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鸡β-防御素在大肠杆菌中的高效表达及复性 总被引:2,自引:0,他引:2
鸡β-防御素(gallinacin-3,Gal3)是鸡体内重要的防御因子,本试验研究了鸡Gal3融合蛋白在大肠杆菌中高效表达的规律,并探索了重组蛋白质的复性工艺.结果表明,加入诱导剂后1h,开始有可检出量的重组蛋白质表达,2h的表达水平已接近最大量;化学诱导剂IPTG 0.2~1.2mol/L对重组蛋白的产量没有明显影响.经Lablmage软件分析,融合蛋白的产量可达菌体总蛋白的35%以上,且主要以包涵体形式存在.将所获包涵体用8mol/L尿素溶解后,分步稀释于含有氧化型谷胱甘肽和还原型谷胱甘肽的复性系统中,重组蛋白得到完全复性.12mg/L复性的重组鸡Gal3能抑制肠炎沙门氏菌的生长,24mg/L能抑制肠致病型大肠杆菌的生长. 相似文献
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为了解Nsp2Δ1882-2241缺失后弱化的高致病性PRRSV(TJM株)对宿主免疫学应答的刺激机理,本研究分析了免疫猪血清中的细胞因子及变化规律。将14头4周龄易感仔猪随机分为3组:第1组接种PRRSV TJM-F92株,为免疫组;第2组接种高致病性PRRSV TJ-F5毒株,为攻毒组;第3组不接种疫苗及病毒,为对照组。接种后28d,用TJ-F5毒株攻击试验猪,于不同时间点采集血样,用ELISA法测定血清中的PRRSV抗体、IL-2、IL-10、IL-12p40、TNF-α、IFN-α和IFN-β水平。结果显示:(1)与对照组和攻毒组相比,免疫组猪IL-12p40水平持续上调,于免疫后28d受PRRSV强毒攻击后,其水平开始缓慢降低,但仍高于攻毒后的对照组。(2)免疫组IL-2水平在接种疫苗后的前21d内无明显升高且低于攻毒组,在受到强毒攻击后其IL-2水平却有明显升高。(3)免疫组IL-10水平与对照组无明显差别,并在免疫14d后一直显著低于攻毒组(P〈0.01)。(4)免疫组接种疫苗后的前21d内,TNF-α水平保持稳定,28d明显上调。攻毒组TNF-α水平0~28d一直低于对照组,且在21d达到最低(P〈0.01)。免疫组在28d受强毒攻击后,其TNF-α水平下降且在攻毒7d时最为明显(P〈0.01),此后恢复到正常水平。(5)免疫组免疫后28d时IFN-α水平升高,在受到强毒攻击后再次显著降低(P〈0.01)。免疫组IFN-β水平一直低于对照组和攻毒组,不因强毒攻击而变化。以上结果提示,IL-12上调在PRRSV免疫保护中起明显作用;另外,上调TNF-α及下调IL-10都是基因缺失疫苗发挥效力的潜在机制。 相似文献
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通过对1991-2017年乐亭县气象观测资料温度、降水的统计分析,研究气象条件与海参养殖的关系,特别是高温、暴雨等灾害性天气对海参养殖的影响。目的在于为渔民安全健康养殖海参提供科学气象依据,促进海参养殖的可持续发展。结果表明:乐亭县4-5月、9-10月温度、降水条件均适宜池塘海参生长。3月、6月有部分日期温度是适合的,7-8月气温较高不适宜海参生长,处于夏眠期;1-2月、12月气温较低不适合海参生长,处于冬眠期。乐亭7-8月降水量较大,一年中春季和秋季是海参生长的两个旺季;夏季和冬季是池塘海参养殖的夏眠期和冬眠期。 相似文献
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郁茏富得快是由复合微生物菌、内源起动酶、内源生长酶、膨大酶、活性酶组成的复合微生物酶制剂,富含腐殖酸、氨基酸、钙、镁、铁、铜、锌、锰、硼等多种中微量元素。为验证施用此肥料对棉花生育性状及产量的影响,特在133团设置该肥料在棉花上的肥效对比试验,以供棉农参考。 相似文献
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不同有机肥配施沼液对葡萄产量和品质的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
[目的]通过田间试验研究不同有机肥与沼液配施对土壤养分、葡萄植株养分吸收以及葡萄产量和品质的影响,为葡萄园有机肥的合理施用提供科学依据.[方法]试验设置猪粪、牛粪、猪粪(基施)+沼液(追施)、牛粪(基施)+沼液(追施)四个有机肥处理(分别以PM、CM、PM+ BS、CM+ BS表示);同时,以传统施肥为对照(CK).[结果]不同有机肥均可显著增加0~ 40 cm土壤有机质含量,较对照增加14.8;~57.0;.其中,施牛粪处理土壤有机质最高,其次猪粪和牛粪配施沼液,猪粪配施沼液最低.有机肥可显著提高葡萄生长后期的土壤有效养分和葡萄植株氮磷含量.牛粪以及牛粪配施沼液处理较对照增产20.5;和36.3;,但葡萄可滴定酸含量增加,VC含量和糖酸比降低.猪粪以及猪粪配施沼液与对照产量差异不显著,但施用猪粪可显著增加葡萄果粒重,提高含糖量和糖酸比.[结论]不同有机肥对葡萄产量和品质的影响差异很大,应充分考虑不同有机肥的特性合理施用. 相似文献
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根据GenBank中猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲株2b基因序列,设计合成了1对特异性引物,经RT-PCR从PRRSV中扩增出222 bp的片段,并克隆至pMD18-T,连接到pGEX-4T-1表达载体,将阳性重组质粒pGEX-4T-2b转化到BL21(DE3),对诱导后的表达产物进行SDS-PAGE电泳和Western blotting分析,所得重组蛋白的分子质量大小为35 ku,与预期结果相同,且具有良好的免疫学活性。 相似文献
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多重PCR/RT—PCR技术检测PRRSV、PPV、PRV和PCV-2 总被引:1,自引:1,他引:1
根椐GenBank中已发表的猪蓝耳病毒(PRRSV)、猪细小病毒(PPV)、伪狂犬病毒(PRV)和猪圆环病毒Ⅱ型(PCV-2)等4种病毒基因序列,对各病毒基因区进行同源性分析,确定PRRSV M和N、PPV VP2、PRV gD、PCV-2ORF2基因的保守区为各病毒的诊断靶序列.在建立各病毒单项PCR技术的基础上,优化多重PCR反应条件,建立了4种病毒的四重PCR技术,可同时扩增PRRSV的660 bp(北美株),PPV的313 bp,PRV的217 bp,PCV-2的447 bp的特异性片段.用82份临床病料对本研究多重PCR技术和单项PCR/RT-PCR技术进行对比验证,结果显示,两者的总符合率为93%以上.表明建立的多重PCR检测方法,具有特异、快速、准确的特点,可用于对这4种病毒的同时检测和鉴别诊断. 相似文献