圆叶葡萄产期调节技术研究

葡萄产期调节技术不仅能增加葡萄的产量,还能通过延长葡萄的销售期,使其错过采摘过于集中的时期从而提高销售价。本实验通过对5个圆叶葡萄进行产期调节,在生长期喷施不同浓度的矮壮素、是否抹除幼果和枝条修剪部位等三个方面开展研究,初步掌握了格威尔、弗雷尔、阿拉紫、诺贝尔和卡洛斯的产期调节技术。     

葡萄霜霉菌糖基水解酶基因家族的生物信息学分析

【目的】分析预测葡萄霜霉菌糖基水解酶（Glycoside hydrolases,GHs）基因家族,为深入研究GHs基因在葡萄霜霉菌致病过程中的作用机理提供理论依据。【方法】利用SignalP 5.0 Server、Cluster W、MEGA 6.0和MEME等生物信息学相关软件对已发表的葡萄霜霉菌全基因组60个GHs基因的基本特征、基因组分布特点及其编码蛋白保守基序、结构域和亚细胞定位等进行生物信息学分析。【结果】葡萄霜霉菌60个GHs基因编码的蛋白长度在128~774 aa,且大部分集中在200~500 aa,其中53个蛋白具有信号肽,蛋白质分子量在14.90~85.45 kD,理论等电点（pI）在3.85~10.39;这些基因在基因组中分布不均匀,其中有27个GHs基因存在串联重复和成簇聚集分布现象,数目最多的3个GHs家族（GH131、GH17和GH6）集中分布在7个scaffold中;序列比对和系统发育进化树分析发现,串联重复和成簇聚集分布的GHs基因处于同一个分支中;motif富集分析发现3个不同的motif,且motif2在葡萄霜霉菌GH6、GH17和GH131等3个家族基因中保守,结构域分析推测大部分GHs家族基因均参与细胞壁的生物过程;亚细胞定位预测结果表明,有53个GHs蛋白定位于细胞外,3个定位在细胞质内,4个定位于线粒体上。【结论】葡萄霜霉菌在侵染寄主的过程中可能会分泌多种GHs酶类来破坏细胞壁的结构,以帮助其在寄主植物中成功定殖。     

霜霉菌侵染后葡萄叶片酵母双杂交cDNA文库构建

[目的]构建霜霉菌侵染后葡萄叶片的酵母双杂交cDNA文库,筛选致病因子在寄主葡萄体内的互作靶标,为葡萄霜霉病菌致病的分子机理研究提供材料基础.[方法]以一年生欧亚种葡萄西拉盆栽苗为试验材料,提取并等量混合霜霉菌侵染后0、12、18、24和36 h的葡萄叶片总RNA,利用基于Gateway技术的CloneMiner II cDNA文库构建试剂盒:首先将cDNA与pDONR222载体进行BP重组反应连接,连接产物转化大肠杆菌DH10B感受态细胞构建初级文库;然后初级文库质粒与pGADT7-DEST载体通过LR重组反应,重组反应产物转化大肠杆菌DH10B感受态细胞构建次级文库;再随机挑取次级文库转化Y187酵母菌株构建酵母双杂交cDNA文库;最后利用ImageJ软件和PCR反应分别统计库容量和鉴定重组率.[结果]构建的初级文库库容量为4.6×107 CFU,次级文库库容量为2.7×107 CFU,均达到构建cDNA文库的标准.酵母双杂交cDNA文库的插入片段主要集中在1000~2000 bp,且具有很好的多态性,文库质量较高.[结论]构建的霜霉菌诱导葡萄叶片酵母双杂交cDNA文库符合酵母双杂交筛选要求,可用于筛选霜霉菌致病效应蛋白在寄主体内的靶标及霜霉菌侵染寄主葡萄早期抑制寄主免疫过程中的致病机理研究.     

查尔酮合成酶在植物抗病中的研究进展

查尔酮合成酶(chalcone synthetase, CHS)是植物体内类黄酮合成途径中的关键酶,为类黄酮的合成提供了基本骨架。类黄酮不仅在逆境的抵抗、抗病害和信号传导方面扮演重要角色,在临床上还具有防癌、抗氧化、抗疟疾和抗动脉硬化等功能。本研究围绕查尔酮合成酶的结构和定位、基因结构、翻译后调控和抗病机制等几个方面,对查尔酮合成酶在植物抗病中的研究进行综述,为进一步研究查尔酮合成酶的分子调控机制和分子抗病育种提供一定的参考。     

查尔酮合成酶基因在葡萄抗灰霉病和霜霉病中的作用

[目的]克隆不同抗性葡萄品种中查尔酮合成酶(chalcone synthase)基因CHS1,明确该基因在葡萄灰霉病菌(Botrytis cinerea)和葡萄霜霉病菌(Plasmopara viticola)侵染下的表达模式,并对CHS1进行亚细胞定位和功能验证,为探究CHS1的广谱抗病作用机理提供依据.[方法]分别...     

6个葡萄品种一年两收技术的研究

葡萄一年两收技术不仅能增加葡萄产量,还能通过延长葡萄的销售期,错过采摘过于集中的时期从而提高售价。本试验采用夏果采收后利用破眠技术使休眠芽在当年夏季又萌芽开花结冬果的一年两收技术,对6个鲜食葡萄品种进行了连续两年的二茬果试验,从采后药剂处理、药剂+叶面肥处理、修剪节位等3个方面开展研究,初步掌握了无核早红、红标无核、金手指、黑峰、贵妃玫瑰和温克在广西南宁地区的一年两收技术。     

一年两收技术在不同葡萄品种上的应用表现

葡萄一年两收技术不仅能增加葡萄产量,还能通过延长葡萄的销售期,使其错过采摘过于集中的时期从而提高销售价。本实验采用夏果采收后利用破眠技术使休眠芽在当年夏季又萌芽开花结冬果的一年两收技术,对6个鲜食葡萄品种进行了连续两年的二茬果实验,从采后药剂处理、药剂加叶面肥处理、修剪节位等三个方面开展研究,初步掌握了无核早红、红标无核、金手指、黑峰、贵妃玫瑰和温克在广西南宁地区的一年两收技术。     

圆叶葡萄‘Noble’和欧亚种葡萄‘赤霞珠’叶片提取物对葡萄霜霉病的防治作用

为了明确不同抗性葡萄的叶片提取物对霜霉病的防治作用,以对葡萄霜霉病完全免疫的圆叶葡萄‘Noble’、感病欧亚种‘赤霞珠’的新、老叶片提取物为试材,设置不同的浓度梯度,检测其对孢子囊和游动孢子萌发的影响,同时测定其对霜霉病的室内防治作用。结果表明,两种葡萄叶片提取物对霜霉病菌的孢子囊和游动孢子的萌发均具有显著的抑制效果。叶片提取物浓度从10到50mg/mL增加时,孢子囊的萌发率显著低于对照组,且随着浓度的升高而显著下降。实验组游动孢子的萌发率显著低于对照组,同一品种中不同浓度的叶片提取物之间无显著差异,不同品种的提取物之间也是如此,但老叶提取物处理后的萌发率显著低于新叶。新、老叶片提取物浓度为10、25和50mg/mL时,浓度为10mg/mL的‘赤霞珠’老叶的防治效果为 95.0%,其余处理均为 100.0%,能显著提高室内防治效果。本实验表明‘Noble’和‘赤霞珠’叶片提取物均能显著降低霜霉菌孢子囊和游动孢子的萌发率,室内防治效果显著。     

植物病原卵菌效应蛋白RXLR和CRN研究进展

卵菌是一类可以侵染动植物以及微生物的病原菌.植物病原卵菌会导致很多农作物、经济作物产生病害,造成巨大的经济损失.效应蛋白在植物病原卵菌侵染寄主的过程中发挥关键作用.本文概述病原卵菌分泌的效应蛋白RXLR和CRN的挖掘方法、转运机制以及靶标蛋白筛选的最新研究进展.这些信息可为深入揭示效应蛋白RXLR和CRN的致病机理和与...     

葡萄霜霉菌糖基水解酶基因的表达模式与功能分析

【目的】克隆葡萄霜霉菌（Plasmopara viticola）糖基水解酶（glycosyl hydrolase,GH）基因（PvGH）,分析其特征以及在葡萄霜霉菌侵染葡萄叶片过程中的表达模式,研究其抑制/促进烟草叶片程序性细胞死亡（PCD）以及影响烟草疫霉（Phytophthora nicotianae）侵染的能力,为深入探究调控寄主植物免疫的机制提供理论依据。【方法】以葡萄霜霉菌Pv5-27菌株作为试材,采用RT-PCR方法扩增获得8个PvGH基因全长,并对其基因及编码蛋白进行生物信息学分析;利用酵母信号肽诱捕系统（SST）验证PvGH的分泌活性;利用实时荧光定量PCR技术检测葡萄霜霉菌侵染葡萄叶片过程中PvGH的表达模式;同时利用农杆菌介导的PVX病毒表达系统在本氏烟上瞬时表达PvGH效应蛋白,分析其对INF1和BAX触发的烟草PCD的抑制能力以及促进烟草疫霉侵染的能力。【结果】8个PvGH基因序列与通过全基因组预测的序列完全一致,长度为1 092—1 392 bp,分别编码364—464个氨基酸,与其他卵菌同源蛋白相似性高达60.62%—86.36%。8个PvGH均不含跨膜结构...