采收机不同振动强度采收对枸杞树光合系统参数的影响

分别于2008年的6月22日、7月11日、8月5日、10月12日（其中6～8月为夏果期,10月为秋果期）,按3个处理（采收机采收,T1、T2、仍振动强度依次增大）和对照（熟练工人工采摘）分别采收枸杞,研究枸杞采收机不同振动强度采收对枸杞树的光合系统参数的影响。结果表明：对照和各处理的净光合速率（砌）变化规律为7月中旬以前逐渐降低,7月中旬达到最低点,此后开始上升,至8月份达到一个新的高度,随后又开始下降,与枸杞树物候期分析结果一致。蒸腾速率（Tr）、气孔导度（Gs）的变化趋势与Pn一致。6～8月胞间CO,浓度（Ci）的变化趋势与Pn一致,但在10月明显升高。方差分析表明,各处理在各测定时期的Pn、Tr、Gs、Ci与对照相比差异不显著,说明采收机采收对枸杞树叶片的光合系统参数没有显著影响。光合系统参数的相关性分析表明,Pn和Cs、Tr具有较强的相关性,同时Gs和Pn、Tr也具有较强的相关性,说明光合速率和蒸腾速率的高低受气孔影响很大。在6～8月,Pn和Gi具有较强的正相关性,与气孔限制值Ls（Ls=1—Ci／Ca,Ca为空气中CO2浓度）有较强的负相关关系。夏果期（7月16日）光合速率的降低伴随着胞间CO2浓度的降低和气孔限制值的增大,光合速率的下降为气孔因素。秋果期（10月14日）光合速率降低,而胞间CO2浓度升高,表明光合速率降低为非气孔因素,是叶片的光合功能下降所致。     

伏马菌素FB1对枸杞叶片糖和脂质的影响

本研究以中华枸杞(Lycium chinese Mill.)和宁夏枸杞‘宁杞5号’(Lycium barbarum L.)为实验材料,通过外源施加根腐病菌串珠镰孢菌(Fumonisin moniliforme)分泌的毒素伏马菌素B1 (Fumonisin B1, FB1),对枸杞叶片进行糖代谢组和脂质代谢组检测分析。糖代谢组检测分析发现,‘宁杞5号’中激活更多的糖分子参与调控对FB1的响应,包括海藻糖、D-果糖、蔗糖以及D-半乳糖;而中华枸杞中只有L-岩藻糖和D-山梨醇两种糖分子受FB1诱导表达量上调。脂质代谢组检测分析发现,在中华枸杞与‘宁杞5号’中分别有67种和66种脂质分子参与调控枸杞对FB1的应答,这些脂质分子主要集中在脂肪酸、磷脂酸、甘油三酯、甘油二酯、磷脂酰乙醇胺等11个类别。此外,本研究发现,FB1诱导枸杞叶片中磷脂酸下调表达、甘油三酯上调表达,而且甘油二酯和磷脂酰乙醇胺的高积累量有助于提高枸杞对FB1的耐受力。本研究结果将有助于进一步研究枸杞响应根腐病菌的作用机制,为提高枸杞对根腐病菌的抵抗力提供理论依据,并为枸杞抗病育种提供科学依据。     

宁夏枸杞雄性不育基因ms2的克隆及表达分析

本研究以宁夏枸杞为材料,根据GenBank上已经登录的该基因的保守区设计简并引物,通过RTPCR扩增获得基因保守片段,利用RACE技术获得该基因3'端序列。最终,经拼接后得到一个长约1 802 bp的ms2基因片段(登录号为JQ341412.1),终止密码子为TAG,3'端包含非编码区和Poly A尾巴。相应编码基因片段527个氨基酸的肽段。生物信息学分析表明,ms2基因序列中含有NAD(P)H区域,该区域含有显著的TGXXGXXG结构单元,以及微体结合信号区域。从第44个氨基酸到第346个氨基酸为NAD结合区,从第459个氨基酸到第517个氨基酸为雄性不育C-末端区。同源性检索表明,ms2基因片段氨基酸序列与亚麻、葡萄、大豆、拟南芥和青菜的同源性分别为71%、71%、72%、65%和66%。系统进化树分析表明,宁夏枸杞ms2基因与葡萄的亲缘关系最近,与毛果杨、亚麻以及十字花科的植物聚为一类,而与江南卷柏的亲缘关系最远。RT-PCR分析表明,ms2基因在可育花蕾的2、3时期表达非常强,而在不育花蕾的2、3时期表达较弱。     

宁夏枸杞硬枝扦插育苗技术

宁夏枸杞(Lycium barbarum L.)是茄科枸杞属植物中重要的"药食同源"功能型特产资源.枸杞子既是名贵的中药材,又是保健食品,我国对枸杞的利用已2000多年,宁夏是我国和世界枸杞的原产地和主产区.近年来宁夏枸杞种植在国内发展十分迅速,已发展到新疆、内蒙古、河北、青海、陕西、甘肃等十多个省区.随着全国种植面积的不断扩大,宁夏枸杞种苗的需求量与日俱增,价格不断上涨.为了满足枸杞产业发展的需要,必须进行大量的种苗繁育,硬枝扦插育苗是十分高效而技术简便的育苗方法.     

枸杞胚乳离体培养技术体系的建立

以宁杞1号为试验材料,探讨枸杞胚乳离体培养中不同果期、不同激素组合、低温预处理、不同蔗糖浓度、接种密度、不同光照培养方式及胚因子对胚乳培养的影响.试验结果表明,最佳培养果期为色变期果;4℃下低温预处理3～4d可明显提高愈伤组织诱导率;激素组合1.0 mg/L2,4-D+0.5 mg/L KT诱导率最高,达63.3％,0.5 mg/L2,4-D+0.5 mg/L KT激素组合中诱导率较高,达58.3％,且愈伤组织质地较好;培养基中蔗糖适宜浓度为5％;接种密度在6～8块/瓶时,诱导率较高;光培养优于暗培养,胚存在可明显提高愈伤组织诱导率,在GA3代替胚的培养下,愈伤组织诱导率也较高.愈伤组织转入分化培养基(MS +0.2 mg/L6 - BA +0.01 mg/LNAA)中分化出绿色小芽,转入生根培养基(1/2MS +0.01 mg/L 6 - BA +0.1 mg/L NAA)中诱导生根.     

宁夏枸杞甜菜碱乙醛脱氢酶（LbBADH2）的克隆与序列分析

以宁夏枸杞为试验材料,利用同源克隆技术,设计简并引物,克隆得到一个新的甜菜碱醛脱氢酶基因.该基因全长cDNA为1 527个碱基,编码508个氨基酸,编码区两侧翼分别具有5＇UTR （47 bp）和3＇UTR（129 bp）.在推导的氨基酸序列中,含有醛脱氢酶所具有的高度保守的十肽（VrlElGGKSP）以及与酶功能有关的半胱氨酸残基（C）.进化分析表明,它与番茄甜菜碱醛脱氢酶亲缘关系最近,与其他藜科植物亲缘关系较远.该基因的获得有助于理解枸杞这一盐生植物耐盐机理,为培育新的耐盐枸杞奠定理论基础.     

枸杞花、枸杞叶保健饮料加工工艺研究

对枸杞花、枸杞叶保健饮料生产工艺流程、技术操作要点进行了研究,对该饮料的护色、防沉淀等问题等进行了讨论,提出了较为适合的枸杞花、枸杞叶保健饮料的加工工艺。     

人工诱导根瘤菌（ORS—571）与高粱结瘤共生固氮研究

以植物激素２，４－Ｄ（２，４－Ｄ二氯苯氧乙酸）（终浓度３ｍｇ／Ｌ），处理高粱（甜杂１号Ｓｏｒｇｈｕｍ ｖｕｌｇａｒｅ），并接种ＯＲＳ－５７１根瘤菌，诱导根瘤菌与高梁共生。结果表明，这种方法可以诱导高粱根系结瘤并与结瘤组织共生，表现固氮活性。高粱在移苗后５￣７天进行处理，效果较好，一般结瘤率都超过５０％，最高可达８０％。接种后４期周瘤的直径约２－３ｍｍ，制片显微镜观察，瘤组织内有大量的根据瘤菌菌体，     

外部因子条件对麻黄细胞悬浮培养的影响

用中麻黄种子萌发的子叶诱导出愈伤组织，并在不同的培养基、不同的激素及不同的pH值和不同的蔗糖浓度条件下培养，探讨麻黄离体细胞生长的适宜条件。实验证明以MS 2，4-Dlmg/L NAA2mg/L培养基较好，愈伤组织色泽正常，生长量高。悬浮培养pH值在3-9均能生长，但以pH7-8最适，其细胞增殖量增加8-9倍；其含糖量在30g/L较适宜。     

不同产地野生黑果枸杞资源果实多酚组成分析

【目的】黑果枸杞（Lycium ruthenicum Murr.）主要分布于中国西北地区。其果实在传统中药中被用来治疗心脏病、月经异常及停经等疾病。近年来,发现多酚特别是花色苷类物质是其主要的功效成分。测定并评价不同产地野生黑果枸杞果实中花色苷等多酚的组成情况,为黑果枸杞的品种选育及开发利用提供依据。【方法】采用分光光度计测定其总酚、总黄酮、总花色苷含量;采用HPLC-MS 方法分析鉴定黑果枸杞酚类物质组成及结构;并根据总多酚含量、总黄酮含量、总花色苷含量及多酚共有峰峰面积分别对26个不同产地黑果枸杞的多酚检测结果进行聚类分析。【结果】26个不同产地的黑果枸杞资源果实的总酚含量、总黄酮含量、总花色苷含量的变化幅度分别为8.25-87.77 mg GAE·g^-1、18.03-60.44 mg RE·g^-1、8.21-31.46 mg·g^-1。不同产地的材料间差异较大,其中青海格尔木乌图美仁、新疆甘河子、新疆巴仑台镇、宁夏贺兰12-01黑果枸杞总酚、总黄酮及总花色苷含量较高;通过HPLC-MS分析鉴定,19个多酚类化合物被鉴定出。其中7个为酰化类花色苷,主要花色苷为Petunidin-3-O-rutinoside (cis-p-coumaroyl)-5-O-glucoside。在所有供试黑果枸杞不同产地的材料中共检测到12种共有酚类化合物,其中Petunidin-3-O-rutinoside (cis-p-coumaroyl)-5-O-glucoside在所有供试黑果枸杞中的含量均最高,是黑果枸杞花色苷类多酚的主要成分。各产地样品HPLC特征图谱相似,有个别质量较差的情况存在;聚类参数不同,聚类结果略有差异。根据总酚含量、总黄酮含量、总花色苷含量聚类,聚为7类,甘肃民勤中渠、新疆喀什、宁夏贺兰12-1聚为第六类,新疆甘河子单独聚为第七类,该两类总酚、总黄酮及总花色苷含量均含量分别介于57.74-87.77 mg·g^-1、41.52-55.46 mg·g^-1和12.25-28.54 mg·g^-1。总酚、总黄酮及总花色苷含量都很高,特别是新疆甘河子产地,可作为以多酚和花色苷含量为指标的优质良种材料。根据共有峰面积共聚为5类,其中宁夏贺兰12-1、青海格尔木乌图美仁、新疆甘河子为一类,该类峰面积很高,其中主成分峰面积介于2 350.84-3 092.94。新疆巴轮台镇单独一类,其主成分峰面积高达为3 579.96。【结论】26个不同产地的黑果枸杞中多数富含多酚类物质,特别是酰化矮牵牛素花色苷含量丰富,是较好的开发富含花色苷类多酚的功能性食品资源。