羊胸腺素β4基因并稳定转染胎儿成纤维细胞 #br# 总被引:1,自引:1,他引:1
【目的】克隆内蒙古白绒山羊胸腺素β4(thymosin beta 4,Tβ4) 基因,构建皮肤特异性表达载体,转染内蒙古白绒山羊胎儿成纤维细胞,筛选出稳定表达红色荧光蛋白并可用于核移植的转基因细胞克隆。【方法】通过RT-PCR克隆Tβ4基因cDNA序列,然后与KAP6-1基因启动子片段以及红色荧光蛋白表达元件连接构成Tβ皮肤特异性表达载体pCDsRed-KT。外源表达载体以lipofectamineTM 2 000介导转染胎儿成纤维细胞,通过G418筛选获得稳定转染的细胞克隆。PCR鉴定外源基因在细胞基因组中的整合。【结果】 克隆了内蒙古白绒山羊Tβ4基因,cDNA全长142 bp,其中包含135 bp的完整ORF,编码44个氨基酸残基,氨基酸序列与已报道的牛胸腺素β4(XM002706880.1)同源性为100%。测序显示构建的表达载体pCDsRed-KT中,Tβ4基因正确连接在皮肤特异性启动子KAP6-1下游,顺序连接CMV启动子和红色荧光蛋白基因,载体构建正确。PCR检测显示外源KAP6-1启动子和Tβ4基因整合到细胞基因组中,筛选出的转基因细胞高效表达红色荧光蛋白。【结论】克隆得到内蒙古白绒山羊Tβ4基因并构建成功其真核表达载体,可稳定转染绒山羊胎儿成纤维细胞,为下一步通过核移植方法获得转胸腺素β4基因绒山羊提供了条件。 相似文献
5.
抗热应激饲料添加剂对猪生长性能的影响及作用机理研究 总被引:1,自引:0,他引:1
将112头育肥猪随机地分为7组,在1~6组的日粮中分别添加以下抗热应激添加剂:γ-氨基丁酸0.004%、γ-氨基丁酸0.008%、γ-氨基丁酸0.004%+巴氯芬0.001%、巴氯芬0.001%、γ-氨基丁酸0.004%+巴氯芬0.001%+维生素C(Vc)0.01%、微生态制剂0.05%,第7组为对照组。结果表明:第3、5、6组的日增重分别比对照组提高了15%、18%、18%(P0.05)。无论哪一种添加剂,都可提高猪的采食量,但根据料肉比的结果,以第5组的效果最好。与对照组相比,各处理组皆可使猪消化道内的大肠杆菌和乳酸菌的数量有不同程度的降低(P0.05),而使饲料中蛋白质、钙和磷等营养物质的消化率有不同程度的升高(P0.05)。血清学分析结果表明:与对照组相比,第3组的碱性磷酸酶活力明显升高(P0.05),第4组的球蛋白含量和第6组的葡萄糖含量明显地低于对照组(P0.05),其它血清学指标无明显差异。综上所述,最佳的抗热应激和促生长饲料添加剂为γ-氨基丁酸+巴氯芬+Vc组合。 相似文献
6.
以烟草为分析对象,研究离子阱质谱在植物样品分析中的应用。结果表明,GC/MS/MS通过选择特定的先驱离子,具有很高的特异性,基本排除了样品中其它物质的干扰。6种烟草生物碱相对标准偏差为0.45%~4.52%;最低检出限达到0.33μg/g。 相似文献
7.
8.
膨化与加酶玉米对断奶仔猪生长性能和肠黏膜形态的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
通过2个饲养试验,研究了膨化及加酶处理玉米对断奶仔猪的生长性能和肠黏膜形态的影响。试验一分别用普通玉米、膨化玉米、普通玉米加酶及膨化玉米加酶为主要能量原料的饲料饲喂仔猪做4种处理,每个处理6个重复,定时记录体质量和耗料量.计算日增重、日采食量和料肉比。结果表明,膨化和加酶玉米均可提高日增重,降低料肉比。试验二分别用普通玉米、膨化玉米、普通玉米加酶及膨化玉米加酶为主要能量原料的饲料饲喂仔猪做4种处理,每个处理6个重复,分别在断奶后第14天和第28天各屠宰1头公猪。取十二指肠、空肠前、中、后段以及回肠做组织切片,观察其黏膜厚度、绒毛高度、隐窝深度和绒毛宽度。结果表明,断奶后14d,与普通玉米组相比,膨化玉米组和加酶玉米组都显著提高了十二指肠的绒毛高度,二者共同处理组使十二指肠的绒毛高度极显著提高;2种处理组都显著降低了空肠中段的隐窝深度;显著增加了十二指肠、空肠前段、后段和回肠的黏膜厚度。断奶后28d,2种处理组都显著增加了十二指肠的黏膜厚度。 相似文献
9.
高粱需钾特性及施钾效果研究 总被引:2,自引:0,他引:2
高梁施钾肥能明显提高植株含钾量。其含钾量以苗期为最高,钾肥对高粱有明显的增产效果,增产幅度8.5-10.6%。在等氮、磷基础上,等量钾肥以全部基增产效果最好(12.8%)。施钾能明显改善高粱的品种,降低单宁含量,四经不施钾的要含量降低28.8%。 相似文献
10.
一、放养优良品种近年来随着养殖规模的扩大,地区间引种增多,加之人工繁殖长期不更新亲本,近亲繁殖,导致养殖品种混杂,退化,性成熟提前,抗病能力下降,上市规格小。因此放养的品种要选用优质、纯正的苗种,要到正规有资质的育苗场购菌,要了解其亲本的来源、规格、繁育年龄等。优良品种生长速度快,上市规格大,抗病能力强。 相似文献