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研究采用响应面法并以滤纸酶活力(filter paper activity,FPA)作为响应值对转透明颤菌血红蛋白基因的里氏木霉(Trichoderma reesei)Tu6-VHb菌株液体发酵产纤维素酶的发酵条件进行优化。根据单因素试验结果设计P-B试验,筛选出影响Tu6-VHb菌株发酵产酶的3个显著因素:吐温-80含量、发酵液体积(250 mL三角瓶发酵)、氮源浓度。用最陡爬坡路径法逼近最大响应值区域,运用响应面B-B试验设计确定3个显著因素之间的交互作用和最佳发酵条件。结果显示,Tu6-VHb产纤维素酶的最佳发酵条件是:吐温-80含量0.39%,发酵液体积61.32 mL(250 mL三角瓶发酵),氮源浓度0.87%。经优化后,Tu6-VHb菌株发酵产纤维素酶酶活力达51.72 U/mL,与模型预测值51.94 U/mL相近,较优化前该菌株酶活力(39.984 U/mL)提高了29.35%,是未转入透明颤菌血红蛋白基因的里氏木霉(Trichoderma reesei)Tu6菌株酶活力(35.904 U/mL)的1.44倍。 相似文献
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试验旨在探究微生物合成Levan果聚糖的新途径并优化其合成条件。利用转入果聚糖蔗糖转移酶基因的重组谷氨酸棒状杆菌进行全细胞催化合成Levan果聚糖,并采用响应面法以Levan果聚糖产量为响应值优化催化合成条件。首先设计Plackett-Burman试验从7个相关因素(蔗糖浓度、菌体浓度、转化时间、转化pH、PBS中Ca2+和Mg2+浓度、Levan果聚糖提取时的乙醇终浓度)中筛选出影响Levan果聚糖产量的3个主要因素(蔗糖浓度、乙醇终浓度和Ca2+浓度);再用筛选出的3个最重要因素进行最陡爬坡试验逼近最大响应值区域;最后运用BBD响应面法优化确定3个主要因素之间的交互作用和最佳合成条件。结果显示,初始试验中Levan果聚糖平均产量为0.069 g/mL。经过响应面试验优化对利用重组谷氨酸棒状杆菌进行全细胞催化合成Levan果聚糖产量影响最大的因素为蔗糖浓度,其次为提取时的乙醇终浓度,最后是转化液中的Ca2+浓度。当蔗糖浓度为52.71%、乙醇终浓度为85.31%、Ca2+浓度为0.04 g/L时,利用重组谷氨酸棒状杆菌进行全细胞催化合成的Levan果聚糖产量平均值为0.238 g/mL,与模型预测最大值0.233 g/mL相近,转化率约为44%,转化率较初始试验提高了约1.9倍,产量亦较初始试验提高了约3.4倍。研究结果为Levan果聚糖工业化生产提供了依据,并为其在动物医学和营养方面的研究奠定基础。 相似文献
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割手密种质资源的营养价值评价 总被引:1,自引:0,他引:1
测定43 份割手密种质营养期干物质粗脂肪粗蛋白中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维、粗灰分钙和磷等8
个营养指标,以粗蛋白,粗脂肪中性洗涤纤维,酸性洗涤纤维和磷钙作为判断指标,用层次分析法对其营养价值进
行评价,结果表明,营养价值最高的为A49广西,其干物质粗蛋白粗脂肪粗灰分中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维
钙和磷的含量分别为32.35%,7.20%,4.06%,8.07%,75.81%,50.72%,0.23%和0.16%;营养价值最低的为A3(广东)其
干物质粗蛋白粗脂肪粗灰分中性洗涤纤维酸性洗涤纤维钙和磷的含量分别为32.24%,4.62%,0.51%,6.38%,
46.40%,40.02%,0.15%和0.09%,各种质材料间的粗蛋白含量差异显著,最高的A48(9.11%)是最低的A14(3.72%)的
2.4 倍并将43 份种质分为高营养型中等营养型和低营养型3 类旨在为割手密作为饲草应用提供理论依据。 相似文献
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共表达与牛疱疹病毒1型VP22融合的猪繁殖与呼吸综合征病毒E及M蛋白的重组伪狂犬病毒的构建及其免疫原性观察 总被引:4,自引:0,他引:4
为了研制猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)基因工程疫苗,以伪狂犬病毒(PRV)gE基因缺失标志疫苗株TK^-/gE^-/LacZ^+为病毒载体,通过同源重组,构建了共表达与牛疱疹病毒1型VP22(BHV-1 VP22)融合的PRRSV E及M蛋白的重组伪狂犬病毒(rPRV)TK^-/gE^-/VP22E^+/VP22M^+。经PCR、Southern blot、Western blot证实rPRV构建正确,并能表达与BHV-1 VP22融合的PRRSV E及M蛋白。rPRV在IBRS-2、PK-15细胞中的增殖滴度与PRV亲本株相比无显著差异,表明外源基因的插入不影响rPRV增殖。用该rPRV免疫BALB/c小鼠,检测免疫小鼠抗PRRSV中和抗体及脾淋巴细胞增殖反应,并与未融合VP22的单表达PRRSV E蛋白及共表达E及M蛋白的rPRV TK^-/gE^-/E^+与TK^-/gE^-/E^+/M^+进行比较。结果显示TK^-/gE^-/VP22E^+/VP22M^+可诱导小鼠产生更好的体液与细胞免疫反应,BHV-1 VP22发挥了佐剂效应。本研究为研制安全、有效的猪繁殖与呼吸综合征-伪狂犬病二价基因工程疫苗奠定了基础。 相似文献
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猪IL-2与IL-6的原核表达及其对伪狂犬病基因缺失疫苗的佐剂效应研究 总被引:8,自引:0,他引:8
将猪白细胞介素2(pIL-2)与猪白细胞介素6(pIL-6)的cDNA序列克隆到大肠杆菌表达载体pET-28a及pGEX-KG上,转化BL21(DE3)表达菌,经IPTG诱导产生重组蛋白pIL-2与pIL-6,表达量分别占菌株总蛋白的43.45%和28.37%,经提纯后含量可分别达到97.06%和86.37%。将提纯后不同剂量的两种重组蛋白以单独或组合的方式,加入伪狂犬病(Ea株)TK~-/gG~-双基因缺失疫苗中,使每头份疫苗分别含2、5和10μg·ml~(-1)的pIL-2或(和)pIL-6,用此疫苗免疫伪狂犬病抗体阴性猪。同时设试验对照组。初次免疫30d后加强免疫,测定中和抗体,观察试验猪的日增重情况,进行统计分析。发现各试验组的抗体水平均高于不含重组蛋白的基因缺失疫苗组;其中,含2μg·ml~(-1)pIL-2试验组与含10μg·ml~(-1)pIL-2/pIL-6试验组抗体水平和基因缺失疫苗对照组之间呈显著差异(P=0.019)与极显著差异(P=0.009)。结果表明,大肠杆菌表达的pIL-2、pIL-6对伪狂犬病鄂A株基因缺失疫苗(TK~-/gG~-/LacZ~+)有较强的佐剂效应,且呈剂量相关性。不同试验组日增重比较结果表明,免疫效果高低与猪的生长速度呈正相关。本试验为重组pIL-2与pIL-6作为新型疫苗佐剂应用提供了重要的试验依据。 相似文献
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1、检疫犯罪我国《刑法》第413条第1款规定,动植物检疫机关的检疫人员徇私舞弊,伪造检疫结果的,应当以动植物检疫徇私舞弊罪定罪处罚。在实践执行中应注意以下几点:第一,犯罪主体是特殊主体,即动植物检疫机关的检疫人员。第二,犯罪的主观方面必须是出于故意。第三,犯罪的客观方面表现为检疫人员徇私舞弊,伪造检疫结果的行为。第四,根据我国《刑法》第413条的规定,检疫人犯罪的,处5年以下有期徒刑或者拘役;造成严重后果的,处5年以上10年以下有期徒刑。 相似文献
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壳聚糖包衣水稻种子对水稻苗期生长发育的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
以常规水稻品种明恢63和汕优63为研究对象,以不同浓度的脱乙酰度85%的壳聚糖溶液为材料包衣水稻种子,研究包衣后对水稻发芽及苗期生长发育的影响。结果表明,1%的壳聚糖溶液对2个水稻种子发芽率的促进作用最强,包衣处理后,促进了水稻秧苗的根长、株高的生长和干重的积累,提高了植株对氮、磷、钾元素的积累。此外,包衣处理后可提高水稻秧苗的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)的活性和根系活力,水稻叶片中的叶绿素含量、可溶性糖、可溶性蛋白均有提高。可见壳聚糖包衣水稻种子有利于水稻苗期的生长发育。 相似文献
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