番茄果实高质量总RNA的提取富集及RT-PCR检测

以番茄果实为材料,比较了3种在果实中提取RNA的方法,针对番茄果实多糖的特点,利用无水乙醇和异丙醇联合沉淀的方法除去多糖,改良了Trizol法.为了检验含量比较低的miRNA,利用Licl沉淀的方法进行富集.结果表明:改良Trizol法能够有效地去除多糖,提取到的RNA 28S rRNA亮度约为18S rRNA的2倍,A260与A280比值为1.84,A260与A230比值为1.92,RNA产率为350.4 μg/g,说明利用改良Trizol法从番茄果实中提取的RNA质量好、完整性好.由此法所得的RNA可直接用于cDNA文库构建等分子生物学实验.     

农机螺纹连接件的拆装技巧

在农业机械维修保养中,螺纹连接的拆卸与安装工作量巨大,大约占总工作量的60%。因此,掌握螺纹连接件的卸装技巧,对于提高维修作业的质量与效率具有积极的意义。螺纹连接是依靠螺纹之间的摩擦力起锁紧作用的,所以螺母与螺栓之间必须要有一定的预紧力。在高温条件下,螺纹材料会发     

拖拉机电器故障检查小窍门

拖拉机电器产生故障,其检查诊断的基本原则与机械故障一样,也是“先易后难,先简后繁,先外后里,先分析后动手。”以免盲目拆卸,费工费时,甚至因乱拆乱卸造成不应有的损坏。一些有经验的机手在生产实践中找到了一些检查电器故障的小窍门,具体介绍如下:1 先线路后电器一位机手发现自己驾驶的拖拉机喇叭不响,就更换了一个新喇叭,可故障依然存在。其实,对于这类电器故障,多为线路上出现问题,故应先从线路上检查。经过仔细检查,原来是导线的一处绝缘受损,造成电路搭铁短路,所以更换了新喇叭也不响。用绝缘胶带将绝缘破损处进行了包裹,并将导线予…     

番茄果实中一种快速验证microRNAs的方法

以番茄果实为材料,采用颈环引物的方法对番茄果实中的miRNA159和miRNA168进行反转录,并对得到的目的片段进行扩增,通过琼脂糖凝胶电泳观察得到相应大小的目的片段。对miRNA159所得大小正确的片段进行测序,验证所得片段为正确的目的片段。这种低成本的miRNA检测方法简单、实用,适用于生物信息预测及深度测序得到的低拷贝的新miRNA的快速验证。