利用iTRAQ蛋白质组技术筛选与鸡喙畸形相关的候选蛋白

【目的】中国地方鸡种如北京油鸡、清远麻鸡存在喙畸形现象,表现为上下喙咬合不全,呈交叉状。严重影响鸡饮水和采食,从而影响个体发育和生产性能的发挥,造成一定经济损失。笔者根据喙畸形个体的系谱记录,发现喙畸形的形成受到遗传因素的影响,但具体机制尚不明确。蛋白是行使各种生物学功能的最终形式之一,喙畸形个体的发生可能是由于核心蛋白或者相关调控蛋白代谢异常造成的。利用同位素标记相对和绝对定量（isobaric tags for relative and absolute quantitation,iTRAQ）技术以及生物信息学分析方法,筛选鸡畸形喙与正常喙中差异表达的蛋白,作为喙畸形相关的重要候选蛋白,为进一步研究北京油鸡喙畸形的遗传机制奠定基础。【方法】挑选3只120日龄喙畸形的公鸡作为试验组,编号为W1、W2、W3,同时,挑选与试验组个体为同胞关系（全同胞或半同胞）的喙正常公鸡作为对照组,编号为Z1、Z2、Z3。将喙畸形与其同胞正常个体作为一个比对组,iTRAQ试验具体包含3个比对组,即W1 vs Z1,W2 vs Z2,W3 vs Z3。屠宰个体后,剔除喙组织周围肌肉和筋膜,分离得到喙上颌骨和下颌骨,提取总蛋白样品,应用6个 iTRAQ标签标记各蛋白样品,经过色谱层析预分离,联合液相串联质谱分析,采用Mascot 2.3.02软件对蛋白进行鉴定和定量分析。试验组（W）与其同胞对照组(Z)样本比较（W1 vs Z1,W2 vs Z2,W3 vs Z3）,选择肽段数≥2,表达差异值＞1.2（上调）或＜0.83（下调）,且P＜0.05的蛋白作为差异表达蛋白。【结果】利用iTRAQ技术一共在喙组织中鉴定到3 372个蛋白,鉴定到的特异性肽段有12 769个。其中原鸡蛋白1 869个,分子质量主要分布在10-100 kD之间。3个比对组共鉴定出159个表达量有显著差异的蛋白质,其中包含70个表达上调的蛋白,89个表达下调的蛋白。统计各比对组蛋白表达差异值发现,表达量差异较大的上调蛋白质有LPL、MLC-2、CO9A1、MATN3、HSP90B1等,表达量差异较大的下调蛋白质有MBP、RLA1、PRVM、HAPLN1等。结合已经报道的这些蛋白的生物学功能,其中CO9A1、MATN3、HAPLN1与软骨合成和软骨骨化相关,CO9A1是带状软骨纤维的组成物质,MATN家族是非胶原性细胞外基质蛋白家族,HAPLN1是软骨细胞外基质的重要组成成分;PRVM是细胞内钙离子结合蛋白,参与调控Ca2+离子信号通路;LPL是多功能酶,主要在脂质代谢和转运过程中起作用,参与调控PPAR信号通路。初步筛选出CO9A1、MATN3、HAPLN1、PRVM、LPL作为与鸡喙畸形相关的候选蛋白。【结论】差异表达蛋白的发现为鸡喙畸形形态的发生提供蛋白质水平上的理论依据。     

干冰用于鸡超低温冷冻精液短期保存和运输的可靠性评估

为解决液氮保存下鸡冷冻精液的异地运输难题,研究对北京油鸡冷冻精液在干冰（-79℃）中进行短期保存,分别保存0 h（对照组）、12 h、24 h、48 h和72 h,以模拟冷冻精液在干冰中的短期运输,并测定干冰不同保存时间的鸡冷冻精液精子质量和受精能力。结果显示：干冰保存后北京油鸡冷冻精液的精子活力、存活率、顶体完整率、质膜完整率和受精率均显著降低（P<0.05）,精子畸形率显著增高（P<0.05）,且随着干冰保存时间的增加,精子质量和受精能力逐渐下降。研究表明,干冰作为冷源对鸡冷冻精液的精子质量有较大的损害作用,使用干冰难以实现对鸡冷冻精液的有效短期保存和运输。     

淮北地区机插水稻钵穴中大苗育秧技术初探

机插水稻钵穴中大苗育秧移栽是一种新型的水稻机械化生产方式,有着高产、高效、省工、节本等诸多优点,是对传统的机插小苗移栽的重大改进与革新,解决了传统的机插小苗移栽存在的诸多问题与不足。该文就淮北地区机插水稻钵穴中大苗育秧技术要领进行了阐述。     

光照强度对北京油鸡生长激素和褪黑激素含量的影响

研究光照强度对北京油鸡各阶段生长激素和褪黑激素含量的影响.选用1日龄北京油鸡1 200只作为研究对象,平均分到四个组中,每个组6个重复,每个重复50只鸡.第1周光照强度为20 lx,第2～13周分别进行1、5、10和50 lx 4种光照强度处理.分别在第4、8和12周时,每个重复中随机选择2只鸡,采集血样,测定血清中生长激素和褪黑激素的含量.结果显示,第4和8周时,5和10lx组生长激素水平极显著高于1和50 lx组(P＜0.01);第12周各组的含量没有显著差异.1 lx下褪黑激素含量最高,且8周时极显著高于其他三组(P＜0.01).因此在5～10 lx光照强度下北京油鸡血清中生长激素和褪黑激素的含量最高,可以维持正常的生长发育.     

完善我国动物卫生监测制度措施的若干建议

动物疫病监测是防治动物疫病的关键。世界动物卫生组织（OIE）是动物卫生领域的权威国际组织,在动物疫病等卫生监测方面制定了科学的标准规则。本文拟在研究OIE标准规则的基础上,立足实际,提出进一步完善我国动物疫病监测制度措施的意见建议。     

支链氨基酸对蛋鸡和其他家禽生产性能的影响

支链氨基酸(branched-chainaminoacids,BCAA)可通过蛋鸡肝脏的脂肪酸代谢作用调控卵黄脂蛋白的产生,因而日粮中BCAA的含量以及不同BCAA之间的配比对蛋鸡拥有理想的产蛋性能极为重要。然而,文献报道的蛋鸡最适支链氨基酸的需要量和不同BCAA之间的合适配比并不统一。综合各类研究发现,日粮中异亮氨酸和缬氨酸+亮氨酸的含量对蛋鸡生产性能的影响存在互作效应,当缬氨酸+亮氨酸的浓度低时,增加异亮氨酸的含量可以降低蛋鸡的蛋重和增重;而当缬氨酸+亮氨酸的浓度高时,高水平的异亮氨酸只能使蛋鸡的生产性能出现略微的下降。另外,日粮中异亮氨酸的含量在一定水平上可以使蛋鸡获得最大的氮沉积量,超过一定的浓度范围会降低蛋鸡的体重,超过幅度更大时会降低蛋鸡的产蛋量。     

鸽乳的组成及其生成调控机制的研究进展

鸽乳是由鸽嗉囊组织生成并分泌的半固态营养物质,是乳鸽唯一的营养来源。乳鸽出生后不能自主觅食,需由亲鸽哺育,鸽乳对其生长发育极为重要。鸽乳的生成及分泌是一种特殊的生理过程,在禽类中极为少见,也不同于哺乳动物的泌乳过程。鸽乳主要由蛋白质、脂质、碳水化合物和矿物质等物质组成,其合成与分泌受催乳素、胰岛素和松弛素等多种激素共同调控,通过激活JAK/STAT、PI3K/Akt/TOR、AMPK和Wnt等信号通路,调控相关基因的表达,进而调节嗉囊上皮细胞增殖、变性和营养物质合成、富集等过程。本文综述了鸽乳的组成及其生成调控机制,并与哺乳动物进行了比较,进一步明确了嗉囊产生鸽乳的生理机制及与哺乳动物乳腺泌乳的异同。通过研究鸽乳的组成,可为种鸽营养需要标准制定及人工鸽乳研发提供参考;通过研究鸽乳生成的调控机制,进一步深入挖掘调控泌乳的基因,结合分子标记辅助育种技术,应用于提高种鸽的泌乳能力。     

世界动物卫生组织抗生素耐药性控制策略研究

世界动物卫生组织(OIE)是动物卫生领域的权威国际组织。通过研究OIE相关标准和策略,为我国进一步加强兽用抗生素管理,更好地防治抗生素耐药性风险提供参考意见。     

鸡lncRNA-MSTRG.15568.9及其预测靶基因的表达

试验旨在了解在鸡睾丸中高表达的1个长链非编码RNA （long non-coding RNA,lncRNA）及其预测靶基因的时空表达规律,研究二者在鸡弱精子症中的调控作用。根据弱精子症和正常北京油鸡公鸡睾丸转录组测序筛选到的1个高表达的lncRNA （MSTRG.15568.9）,采用顺式（cis）作用模式预测其潜在靶基因SPAG4（sperm-associated antigen 4）,进一步采用实时荧光定量PCR方法进行表达量分析。分别选择3只0、5、20、30、45、60周龄正常北京油鸡公鸡,检测MSTRG.15568.9与SPAG4基因在不同周龄公鸡睾丸中的表达量差异;选择30周龄3只正常公鸡,采集睾丸、肝脏和脾脏等8个部位组织样品,检测MSTRG.15568.9与SPAG4基因在不同组织间的表达规律;选择45周龄弱精子症公鸡和正常公鸡各3只,对比MSTRG.15568.9与SPAG4基因在睾丸的表达量差异。结果显示,MSTRG.15568.9与SPAG4存在明显的时空表达差异,且二者表达趋势基本一致。在不同周龄的鸡睾丸组织中,MSTRG.15568.9和SPAG4的表达趋势相近,MSTRG.15568.9在20周龄的表达量显著高于0、5、30、45、60周龄（P<0.05）,0和5周龄表达量显著低于20、30、45和60周龄（P<0.05）;SPAG4在45周龄表达量最高,其次是20周龄（P<0.05）。MSTRG.15568.9和SPAG4在睾丸和肝脏中的表达量均显著高于脾脏、肾脏等组织（P<0.05）;在正常睾丸组织中的表达量均显著高于弱精子症睾丸组织（P<0.05）。综上所述,MSTRG.15568.9与SPAG4基因具有较明显的组织表达特异性,且MSTRG.15568.9可能调控SPAG4基因的表达,参与精子发生与精子活力调控;但其具体作用机制需要进一步探索。本研究可为鉴定与鸡弱精子症调节机制相关的功能基因提供参考。     

用户体验视角下高校图书馆图书借阅满意度研究——以长治学院为例

图书借阅是高校图书馆的工作之一,主要满足在校学生的日常阅读需求。文章选取借阅感知、图书感知、读者满意、读者忠诚四个潜在变量构建了借阅满意度模型,利用统计软件SPSS21.0和AMOS21.0对模型进行拟合和评估,最终得到各影响因子对读者满意度的影响效应系数,并提出简化借阅程序;保证馆藏质量;及时了解学生的借阅需求;定期向学生推荐可读性较强的书目等建议以提升图书借阅满意度。