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为了建立检测绵羊家畜衣原体血清抗体的间接ELISA方法,本试验构建pET-28b-ompA重组表达质粒,经诱导表达和纯化后,对重组主要外膜蛋白(MOMP)进行Western blot鉴定;以MOMP为包被抗原,通过反应条件筛选建立绵羊家畜衣原体血清抗体间接ELISA检测方法,分析其敏感性、特异性、重复性和符合性,并进行临床样品检测。结果显示,MOMP以包涵体形式表达,经Western blot鉴定重组蛋白具有良好的反应原性。优化反应条件为:抗原包被浓度为1 mg/L,37℃静置孵育1 h;血清抗体稀释倍数为1∶100,37℃反应1 h;酶标二抗稀释倍数为1∶5 000,37℃孵育1 h;底物显色条件为37℃避光5 min。利用52份绵羊血清确定ELISA方法的阳性判定临界值为P/N=2.156。该方法的敏感性、特异性和重复性较高。用该方法与间接血凝试验对86份血清进行检测,两者符合率为73.2%。用该方法对临床采集的205份绵羊血清样品进行检测,阳性率为34.1%。结果表明,本试验建立的绵羊家畜衣原体血清抗体间接ELISA检测方法具有较高的特异性和敏感性,可应用于临床检测。 相似文献
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以雷氏盐的光化学反应为研究对象,建立该反应的数学模型。利用线性回归的方法,将数学模型的原始数据进行积分计算,绘制拟合曲线。该拟合曲线与理论曲线很好地重叠,为模拟光化学反应提供了一种可行的方案。 相似文献
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为了改善大众EA888发动机的性能,对其采用加载低压EGR系统进行研究。首先利用GTPOWER软件建立发动机仿真模型,通过模拟数据与实验数据的对比,验证了模型的准确性;然后在模型中加载外部低压EGR系统,使其在不同的转速下得到相应的压缩比、燃油经济性,排放性能的仿真数据,并进行结果分析。结果表明:在EA888发动机中加载低压EGR系统后,在保持动力性的前提下,排放情况得到了很大的改善,NOX的排放量大幅度下降;随着EGR率增加,发动机的燃烧持续期增加,缸压峰值和燃烧相位也发生了改变,燃油消耗率下降。 相似文献
4.
为探索天然微藻资源化的利用途径,该文以天然栅藻为原料,采用傅立叶转换红外线光谱分析, X射线衍射分析,X射线荧光光谱分析,环境扫描电子显微镜与热重分析仪对水热炭进行测试分析。研究结果表明,随着水热温度的升高,水热炭产率从47.29%(180℃)降低至43.01%(240%);水热炭的O/C摩尔比从1.45减小至0.28,碳化程度加强,水热炭具有应用于固体燃料的潜力。鉴于水热炭含有大量灰分,其热值为8.43~9.67 MJ/kg,因此脱灰预处理是必要的过程。经过水热碳化处理,天然栅藻的比表面积从4.36 m~2/g增加到35.26 m~2/g。热解动力学结果表明随着水热温度的提高,水热炭的热稳定性增强。研究结果对天然微藻的资源化利用提供了一定的理论参考。 相似文献
5.
本文通过牡丹江市几所高校的大学生体质健康测试成绩为研究对象,对当前高校大学生身体素质指数进行分析,通过学生的测试成绩来分析大学生的身体素质及健康状况,为做好下一步的体育教学打下良好的基础。 相似文献
6.
为建立绵羊鹦鹉热衣原体(Cp)间接ELISA抗体检测方法,本实验将编码Cp主要外膜蛋白MOMP的omp A基因序列按大肠杆菌密码子偏好性优化后,合成质粒p ET-28b (+)-omp A,另外设计特异性引物,分别将omp A截短克隆至p ET-28b(+)载体中构建重组表达质粒p ET-28b(+)-omp A1-182和p ET-28b(+)-omp A183-390,测序鉴定正确后分别转化至E.coli BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导并纯化后,经western blot鉴定3个重组蛋白,结果显示,重组MOMP183-390蛋白(r MOMP183-390)表达效果最好。以r MOMP183-390作为包被抗原,采用方阵滴定法优化各反应条件,初步建立了检测Cp抗体的间接ELISA方法。采用建立的该方法检测羊痘病毒、布鲁氏菌、羊口疮病毒、小反刍兽疫病毒、口蹄疫病毒等羊临床常见病的阳性羊血清,结果显示,除Cp外,该方法与其他阳性羊血清均无交叉反应,特异性强;将C... 相似文献
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曲磊 《新农村(黑龙江)》2011,(14)
农村经济是中国国民经济的基础,当前城乡二元结构造成的城乡发展不均衡不仅影响农村经济的发展和稳定,而且影响到国民经济的全局.农村经济发展不仅是全面建设小康社会、促进农村稳定的需要,也是开拓农村市场、扩大内需、转变发展方式、促进国民经济又好又快发展的需要. 相似文献
8.
为建立一种非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV)抗体间接ELISA检测方法,利用马铃薯Y病毒(potato virus Y,PVY)介导的植物生物反应器在本氏烟草中表达ASFV p30蛋白,并以表达的蛋白作为包被抗原,对间接ELISA各反应条件进行优化。依据ASFV SY-18株的CP204L(p30)基因序列,按照本氏烟草密码子的偏好性,对p30基因(231~536 bp)的核苷酸序列进行优化、人工合成及克隆,通过In-Fusion连接技术将扩增的p30基因插入到PVY基因组的P1和HC-Pro基因之间,构建PVY-p30重组病毒质粒,以摩擦的方式将质粒接种本氏烟草叶片,14 d后,通过RT-PCR和Western blot分析目的基因的转录和重组蛋白的表达情况,并利用Ni-NTA-琼脂糖亲和层析柱纯化本氏烟草中表达的p30重组蛋白,Western blot分析p30重组蛋白的纯化效果和反应原性,将纯化后的p30重组蛋白作为包被抗原,建立ASFV抗体间接ELISA检测方法。结果显示,构建的PVY-p30重组病毒能够系统性侵染本氏烟草;p30重组... 相似文献
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曲磊 《新农村(黑龙江)》2011,(11):33-33,37
农村经济是中国国民经济的基础,当前城乡二元结构造成的城乡发展不均衡不仅影响农村经济的发展和稳定.而且影响到国民经济的全局,农村经济发展不仅是全面建设小康社会、促进农村稳定的需要,也是开拓农村市场、扩大内需、转变发展方式、促进国民经济又好又快发展的需要 相似文献
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指出了膜生物反应器MBR作为一种高效环保绿色无污染的新型废水处理资源化回用技术,其将传统活性污泥法和膜分离技术有机结合起来,具有常规污水处理方法所不具有的优势,广泛应用在废水处理的各个领域。分析了MBR出水中的难降解有机物、无机盐、微生物等对中水回用造成困难,影响排放水质等问题。探讨了通过对MBR出水进行深度处理以提高排放水质并扩大回用范围,进而实现节约用水和保护环境的目的。 相似文献