pfl-act基因在大肠杆菌中的高效表达及其纯化

丙酮酸甲酸裂解酶是肠道细菌在厌氧代谢中十分关键的酶,丙酮酸甲酸裂解酶激活因子(pyruvateform ate lyase activator,PFL-A)在功能上具有重要的作用。为进一步研究PFL-A的激活机理,以大肠杆菌K-12的基因组为模板,通过G enB ank上公布的序列设计引物,扩增出目的基因,克隆到pM D 18-T载体,经测序,所扩增出的基因与p f l-act基因具有99%的同源性。将p f l-act连接到高效表达载体pET-22b( )中,经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导,结果发现,p f l-act以包涵体形式表达。改变诱导剂、诱导剂量或培养温度,对包涵体的形成均没有明显的影响。     

大肠杆菌K-12中PFL家族基因的生物信息学分析

从生物信息学角度，利用生物学数据库(GenBank、Swiss-Prot、PDB)和分子生物学分析软件Vector NTI8．0，对大肠杆菌K—12中的多个丙酮酸甲酸裂解酶(pyruvate formate-lyase，PFL)进行序列的比较分析和结构预测，进而分析其活性位点、相关保守位点和特殊结构域及序列的二级结构，为利用理性设计改造丙酮酸甲酸裂解酶提供一定的信息。     

腹腔镜直肠癌根治术近期疗效分析

目的:探讨经腹腔镜行直肠癌根治术的近期疗效. 方法:30例经腹腔镜行直肠癌根治术,与同期行传统开腹手术20例作对照,比较2组患者手术时间、术中出血量、术后近期情况及随访的局部复发率和远处转移率.结果:腹腔镜组和传统手术组术中出血量分别为(160.9±70.3)mL和(300.2±50.5)mL(P＜0.05);腹腔镜组术后肛门首次排气时间、下床活动时间均早于传统手术组(P＜0.05);术后病理学检查和术后随访的疗效比较,差异无显著性(P＞0.05).结论:经腹腔镜行直肠癌根治术与传统开腹手术比较,近期效果满意且有其独特优点.     

环形槽位置对高速诱导轮空化性能的影响

为抑制由高速诱导轮叶顶间隙泄漏涡引起的空化,在高速诱导轮上游和下游设立能吸纳泄漏涡的结构(即环形槽),并设计了5种环形槽方案,通过试验及数值计算相结合的方法研究不同环形槽方案对空化的抑制机理.研究发现:空泡最先出现在诱导轮吸力面进口边与轮缘相交的位置,随着管道进口压力的不断降低,空泡会不断向诱导轮流道内发展,进而漫延至...     

陕北黄土地区大体积高生能混凝土施工控制技术

本文简要分析了陕北黄土地区大体积高性能混凝土施工过程中常遇到的问题,并结合工程实例,提出从原材料及配合比、浇筑过程控制和养护及温度监控几个方面采取相应措施来控制陕北黄土地区大体积高性能混凝土的施工质量.