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1.
应用免疫细胞化学方法对白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor, LIF)、白血病抑制因子受体(leukemia inhibitory factor receptor, LIFR)和gp130在月经周期猕猴卵巢内的表达进行了研究。结果表明:LIF、LIFR和gp130在猕猴卵巢内的表达量随月经周期的不同而变化,LIF及其受体在增殖期卵巢内的表达量高于分泌期的卵巢。LIF及其受体在原始卵泡、腔前卵泡和有腔卵泡的卵细胞内表达量均较高,在颗粒细胞、卵泡膜、卵巢生殖上皮和卵巢基质中有少量表达,而在闭锁卵泡、退化的黄体和卵巢髓质中未见表达。LIF及其受体在猕猴卵巢内的表达可能受卵巢分泌的类固醇激素所调控,LIF可能通过自分泌或旁分泌的方式在猕猴卵泡发育及排卵等过程中起重要作用。 相似文献
2.
为了探讨卵巢激素是否影响甘氨酰-tRNA合成酶(Gars)在小鼠子宫的表达,试验将12只小鼠切除卵巢后随机分成4组,分别为E2组(注射E2 100 ng)、P4组(注射P4 2 mg)、E2+P4组(注射E2 100 ng和P4 2 mg)和Oil组(注射芝麻油0.1 mL),采用mRNA原位杂交、实时荧光信号颜色定量PCR、免疫组织化学和Western-blot分析等方法,从基因和蛋白质水平对Gars在小鼠子宫的表达进行定位和定量研究。结果表明:加入碱性磷酸酶显色底物NBT/BCIP后,E2组信号颜色为深棕色(偏黑),P4组及E2+P4组为浅棕色,Oil组仍为绿色;与注射芝麻油相比,E2及E2+P4可上调切除卵巢小鼠子宫Gars基因的表达(P<0.05),P4不影响切除卵巢小鼠子宫Gars基因的表达(P>0.05);加入免疫组织化学显色底物DAB后,E2组、E2+P4组信号颜色为深棕色,Oil组为浅棕色,P4组为蓝色;与注射芝麻油相比,E2及E2+P4可上调切除卵巢小鼠子宫Gars蛋白的表达P<0.05),P4则显著下调切除卵巢小鼠子宫Gars蛋白的表达(P<... 相似文献
3.
卵母细胞的化学去核是采用干扰染色体分离或纺锤体正常功能的化学试剂,使其所有染色质通过纺锤丝牢固结合,并借助极体排出的惯性将所有染色质全部带出胞外,达到去核目的。目前以化学去核处理的MⅡ期卵母细胞为受体,已获得克隆小鼠。然而,第一次减数分裂期的小鼠卵母细胞经化学去核后,进行核移植还未见报道。与传统的机械去核相比,该方法对卵母细胞无机械损伤,完全是极体的自然排放;同时细胞质及其中核重编程相关因子损失量小;而且高效、省时,程序简单,所得的卵胞质或许更适合于供体细胞核的重编程。剪取超排小鼠的卵巢,以注射器刺破有腔卵泡后获得卵母细胞和卵丘细胞复合体,进行体外成熟培养。成熟培养5 h后去除卵丘细胞,挑选生发泡破裂的细胞顺序移入含脱羰秋水仙碱(DC,0.4μg/mL,2 h)和DC(0.4μg/L) 放线菌酮(CHX,50μg/mL)的M16培养液中继续培养,直到第一极体排出。去核卵胞质与胎儿成纤维细胞用植物凝集素(PHA,200μg/mL)粘合后,转入电击槽;施加1个5 V/mm、3μs交流电脉冲和2个92 V/mm、70μs直流电脉冲进行电融合。3 h后,以SrCl2激活6h,于四孔培养皿中制作的“孔中孔”(well of well)体外培养重构胚。试验重复3次,共计698个卵母细胞,获得的重构胚融合率和激活率分别为84.8%和93.6%;胚胎2-细胞发育率为24.7%,4-细胞率为6.74%;2-细胞期克隆胚移植假孕受体后,没有获得怀孕受体。试验分别以“血清饥饿”胎儿成纤维细胞、新鲜细胞和冷冻保存细胞为供体作核移植,结果表明,冷冻保存细胞的融合率(69.3%)与其余两组(80.6%和84.8%)呈显著差异(P<0.05);激活率、2-细胞和4-细胞发育率,则三组间差异不显著(P>0.05)。本研究将化学去核与无透明带技术相结合,完全丢弃了传统核移植的显微操作及其繁琐程序,属手工克隆,它的成功将会大大简化核移植程序,同时提高了核移植的生产力,最终提高核移植总效率。 相似文献
4.
整合位点的侧翼序列是外源基因表型研究和功能探讨的前提条件,对目的基因的正常转录和表达有着重要影响。本试验利用热不对称交措式PCR(Thermal Asymmetric Interlaced PCR,TAIL-PCR)的方法克隆了目的基因。结果表明:外源基因整合到牛的12号染色体基因组克隆(NW_003104315.1)中。分析了整合位点的纯合性发现转基因牛为整合位点杂合子。TAIL-PCR法能够有效、快速的鉴定外源基因在基因组中的整合位置,具有良好的应用前景。 相似文献
5.
以施以牡蛎壳为载体海卤缓释肥组为试验组,施以普通尿素肥和不施肥料组为对照组,记录香菜发芽情况,测定缓释肥对叶绿素、氨基酸和微量元素的影响。结果表明,试验组与2个对照组相比,香菜的发芽时间提早1 d,发芽率提高约15%;叶绿素a、叶绿素b、总叶绿素含量差异显著(P〈0.05),且存在试验组〉对照组①〉对照组②,施加海卤缓释肥更有利有叶绿素a的积累;单个氨基酸、总氨基酸、必需氨基酸及呈味氨基酸差异显著(P〈0.05),且有较大增加;微量元素含量差异显著(P〈0.05),除P和B含量减少外,其他元素含量均有不同程度的增加,以Fe的含量增加最多,增加了约4×103μg/g(DW)。 相似文献
6.
分别对马氏珠母贝贝肉及贝壳的氨基酸和脂溶性成分进行了分析和对比。结果显示马氏珠母贝贝肉中含有17种氨基酸,其中必需氨基酸(Lys、Thr、Phe、Val、Leu、Ile、Met)占总氨基酸含量的32.0%,呈味氨基酸(Arg、Ala、Gly、Asp、Glu)占总氨基酸含量的56.2%。贝壳中检测出10种氨基酸,必需氨基酸占总氨基酸含量的52.0%,呈味氨基酸占总氨基酸含量的41.8%。从马氏珠母贝贝肉和贝壳中分别鉴定出47种和33种脂溶性成分,其中主要是烷烃化合物,贝肉与贝壳有6种组分是相同的。此外,马氏珠母贝贝肉的脂溶性组分中,棕榈酸的含量最高,为58.78%。 相似文献
7.
8.
9.
10.
<正> 泥石流是一种含有大量泥沙、石块等固体物质,突然暴发,历时短暂,来势凶猛,并具有强大破坏力的特殊洪流。它的泥沙石块的体积含量一般高于15%,最高可达80%;容重在1.4t/m~3以上,最高可达2.3t/m~3。与其它事物一样,泥石流也有着自身发生、发展和消亡的条件与规律。我国对泥石流研究已有30多年的历史,对其已有比较深刻的认识。本文拟对泥石流发育的几个关系进行讨论。 相似文献