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1.
本研究旨在探明鸡恒定链(invariant chain,Ii)与内吞体转运蛋白Rab5a和Rab7b结合的结构域和在细胞内共定位的特征。首先,用PCR和基因突变技术将Ii胞浆区与跨膜区[Ii(Cyt-Tra)]、Ii CLIP (class Ⅱ-associated invariant chain peptide)-三聚体区[Ii(CLIP-TRIM)]和Ii突变体[Ii(M81-87aa)、Ii(M91-99aa)和Ii(M81-99aa)]分别插入pET-32a和pEGFP-C1构建相应的原核和真核重组质粒。其次,将构建的含有绿色荧光蛋白的重组质粒与实验室保存的含有红色荧光Rab5a和Rab7b的重组质粒共转染至人胚胎肾细胞系293 T,观察它们的共定位。将构建的原核重组质粒进行表达和纯化,最后用拉下法和免疫印迹检测Ii与Rab5a和Rab7b的结合域。结果表明,成功构建Ii结构域及Ii突变体的重组质粒。Ii(Cyt-Tra)及Ii突变体均能与Rab5a和Rab7b在细胞内共定位,而Ii(CLIP-TRIM)与空载体却不能。Ii的胞浆区和跨膜区是与Rab5a和Rab7b结合的功能结构域,而不是CLIP与三聚体区。综上所述,鸡Ii与Rab5a和Rab7b共定位和结合的区域是其胞浆区和跨膜区,而不是内质网腔区。这些结果提示Rab分子参与了Ii在胞内细胞器的转运机制,为进一步研究Ii及其载体在细胞内的转运机制和功能提供了新的途径。 相似文献
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猕猴桃芽,枝,叶发育期季节性变化 总被引:1,自引:0,他引:1
猕猴桃芽、枝、叶发育期季节性变化秦仲麒张俊(译)猕猴桃高产要求精细的修剪管理。冬季修剪需要选留一年生枝条,即“母枝”。当年生枝条即由母枝上抽生,猕猴桃花即着生于这些当年出新梢上。母枝通常从树冠较高的部位选留,因为这些枝在前一个生长季节光照良好。猕猴桃... 相似文献
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山东省临沂市河东区刘店子乡从2002年开始,连续三年与北京丰达种业有限公司、临沂师范学院合作,引进技术和人员进行了黄瓜高效杂交育种技术的研究和推广。2002年在该乡东石拉渊村示范种植3.3公顷,取得了非常高的效益,平均每公顷产量达到750千克,1/15公顷收入3000~5000元,产量高的可达6000元。2003年又在东石拉渊村,西石拉渊村,大梁家村等三个村种植8公顷,在克服雨水大、光照差等不利因素的情况下,仍取得了1/15公顷收入3000元的好效益。现将黄瓜高效杂交育种主要技术总结如下,供参考。 相似文献
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为了建立生鲜乳中17β-雌二醇的液相色谱-质谱/质谱检测方法,试验采用甲醇提取生鲜乳样品后,经固相萃取柱富集净化,采用液相色谱-质谱/质谱法测定,外标法定量。结果表明:17β-雌二醇在1~50 ng/mL浓度范围内线性关系良好,相关系数为0. 998 3,建立方法的检测限为0. 15μg/kg,定量限为0. 50μg/kg;在1~10 ng/mL加标浓度范围内,方法的回收率为76. 1%~99. 8%,相对标准偏差≤9. 7%。本试验建立方法的样品处理比较简单,使用等度洗脱,提高了方法的灵敏度,明显降低了检测限和定量限,提高了方法的准确度。本试验建立的方法适用于实验室检测牧场生鲜乳中17β-雌二醇残留。 相似文献