基于《C程序设计》课程的翻转课堂教学模式探究

本文以高职课程《C程序设计》为载体,提出了反转课堂的设计步骤,以实现主要知识由学生自主学习和动手编程掌握的目的。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白纳米抗体的筛选及其对病毒复制的抑制效应

为获得猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)GP5蛋白的特异性纳米抗体,并探究其对病毒复制的抑制效应。使用原核表达系统将PRRSV-GP5蛋白大量表达后经镍柱亲和层析法纯化,使用所获的重组GP5蛋白免疫羊驼,并于第0、14、28、42天时采血,检测羊驼体内抗体效价后分离全血淋巴细胞,提取细胞总RNA,反转录后使用巢式PCR扩增出重链抗体可变区(VHH)片段,并与pCANTAB-5E载体相连后转化入TG1感受态细胞,利用噬菌体展示技术构建GP5-VHH噬菌体抗体展示文库。经连续三轮特异性噬菌体的筛选与富集后,淘选出与PRRSV-GP5蛋白高结合力的纳米抗体,通过间接ELISA方法鉴定其反应原性,后将所获的纳米抗体基因克隆至真核表达载体pcDNA3.1(-)中,利用Lipofectamine3000转染至Marc-145细胞内,与PRRSV分别共孵育0、24、36、48、60、72 h,以探究所筛针对PRRSV-GP5蛋白的纳米抗体于胞内对病毒复制与转录产生的影响。结果表明,成功对PRR...     

免疫接种途径及佐剂对猪传染性胃肠炎、流行性腹泻二联活疫苗免疫效果的影响

猪传染性胃肠炎（TGE）和猪流行性腹泻（PED）是两种严重威胁养猪业的病毒性传染病,其病原猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）和猪流行性腹泻病毒（PEDV）同属于冠状病毒,形态相似,繁殖的靶器官相同,引起猪呕吐、脱水及水样腹泻,对仔猪具有高度致死率[1-3]。     

猪繁殖与呼吸综合征对塞内卡病毒灭活苗免疫效果的影响

为探究猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)对塞内卡病毒(SVA)灭活疫苗免疫效果的影响,对PRRS阳性猪和PRRS阴性猪分别免疫相同批次、相同剂量的SVA灭活苗,检测首次免疫后7 d、14 d、21 d、28 d血清中和抗体效价,并在免疫后28 d对所有试验猪进行攻毒保护试验。结果显示,所有PRRS阳性猪的SVA血清中和抗体效价均小于1∶4,而PRRS阴性猪SVA血清中和抗体效价在二免后上升到较高水平。攻毒保护结果与中和抗体效价结果呈正相关,PRRS阳性组0/5保护,而PRRS阴性组试验猪达到5/5保护。这一研究表明PRRS会使SVA灭活疫苗免疫效果下降,为SVA及PRRS疫苗的研发及猪场疾病的防控提供了参考。     

猪流行性腹泻病毒X-6/2021株的分离鉴定及其S1基因序列分析

为了了解四川地区流行的猪流行性腹泻病毒（PEDV）的生物学特征及基因的遗传进化关系,从四川某地采集了发病仔猪小肠,病料处理后在Vero细胞上进行盲传,通过RTPCR、间接免疫荧光鉴定（IFA）验证,成功分离出1株猪流行性腹泻病毒,命名为X-6/2021株。对X-6/2021株S1基因进行RT-PCR扩增,获得的分离株S1序列与国内外PEDV毒株进行序列比对和遗传进化分析。结果显示,PEDV-X-6/2021毒株与Ⅰ型参考毒株的同源性为90.6%～93.2%,与Ⅱ型参考毒株的同源性为97.6%～99.0%。试验成功地从四川省分离鉴定得到1株猪流行性腹泻病毒,为该地区PEDV防控及候选疫苗毒株的筛选提供了物质基础。     

新型稀释液用于猪传染性胃肠炎-流行性腹泻二联活疫苗的免疫效果研究

利用新型稀释液和PBS分别对猪传染性胃肠炎(TGE)-流行性腹泻(PED)二联活疫苗进行稀释,相同剂量免疫仔猪,在不同天数后采集血清测定中和效价。结果显示:两个试验组其TGE和PED中和抗体效价均在21日达到峰值。采用PBS稀释组TGE和PED中和抗体峰值效价分别为1:128和1:112;采用13115稀释液组TGE和PED中和抗体峰值效价分别为1:413和1:304,是PBS组的3倍左右。试验说明猪传染性胃肠炎-流行性腹泻二联活疫苗在不利用新型稀释液的情况下已能达到较好的免疫效果,而在利用新型稀释液后,效果增强更加明显,而且时间更短。故在应用猪传染性胃肠炎-流行性腹泻二联活疫苗时推荐与新型稀释液搭配使用。     

半滑舌鳎甲状腺激素受体β基因(TRβ)的克隆与表达分析

甲状腺激素在鲽形目仔鱼的变态过程中起着重要的作用,而甲状腺激素的生物效应是由甲状腺激素受体(thyroid hormone receptors,TRs)介导的。本研究利用RACE技术克隆了半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)TRβ基因的全长,并对其功能进行了生物信息学分析。结果显示,TRβ基因(GenBank登录号:No.KJ499433)cDNA全长为2 345 bp,开放读框(open reading frame,ORF)长1 188 bp,编码396个氨基酸,5'-UTR和3'-UTR分别长454和703 bp。通过氨基酸序列比对发现,TRβ氨基酸序列铰链区有一段由9个氨基酸残基组成的插入序列,推测这段序列可能为硬骨鱼类TRβ基因所特有的。实时荧光定量PCR技术分析结果显示,TRβ基因在各组织中均有表达,且在肝组织中的表达量显著高于其他组织(P0.05);因此推测TRβ基因在半滑舌鳎成鱼各组织中具有多样性的功能,而且其在肝脏的新陈代谢中起到重要的调节作用。在半滑舌鳎仔鱼变态时,TRβ基因的表达量随变态开始而迅速增加,在变态高峰期到达最高。药物处理实验结果显示,正常变态和提前变态的仔鱼TRβ基因的表达水平均随变态开始而迅速上调,而变态被抑制的仔鱼中TRβ基因的表达量则未出现显著变化,表明TRβ是调控半滑舌鳎仔鱼变态过程的重要基因,在半滑舌鳎生长发育早期阶段起较关键作用。本研究为深入解析半滑舌鳎变态的分子机制提供了理论依据和参考。     

黄颡鱼幼鱼对蛋白质和脂肪的需要量

在水温23±5℃下,将平均体质量10．32g的黄颡鱼（Pelteobagrus fulvidraco）放养在27个60cm×60cm×120cm的微流水网箱中,饲喂3个蛋白质水平（32．0％、40．0％、48．0％）,每个蛋白质水平设3个脂肪水平（3．0％、10．0％和17．0％）的饲料,饲养100d。结果表明：在3．0％脂肪水平下,黄颡鱼摄食含40．0％蛋白质的饲料时,平均末体质量、特定生长率和蛋白质效率显著提高,饲料系数降低（P〈0．05）。在10．0％脂肪水平下,黄颡鱼摄食含48．0％蛋白质饲料时,饲料系数显著降低（P〈0．05）,摄食含40．0％的蛋白质饲料次之。黄颡鱼摄食含48．0％蛋白质与3．0％脂肪饲料组和40．0％蛋白质与10．0％脂肪组的干物质消化率最高（P〈0．01）;蛋白质消化率在48．0％蛋白质与3．0％脂肪达到最高（P〈0．01）,脂肪消化率均在40．0％蛋白质与10．0％脂肪达到最高（P〈0．01）。实验表明,黄颡鱼幼鱼较为适宜的蛋白质和脂肪需要量分别为40．0％和10．0％。     

维生素C对花鱼种生长和免疫指标的影响

研究了饲料中维生素C（VC）的含量对花Hemibarbus maculates鱼种生长和免疫指标的影响。在水温为（25.0±3.0）℃的条件下,将14.84 g的花鱼种放养在12个网箱（60 cm×60 cm×120 cm）中,网箱放在室外2个水泥池（6.0 m×2.0 m×1.2 m）中。试验设F0（对照）、F1、F2、F3 4组,分别投喂按0、1 000、2 000和3 000 mg/kg（饲料）剂量添加含量为95%的包膜VC的试验饲料（粗蛋白37.0%、粗脂肪11.0%）。125 d的饲养结果表明：花的成活率为93.33%-98.67%,各组间差异不显著（P〉0.05）;随着饲料中VC含量的增加,花鱼种的特殊增重率先上升后降低,摄食含973.00 mg/kg VC的饲料时（F1组）,鱼的特殊增重率显著高于其它组（P〈0.05）,饲料系数极显著低于其它组（P〈0.01）,蛋白质利用率极显著高于其它组（P〈0.01）;根据二次曲线拟合计算得出,花特殊增重率最高和饲料系数最低时,饲料中VC的含量为1 415.78-1 451.74 mg/kg;花鱼种血清中γ球蛋白含量随着饲料中VC含量的增加先升高再降低,VC含量为973.00 mg/kg时达最高值,该组极显著地高于其它组（P〈0.01）;花鱼种血清中溶菌酶和超氧化物歧化酶活性随饲料中VC含量的增加而极显著升高（P〈0.01）,分别在VC含量为2 857.00、1 882.00 mg/kg（F3、F2组）时达最大值。