桃沙红果实α-甘露糖苷酶基因(α-man)克隆及其在软化过程中的表达分析

α-甘露糖苷酶(α-man)是植物体内N聚糖加工的关键酶,在控制果实软化和延长货架期方面起重要作用.明确α-man在桃果实软化中的生理功能及其调控机制对进一步阐明桃果实的成熟软化机理具有重要意义.以商业成熟期桃(Prunus persica)沙红果实为材料,采用RT-PCR和RACE相结合的方法,克隆桃果实中α-man基因全长cDNA,并利用实时荧光PCR定量技术,检测了采后乙烯利和1-methylcyclo-propene(1-MCP)处理沙红果实软化过程中α-man基因的表达差异.结果表明:桃果实α-man基因的cDNA全长长3 491 bp,包含一个3 075 bp完整的开放阅读框,编码1 024个氨基酸(Genbank登录号:JX310861),N端含有NXT/S的糖基化位点,属糖基水解酶38家族.实时荧光PCR定量技术检测发现对照果实在贮藏第2天出现α-man的表达高峰;外源乙烯处理α-man基因表达高峰提前ld出现,且峰值显著高于对照果实;而1-MCP处理可使α-man基因的表达高峰延迟1d,且后期α-man基因的表达受到极显著抑制.据此推断桃果实α-man基因可能受乙烯生成和乙烯信号转导途径的调控,参与桃果实的软化过程.     

不同耐贮性桃果实膜脂过氧化相关酶活性变化

以较耐贮油桃品种"中油四号"和不耐贮油桃"燕红12"为试材,研究采后贮藏期间果实硬度、乙烯释放速率、膜脂过氧化及活性氧清除代谢相关酶活性的变化差异。结果表明,耐贮藏的"中油四号"桃果实在贮藏前期果实硬度保持稳定,LOX活性低且MDA含量较稳定,而不耐贮藏的"燕红12"在贮藏初期硬度便迅速下降;整个贮藏期间,不耐贮藏的"燕红12"果实的LOX活性和MDA含量明显高于"中油四号",而其果实内SOD和POD活性整体也高于"中油四号"。     

两种不同耐贮性桃果实采后乙烯合成和果实软化相关基因表达的差异

以商业成熟期的桃(Prunus persica)栽培品种秦王(极耐贮)和沙红(不耐贮)为试材,采用气相色谱测定乙烯释放量;利用实时荧光定量PCR(quantitative Real-time PCR,q RT-PCR)技术分析乙烯合成关键酶和果实软化相关基因在两个品种中的表达差异。研究结果表明,秦王果实在贮藏期间ACC合成酶基因(1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid synthase gene,Pp ACS1)相对表达量极低,乙烯释放速率也极低,一直保持较高的硬度;而沙红果实在贮藏过程中Pp ACS1的相对表达量随软化进程迅速增加,释放大量乙烯,果实硬度下降快。秦王果实中ACC氧化酶基因(1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid oxidase gene,Pp ACO1)虽有一定的表达量,但没有随贮藏时间而增加;而Pp ACO1在沙红桃中随果实的软化表达量呈显著上升的趋势。秦王果实中细胞壁降解酶果胶甲酯酶基因(pectin methylesterase gene,Pp PME)和多聚半乳糖醛酸酶基因(polygalacturonase gene,Pp PG)的表达量都极低;而在沙红果实中其表达量均呈持续增加趋势。此外,秦王果实中扩张蛋白基因(expansin gene,Pp EXP)的表达量也较低;而在沙红中表达量较高。N-聚糖加工酶α-甘露糖苷酶基因(α-mannosidase gene,Ppα-Man)和β-氨基己糖苷酶基因(β-hexosaminidase gene,Pp Hex1,Pp Hex2)在沙红和秦王贮藏期间均有较高表达量,且秦王中的表达量显著高于沙红(P<0.05)。这表明秦王果实采后不软化是由于Pp ACS1的转录受阻,不能产生乙烯,从而致使细胞壁水解酶Pp PME和Pp PG几乎不表达,果胶代谢受阻,因而果实一直保持较高硬度;而沙红果实在采后贮藏中释放大量乙烯,促进了Pp EXP、Pp PME和Pp PG的表达,引起细胞壁果胶的大量降解,导致果实迅速软化。而Ppα-Man、Pp Hex1和Pp Hex2可能不是秦王软化过程的关键基因。本研究为阐明桃果实成熟软化机理及其高效培育耐贮品种提供基础资料。     

中国小水电投融资分析

中国小水电无论从资源还是开发规模上看，在全世界都是排名第一的。介绍了中国小水电发展的历史，在不同历史阶段，小水电投融资模式和投资政策的变化。同时，还介绍了小水电总体发展规划，指出资金问题是小水电发展的重要制约因素之一。在分析目前小水电站行业的发展现状,投资主体、资金来源、融资模式和存在问题的基础上，借鉴国际经验，提出改善小水电投融资现状的政策建议和融资措施。     

耐贮性不同桃果实采后软化过程中α 甘露糖苷酶活性变化

以较耐贮藏桃品种“秦王”和不耐贮藏桃品种“白丽”为试材，研究采后贮藏期间果实硬度、乙烯释放速率及α 甘露糖苷酶（α man）活性的变化差异。结果表明，耐贮性较差的“白丽”果实在贮藏的第2天其乙烯释放和α man活性便出现小高峰，此后在贮藏第4天出现乙烯释放峰值，到贮藏第5天伴随着α man活性的迅速升高，果实硬度快速下降。耐贮藏的“秦王”果实乙烯释放和α man活性峰值均出现在贮藏后第5 天，然后下降，在贮藏末期又出现第2个峰值。此外，在整个贮藏期间，耐贮性较差的“白丽”果实α man活性明显高于“秦王”，在贮藏后期尤为显著。说明α man活性高低可能显著影响桃果实的耐贮性。