家蚕条件基因打靶技术的建立及应用研究进展

条件基因打靶技术是通过借助位点特异性重组酶和预先引入宿主基因组的重组酶特异识别位点,在宿主特定发育阶段的组织或细胞中实现目标基因时空特异性定点插入、删除、替换和倒位等突变操作的技术。目前条件基因打靶技术已被广泛应用于拟南芥(Arabidopsis thaliana)、水稻(Oryza sativa)、小鼠(Mus musculus)和果蝇(Drosophila melanogaster)等高等真核模式生物的功能基因研究,并逐渐成为转基因动植物研究领域进行基因操作的强有力工具。近年来,国内外多个研究机构系统地开展了家蚕(Bombyx mori)条件基因打靶技术的开发研究,目前已经建立了较为完善的基于多种不同位点特异性重组系统的家蚕条件基因打靶技术平台。本文较为全面地介绍目前最为常用的位点特异性重组系统的组成和作用原理,系统概述基于位点特异性重组系统的家蚕条件基因打靶策略及其应用,并对家蚕条件基因打靶技术存在的主要问题和发展趋势进行讨论。     

江苏省如皋市鸡球虫感染情况的调查分析

采用卵囊形态特征观察与动物回归试验相结合的方法,在如皋市对26个养鸡场的球虫种类及其感染情况进行了调查。结果显示:共查见柔嫩艾美耳球虫、毒害艾美耳球虫、堆型艾美耳球虫、巨型艾美耳球虫、和缓艾美耳球虫和早熟艾美耳球虫等6种球虫,检出率分别为53.8%、15.4%、50.0%、46.2%、26.9%和30.8%,优势种为柔嫩艾美耳球虫、堆型艾美耳球虫和巨型艾美耳球虫。65.4%(17/26)鸡场有球虫感染。球虫均为混合感染,其中混合感染4种球虫的最多,达58.8%(10/17)。在大于65日龄鸡群中地面平养鸡场的球虫感染率(100.0%)显著高于笼养鸡(28.6%)。球虫感染率在小于14日龄鸡群为0(0/4),15~65日龄鸡群为100%(12/12),66日龄以上鸡群为50%(5/10)。调查结果为如皋地区鸡球虫病的防控奠定了基础。     

青蒿素与二甲氧苄啶联合抗鸡球虫的试验研究

为研究青蒿素(ART)与二甲氧苄啶(DVD)联合应用抗鸡球虫的效果,选用75只黄羽肉鸡,分为5个组,除阴性对照组外,ART组、DVD组、ART+DVD组和阳性对照组经嗉囊接种8×10~4个柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊,各组在攻虫前一天用药直至试验结束,观察鸡群发病和死亡情况,记录相对增重率、存活率、卵囊值、病变记分、血便数,计算抗球虫指数(ACI)。血便数结果显示,ART+DVD组高于DVD组,低于ART组和阳性对照组;存活率、病变记分、平均增重等结果显示,ART+DVD组低于DVD组,高于ART组。结果表明,ART单独使用时具有一定的抗球虫效果,但将其与抗菌增效剂联用则不仅能增强抗球虫效果,更可减少DVD的用药量,从而降低了DVD残留的可能性。     

肉桂醛对猪小肠上皮细胞毒性的测定

<正>肉桂醛是一种无色或淡黄色、存在于肉桂皮中的醛类物质,具有持久强烈的香气,难溶于水和甘油,易溶于醇类,长久置于空气中易氧化。近年来,肉桂醛在制药、食品保鲜、香料等方面都有应用[1]。在畜牧业中的应用也逐渐延伸,研究发现,肉桂醛具有较好的抗菌活性,对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、芽孢杆菌、曲霉菌等其他菌群均具有较强的抑制作用[2-5]。因此,以肉桂醛替代抗生素在畜禽生产中应用将成为可能。小肠上皮细胞(IEC)是机体消化、吸收营养物质     

菌株Enterobacter sp.降解除草剂阿特拉津产物测定及降解基因克隆

为解析除草剂阿特拉津的生物降解过程,采用液相色谱与质谱联用技术对菌株Enterobacter sp.降解阿特拉津的产物进行检测,通过PCR扩增技术克隆降解基因,并利用GO功能富集分析对降解基因功能进行检测。在降解产物中先后检测出羟基阿特拉津、氰尿酸和尿素组分,克隆出降解基因L465-RS09425、L465-RS10465、L465-RS12445、L465-RS09100、L465-RS12200和UreA。初步推测菌株Enterobacter sp.在降解基因的作用下,经脱氯、脱烷基、脱氨基、环裂解、脱羧和脲基甲酸水解等过程,将阿特拉津逐步矿化。     

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<正>~~     

水稻恶苗病的发生及防治措施

水稻恶苗病俗称公秧,该病在水稻的各个生长发育时期均可发生。恶苗病发病的主要原因的病原菌寄生或附着在种子上,通过种子带菌传染。携带大量病菌的种子发病比较重,往往不能发芽,或萌发后幼苗很快死亡。发病比较轻的种子发芽后幼苗徒长,比普通植株高出1/3,全株细长,呈黄绿色,并且根系生长发育也受阻,部分病苗在插秧前逐渐死亡。     

土地覆被和气候变化对锡林河流域径流量的影响

土地覆被和气候变化是影响流域水资源宏观调控以及合理规划的两个主要因素,以锡林河流域为研究区,借助锡林浩特及周边4个国家气象站点,通过设定情景模式与SWAT模型相结合的方法分别对其进行了分析研究。通过极端土地利用法对研究区内土地利用/覆被设定不同情景模式,研究了土地利用/覆被变化对径流量的影响,另外采用最新的气候模式CMIP5的两种RCP排放情景RCP4.5和RCP8.5,预测了未来气温、降水、径流的变化情形。结果表明:土地变化对径流量的年际变化影响较弱,但对于汛期径流量影响显著;研究区径流量对气候表现敏感程度非常显著,未来最低、最高气温均表现出增温趋势且未来降水、径流变化趋势基本保持一致,呈增长趋势。     

马泰勒虫AMA1基因的真核表达与鉴定

以GenBank中马泰勒虫(Theileria equi,T.equi)美国WA株基因组序列(XM＿004833042.1)为目标,选取目前公开的所有顶复门原虫泰勒虫属顶膜抗原1(apical membrane antigen 1,AMA1)基因进行本地BLAST比对。针对目的基因片段设计特异性引物后,以T.equi新疆分离株为模板对AMA1目的基因片段进行扩增克隆,并对T.equi AMA1蛋白进行真核表达以及多克隆抗体制备,最后通过间接免疫荧光和Western blot鉴定真核重组蛋白。结果显示,成功扩增出T.equi新疆株AMA1基因,与T.equi美国WA株AMA1基因相比,两者进化关系最为接近,核苷酸和氨基酸同源性分别为76.34%和78.64%。成功在HEK293T细胞中表达AMA1真核重组蛋白,约为55 kDa,将AMA1原核重组蛋白免疫小鼠后,所产生的多克隆抗体效价为1∶819 200。Western blot结果显示,免疫小鼠产生的多克隆抗体可以识别AMA1真核重组蛋白,表明重组蛋白具有较好的抗原性。本试验完成了T.equi AMA1真核重组蛋白的鉴定和多克隆抗体的制...     

耕播机三点悬挂连接机构有效间距确定方法

以分置式一机三用型耕播机为研究对象,设计三点悬挂连接机构.从分置式耕播机连接机构的设计原则出发,分析了单机连接机构的有效间距.从机组纵向稳定性储备利用系数和爬坡稳定性系数分析了耕整联合作业机组的抗倾翻能力,确定连接机构有效尺寸的最大值为41 cm;通过分析旋耕刀的运动状态、土块的被抛位置和初速度,并对其进行计算和试验,确定连接机构有效尺寸的最小值为19 cm.