蓝莓Vco-miR_n10的克隆及对干旱的响应分析

【目的】MicroRNA（miRNA）是一类内源单链非编码的小分子 RNA，在动植物中参与转录后基因 表达调控。Vco-miR_n10 是蓝莓中的新型 miRNA，目前尚未见该 miRNA 功能方面的报道。本研究对蓝莓 VcomiR_n10 进行了初步功能分析。【方法】基于前期蓝莓小 RNA 高通量测序结果，对鉴定到的蓝莓新型 miRNA （Vco-miR_n10）的前体序列（224 nt）进行克隆与测序，并利用 mfold 在线软件对其前体序列的二级结构进行 预测。采用 Gateway 系统构建了 35Spro:: pre-Vco-miR_n10 表达载体并转入野生型拟南芥中，对其正常生长及 300 mmol/L 甘露醇处理条件下的表型进行观察与分析。【结果】克隆获得了 Vco-miR_n10 的前体序列，该序列能够折 叠形成较完美的茎环结构且仅有 2 个错配碱基对。Vco-miR_n10 的成熟体序列位于 3'' 茎臂上。观察正常生长条 件下的转基因植株并无显著的表型变化。而在 300 mmol/L 甘露醇模拟的干旱条件下，Vco-miR_n10-24 与 VcomiR_n10-52 的发芽率（33.53%、37.69%）和绿苗率均显著低于野生型（发芽率 67.72%、绿苗率 66.33%）。【结 论】蓝莓 Vco-miR_n10 能够响应甘露醇模拟的干旱胁迫，并降低拟南芥对干旱的耐受能力，影响发芽率和绿苗率， 说明蓝莓 Vco-miR_n10 可能在植物响应干旱胁迫过程中发挥一定的调控功能。     

小锥度环形密封转子动特性

为求解小锥度下液体环形密封动特性系数和转子所受激振力的大小,建立了小锥度环形密封全三维模型,利用CFDFluent软件及其气穴模型计算得到了转子表面压力分布和气穴存在的位置.研究了进出口压差、ω/Ω和不同转速下小锥度环形密封转子表面压力变化规律,并得到了不同转速下气相分布情况.最后依据转子动力学模型和激振力方程,分析了压差分别为1.38,2.41,3.45MPa和转速分别为1.02×104,1.74×104,2.46×104r/min情况下密封动特性系数和涡动比.将计算值同Childs的理论值和Lindsey的试验值进行了对比.结果表明:增加进出口压差、增大ω/Ω和提高转速均能增大小锥度环形间隙压力,有效减小气穴范围,提高环形间隙密封性.模拟结果同试验值和理论值基本吻合,并且整体上更接近于试验值,这为具有小角度液体环形密封的工程研究提供了理论依据.     

小锥度环形密封转子动特性

为求解小锥度下液体环形密封动特性系数和转子所受激振力的大小,建立了小锥度环形密封全三维模型,利用CFD Fluent软件及其气穴模型计算得到了转子表面压力分布和气穴存在的位置.研究了进出口压差、ω/Ω和不同转速下小锥度环形密封转子表面压力变化规律,并得到了不同转速下气相分布情况.最后依据转子动力学模型和激振力方程,分析了压差分别为1.38,2.41,3.45 MPa和转速分别为1.02×104,1.74×104,2.46×104 r/min情况下密封动特性系数和涡动比.将计算值同Childs的理论值和Lindsey的试验值进行了对比.结果表明:增加进出口压差、增大ω/Ω和提高转速均能增大小锥度环形间隙压力,有效减小气穴范围,提高环形间隙密封性.模拟结果同试验值和理论值基本吻合,并且整体上更接近于试验值,这为具有小角度液体环形密封的工程研究提供了理论依据.     

园艺植物组织培养课程教学改革探讨

园艺植物组织培养是现代生物技术中最活跃、应用最为广泛的技术,同时也是各大农林院校开设的极为重要的专业基础课程。本文综合分析了该课程在最近几年的理论教学和实验教学中普遍存在的问题,并结合自身教学及其他高校教学成果进行更进一步的课程教学探讨,包括教学内容、授课方式、课外实习和实验考核方式等多方面,为进一步提高《园艺植物组织培养》课程理论和实验教学质量奠定理论基础。     

miR156介导SPLs参与调控拟南芥种子成熟过程

【目的】MicroRNA156s(miR156s)是一类非常保守的小RNA家族,探究其能否参与植物种子成熟的复杂基因表达调控网络,对提高种子质量和产量等性状具有重要意义。【方法】基于前人建立的报告基因筛选体系,分别对突变体MIM156-gus及SPLs-ox进行GUS活性分析,利用qRT-PCR技术鉴定miR156家族不同成员的组织表达特异性及突变体材料中种子成熟关键调控因子的表达情况。【结果】GUS染色后,以gus23为背景材料的MIM156及靶标基因SPL2、SPL10和SPL11的过表达突变体均在播种后14 d的幼苗中展现出了GUS表型。miR156家族中,miR156a、d、e和j在果荚中的表达量最高,至少是14 d幼苗的20倍,且MIM156下调表达突变体中LEC1、ABI3和FUS3的表达水平均有不同程度升高。【结论】miR156的下调表达和SPLs的过表达诱导SSPs基因的异位表达,且MIM156促进LEC1、ABI3和FUS3基因的表达,说明miR156/SPLs作为调控因子参与植物种子成熟过程。     

菊花品种自交亲和性鉴定及其授粉后花柱内3种保护酶活性的变化

通过单管状花和单花序自交,结合苯胺蓝染色法,对菊花品种rm1-3和rm1-4的自交亲和性进行了鉴定,同时对授粉后花柱内SOD、POD和CAT的活性进行了测定.结果发现,在单管状花自交时,rm1-3每柱头上约有15粒花粉粒附着与萌发,而rm1-4柱头上没有花粉粒附着;在单花序自交时,rm1-3在授粉后0.5-2 h时平均每柱头有31粒花粉粒附着与萌发,4-6 h时花粉粒达54粒,而rm1-4在整个时间段内平均每柱头仅有0-3粒花粉粒附着,很少萌发,但当授予rm1-3的花粉时,0.5 h后平均每柱头便有26粒花粉粒附着,并开始萌发,4～6 h时花粉粒附着量达最大,平均为121粒,大量花粉管进入花柱,说明rm1-3为自交亲和品种(SC),而邢1-4为自交不亲和品种(SI).自交亲和品种rm1-3和自交不亲和品种rm1-4自交后花柱内SOD、POD和CAT 3种保护酶活性最高值分别是未授粉时的3.65、3.04和2.01倍与3.46、2.60和1.65倍,自交亲和品种的酶活性明显高于自交不亲和品种,但自交不亲和品种授予自交亲和品种花粉后,酶活性明显高于自交亲和品种自交后的酶活性,杂交后3种酶的最高值分别是未授粉时的5.23、3.12和2.52倍,说明3种酶活性的变化可能与花粉、柱头上亲和基因的调控有关.