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本研究旨在对猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)N基因进行克隆构建、表达与其B细胞抗原表位性质的预测。将PEDV的N基因进行PCR扩增,克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,经酶切验证获得阳性克隆,将阳性克隆在表达菌E. coli BL21(DE3)中表达。通过对表达条件及纯化条件的优化,获得高纯度表达蛋白。利用生物信息同源模型化软件Swiss-Pdb Viewer建立PEDV-N蛋白的3D结构,并根据生物信息学软件DNA-Star预测PEDV-N蛋白的二级结构、抗原性、亲水性和表面可及性分析,综合分析预测其B细胞抗原表位。经预测PEDV-N蛋白氨基酸序列中存在13个B细胞优势抗原表位区域。研究结果将进一步为PEDV-N蛋白体外表达产物的应用及研制基因工程疫苗提供理论基础。 相似文献
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为建立天祝白牦牛肌肉、胚胎、肾脏、耳、肝脏等5种组织成纤维细胞体外制备、分离、培养成纤维细胞的方法,采用组织块法和酶消化法制备这5种组织成纤维细胞。结果显示:用组织块法成功制备了耳组织成纤维细胞,组织块直径较小的成活率较高且生长速度较快。用消化法成功制备5种组织成纤维细胞,复苏后较冻存前细胞存活率有所下降,但均保持在90%以上,复苏后细胞的存活率:胚胎>耳>肌肉>肾脏>肝脏。5种组织成纤维细胞在离体培养条件下的生长曲线均呈"S"型,生长速度:肌肉>胚胎>肾脏>耳>肝脏。结果表明:用消化法成功地从天祝白牦牛5种组织中体外制备、分离和培养了成纤维细胞,用组织块法成功地体外制备了耳组织成纤维细胞。 相似文献
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随着我国禽类养殖业的发展,鸡血年产量日益增加,但是利用率却迟迟不增,大多鸡血以废物的形式排放到周围环境中。为了减少浪费和控制环境污染,同时提高鸡血的利用率,通过阐述鸡血清成分分析、鸡血清蛋白的分离纯化和鸡血清在饲料工业、医药工业等方面的开发与利用,以鸡血清研究为重点对鸡血利用进行综述。 相似文献
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本研究旨在探讨西北民族大学榆中校区8种草本科植物根际放线菌的产酶特性,以筛选功能酶产生菌,为后续研究提供参考菌种。采用含有75μg·mL~(-1)重铬酸钾和2μg·mL~(-1)青霉素的甘油精氨酸琼脂培养基,并对土样做了120℃、1 h的加热预处理,利用稀释平板涂布法对8种草本科植物根系土壤样品进行分离。之后利用7种筛选培养基对所得菌株进行定性检测,以期获得产功能酶菌株。从西北民族大学榆中校区8种草本科植物根际土壤样品中获得18株放线菌,功能酶筛选结果表明,有2株菌产H2S,18株放线菌在糖代谢过程中均无有机酸产生;9株放线菌产淀粉酶,16株产蛋白酶,16株产脲酶,18株产过氧化氢酶,12株产聚氧乙烯失水山梨醇单月桂酸酯酶,14株产聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯酶,7株产聚氧乙烯山梨醇酐单油酸酯酶,1株产色氨酸酶,3株产纤维素酶。西北民族大学榆中校区草本科植物根际放线菌产酶特性良好,是淀粉酶、蛋白酶、酯酶等酶的重要来源。 相似文献
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采用中性蛋白酶水解泥鳅蛋白制备抗氧化肽,以DPPH自由基清除能力为指标,用木瓜白酶对泥鳅蛋白抗氧化肽进行Plastein反应修饰研究。通过单因素试验研究了外源氨基酸种类、pH值、时间、E/S、温度和外源氨基酸的添加量对泥鳅蛋白抗氧化肽Plastein反应修饰的影响,在此基础上采用响应面法对泥鳅蛋白抗氧化肽Plastein反应修饰工艺进行了优化。结果表明,泥鳅蛋白抗氧化肽Plastein反应修饰的最佳条件为:底物浓度40%、组氨酸添加量为0.5 mmol·g-1、E/S为1 782.49 U·g-1 、pH值9.0、温度35 ℃、时间3 h,此条件下制备的Plastein反应修饰产物的抗氧化活性是修饰前的1.99倍,其对DPPH自由基的清除率为(77.98±0.08)%。 相似文献
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