新农村建设加快农业机械化进程——2008年农机行业发展空间广阔

社会主义新农村建设给农业机械化事业带来了新的发展机遇,农业机械化的快速发展也有力推动了新农村建设的有效推进。我国农业机械化水平显著提高,农机装备总量持续增长,结构进一步优化。2007年全国农机总动力预计达7.6亿千瓦,比上年增长4.6%;农机作业水平不断提高,全年机耕、机     

新农村建设加快农业机械化进程2008年农机行业发展空间广阔

社会主义新农村建设给农业机械化事业带来了新的发展机遇,农业机械化的快速发展也有力推动了新农村建设的有效推进。我国农业机械化水平显著提高,农机装备总量持续增长,结构进一步优化。2007年全国农机总动力预计达7.6亿kW,比上年增长4.6%;农机作业水平不断提高,全年机耕、机     

早熟油桃子叶和胚轴离体培养再生植株的研究

 以早熟油桃‘华光’和‘曙光’为试材, 对影响其子叶和胚轴再生的植物生长调节剂浓度及组合、培养基、胚发育时期等因素进行了研究。结果表明: 子叶培养中, 华光花后60 d为最佳取材时期,其子叶在MS + TDZ 2 mg/L +NAA 0.04 mg/L的培养基上再生率为75%; 曙光则要取花后68 d成熟期子叶,其在MS +BA 8 mg/L +NAA 0.04 mg/L培养基上再生率为66.7%。胚轴培养中, 上、下胚轴无显著差异,华光胚轴再生以G + TDZ 3.0 mg/L + KT 1.0 mg/L +NAA 3.0 mg/L 效果较好; 曙光胚轴再生以QL + TDZ2.0 mg/L +NAA 0.5 mg/L效果较好。     

基于牛结节性皮肤病病毒ORF61基因荧光定量检测方法的建立

基于国内流行的牛结节性皮肤病病毒(lumpy skin disease virus, LSDV)的基因组序列,建立了靶向ORF61基因的MGB探针荧光定量PCR检测方法。本研究基于LSDV基因序列设计出带有MGB探针的特异性荧光定量PCR引物,并进行特异性和灵敏性筛选验证。最终,筛选得到靶向于LSDV ORF61基因的一对qPCR引物;利用pCAGGS-ORF61真核表达质粒,获得标准曲线y=-3.287 5x+47.87,线性相关系数R²=0.998 6,扩增效率达101%;荧光定量PCR特异性、重复性和灵敏性试验结果表明,该引物的特异性高、重复性良好和灵敏度高等优点;该引物的最低检测限为6.71拷贝·μL^-1,各批次内与批次间重复性结果的变异系数均小于2%。以上结果表明,作者建立特异性LSDV的荧光定量PCR检测方法,为LSD预防和控制提供有效的检测手段。     

油桃子叶再生植株影响因子研究

以早熟油桃华光和曙光为材料,研究了培养基(MS,G,WPM)、细胞分裂素(BA,TDZ,ZT,KT)、生长素(NAA)、子叶发育的不同时期(花后30,40,50,60d和采收期)等因子对早熟油桃子叶再生植株的影响。结果表明,华光花后60d为最佳取材时期,其子叶在MS+TDZ2mg/L+NAA0.04mg/L培养基上的再生率为75%;而曙光的最佳取样时间为采收期,其子叶在MS+BA8mg/L+NAA0.04mg/L培养基上的再生率为66.7%。子叶暗培养28d后转入光下进行光暗交替培养,华光、曙光子叶再生率均达到最高。     

猪繁殖与呼吸综合征疫苗的发展现状及mRNA疫苗前景

猪繁殖与呼吸综合征是猪的重要疫病之一,病猪通常双耳发绀呈蓝紫色,又称猪蓝耳病,这是一种已经造成巨大经济损失的重大疫病,其病原体是一种极易变异与重组的病毒——猪繁殖与呼吸综合征病毒。针对其最重要的防控手段是疫苗接种。已经获批上市的灭活疫苗与减毒活疫苗,以及正在探索中的亚单位疫苗、DNA疫苗等新型疫苗尚无法实现根除该病。mRNA疫苗因其突出的安全、有效、高产及便利等特点,极可能实现对猪蓝耳病的完全预防。论文综述了猪繁殖与呼吸综合征的防控现状、mRNA疫苗的研究进展以及mRNA疫苗用于该种疫病的可能性分析,为猪繁殖与呼吸综合征的防控思考了新的方向。     

利用CRISPR/Cas9系统构建SBNO2基因敲除细胞系及其功能研究

[目的]草莓缺口同源物2(Strawberry Notch Homolog 2,SBNO2)是参与炎症反应的重要基因之一,利用CRISPR/Cas9基因编辑技术靶向敲除BHK-21细胞中SBNO2基因,初步探索SBNO2基因敲除后对口蹄疫病毒(FMDV)复制的影响.[方法]首先应用Western Blot方法检测FMD...     

稳转hTERT绵羊睾丸细胞系的建立

羊睾丸原代细胞的体外培养是探究牛羊病毒致病机理的重要材料,实际科研工作中常受困于此类细胞传代性差、性质不稳定等缺点。外源性导入人端粒酶逆转录酶基因(hTERT)可以促使端粒酶活性的表达,延长细胞体外培养寿命是一种有效建立细胞永生化的方法。本试验中,通过RT-PCR获得hTERT。利用同源重组的技术,成功的构建了hTERT的真核表达质粒和慢病毒质粒。利用慢病毒表达系统,建立了稳转hTERT绵羊的睾丸细胞系。间接免疫荧光和蛋白免疫印迹试验研究结果均显示,hTERT基因已成功整合进入绵羊睾丸基因组中并稳定表达。第30代次的羊睾丸细胞生长较快,性状较稳定,表明已成功构建了具有永生化特性的绵羊睾丸细胞系,为草食动物病毒的相关研究提供重要的细胞模型。     

组蛋白去乙酰化酶抑制剂对小反刍兽疫病毒复制的影响

旨在探究组蛋白去乙酰化酶抑制剂对小反刍兽疫病毒(peste des petits ruminants virus，PPRV)复制的影响，以确定组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylases，HDACs)在PPRV复制过程中的作用。采用RT-qPCR法检测PPRV感染后Vero细胞HDACs(HDAC1~11) mRNA表达水平的变化；用针对不同类型HDACs的抑制剂处理感染PPRV的Vero细胞48 h，Western blot筛选影响PRPV N蛋白表达的抑制剂；应用筛选出的抑制剂处理感染PPRV的Vero细胞，通过RT-qPCR、Western blot和TCID₅₀法进一步分析抑制剂对病毒RNA、蛋白和病毒滴度的影响。结果显示，PPRV感染后，Vero细胞HDAC2 mRNA水平显著升高(P<0.05)；SAHA、TMP269、MGCD0103处理后，PPRV N蛋白的表达量明显降低，且呈剂量负相关；SAHA、TMP269、MGCD0103也显著降低PPRV N RNA表达水平(P<0.05，P<0.05，P<0.01)和病毒滴度(P<0.05,P<0.05,P<0.01)。这表明Ⅱa类HDACs抑制剂和Ⅰ类HDACs抑制剂能抑制PPRV的复制，Ⅰ类HDACs (HDAC1~3)和Ⅱa类HDACs (HDAC4~5、HDAC7、HDAC9)可能参与调控PPRV的感染。