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鸡球虫病是由艾美耳球虫引起的一种危害严重的肠道寄生虫病,每年都会给世界各地的养禽业带来巨大的经济损失。目前,该病主要依靠抗球虫药物进行防治,但由于药物的长期及不合理使用导致鸡球虫几乎对所有使用过的抗球虫药均产生耐药性。为研究球虫耐药性产生的分子机制,本实验室前期对柔嫩艾美耳球虫地克珠利耐药株、马杜拉霉素耐药株以及敏感株进行了转录组测序并获得了敏感株与耐药株的差异表达基因,发现柔嫩艾美耳球虫含HD域蛋白(EtHDCP)在耐药株中上调表达。本研究以柔嫩艾美耳球虫敏感株孢子化卵囊cDNA第一链为模板,成功克隆出EtHDCP基因,构建了原核表达重组质粒pGEX-4T-EtHDCP,并成功诱导表达了重组蛋白rEtHDCP。利用qRT-PCR和Western blot对柔嫩艾美耳球虫敏感株不同发育阶段的转录和翻译水平进行分析,结果显示,EtHDCP在第二代裂殖子的转录和翻译水平高于其他三个阶段(未孢子化卵囊、孢子化卵囊和子孢子)。同时利用Western blot分析了EtHDCP在柔嫩艾美耳球虫敏感株、地克珠利耐药株、马杜拉霉素耐药株中的翻译水平,结果显示,EtHDCP在耐药株中的蛋白翻译水平显著高于敏感株。间接免疫荧光定位结果显示,该蛋白主要定位在子孢子和裂殖子的表面以及裂殖子的胞质内。入侵抑制试验表明,抗rEtHDCP多克隆抗体可有效抑制子孢子对宿主细胞的入侵。这些结果说明该蛋白可能参与了虫体在宿主细胞内的生长发育、耐药性的产生以及子孢子入侵宿主细胞的过程。 相似文献
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介绍酶联免疫分析法(ELISA)的原理及其在兽药残留检测中应用的技术要点,并对酶联免疫分析法在兽药残留检测中的应用前景作了展望。 相似文献
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为建立猪圆环病毒3型(PCV3)荧光定量PCR检测方法,本研究根据GenBank中PCV3基因序列设计特异性引物和探针,经过反应体系和条件优化,建立了特异性检测PCV3的TaqMan-MGB荧光定量PCR方法。该检测方法在4.78×10~1拷贝/μL~4.78×10~9拷贝/μL质粒标准品范围内均有良好的线性关系;该方法特异性试验结果显示,其与多种常见猪病病毒均无交叉反应,特异性良好;本研究建立的方法敏感性是常规PCR方法的100倍,敏感性较高;批内批间重复性试验变异系数均小于2.3%,重复性良好。对临床样品的检测结果显示,该方法对PCV3的检出率高于常规PCR方法,并且PCV3阳性样品多存在混合感染情况。该方法的建立为PCV3的实验室诊断及流行病学调查提供了快速、准确的检测手段。 相似文献
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采用食品安全指数法分析嘉兴市售水产品污染物残留的风险程度,为食品安全监管有针对性和预见性监管提供科学依据。汇总202—2022年嘉兴市售水产品国家食品安全监督抽检结果,采用食品安全指数-扇状模型评价法对监督抽检结果进行风险评估。结果表明,嘉兴市售水产品的食品安全指数为0.132 7,风险程度属于轻微水平。水产品中不同类别食品安全指数(R)分别为蟹类0.216 1、虾类0.1585、其他水产品0.155 9、鱼类0.132 9和贝类0.045 3;安全风险由大到小依次为蟹类、虾类、其他水产品、鱼类、贝类。水产品污染物残留的食品安全指数分别为恩诺沙星0.089 2、镉0.018 9、呋喃西林代谢物0.0180、地西泮0.007 9、甲氧苄啶0.004 0、呋喃唑酮代谢物0.003 8、磺胺类0.003 1、五氯酚酸钠0.002 5、氯霉素0.002 2、孔雀石绿0.001 4。风险危害程度由大到小依次为恩诺沙星、镉、呋喃西林代谢物、地西泮、甲氧苄啶、呋喃唑酮代谢物、磺胺类、五氯酚酸钠、氯霉素、孔雀石绿。嘉兴市售水产品的风险程度属于轻微水平,对于蟹类产品中的重金属镉的残留要重点关注,鱼虾等淡... 相似文献
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