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H5亚型禽流感病毒HA基因在重组杆状病毒中的表达及检测 总被引:6,自引:3,他引:6
利用杆状病毒表达系统对H5亚型禽流感病毒HA基因在sf9细胞中的表达进行了研究。首先将pUCm—T—H5HA质粒用BamHⅠ及NotⅠ酶切,获得HA基因片段,同时杆状病毒转座载体质粒pFastBacⅠ也用BamHⅠ及NotⅠ酶切,然后用T4DNA连接酶连接,构建了重组质粒pFastBac—H5HA。再将该重组质粒转化DH10Bac感受态细菌,在体内进行重组,并经三重抗性与蓝白斑筛选,得到杆状病毒重组质粒Bacmid—H5HA。将Bacmid—H5HA转染sf9细胞,获得重组杆状病毒,经SDS—PAGE和Western blotting检测表明,HA蛋白在重组杆状病毒中获得表达。 相似文献
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为了探讨黄芪多糖注射液对铅镉联合致鸡脾脏细胞凋亡的拮抗作用。采用TUNEL法、RT-PCR和DNA ladder方法检测分别对对照组、铅镉组和黄芪多糖-铅镉组的鸡脾细胞凋亡率和脾淋巴细胞凋亡基因Bcl-2 mRNA转录水平。结果表明:与对照组比较,试验组的细胞凋亡率明显升高,Bcl-2mRNA表达水平降低;试验组和对照组差异显著或差异极显著,并且黄芪多糖-铅镉组数据介于对照组和铅镉组之间。试验结果显示:黄芪多糖注射液对铅镉联合致鸡脏脾细胞凋亡具有明显的拮抗作用。 相似文献
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介绍了一例苏格兰牧羊犬脾脏破裂临床检查、诊断及治疗,提出在术后的护理时,除去常规护理外,应该认识到由于脾脏摘除可能导致出现贫血症状,因此,在术后要及时补充营养。 相似文献
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从中草药的特点、分类以及应用几个方面论述了中草药在饲料添加剂中的应用现状,并指出了目前中草药添加剂产品中的缺点,为进一步研究中草药添加剂提供了参考依据。 相似文献
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摘 要:为了研究含有跨膜结构域TAT基因的重组奶牛神经肽Y融合蛋白的生物学活性。利用基因工程技术,在牛神经肽Y基因序列中插入TAT蛋白基因序列,构建原核表达载体pGEX-3X-NPY-PTD,导入到BL21宿主菌中,进行表达,对表达产物进行鉴定、表达条件优化和纯化。并且经过活性检测,融合蛋白对鸡胚血管生成的促进作用,表明含有PTD结构的重组奶牛神经肽Y具有生物功能活性,为动物试验奠定了基础。为了获得重组TAT-NPY融合蛋白,并研究其生物学活性。利用基因工程技术,从犊牛下丘脑组织中克隆得到神经肽Y基因序列,通过基因比对符合率为100%。同时,在牛神经肽Y基因序列中插入TAT蛋白基因序列,构建原核表达载体pGEX-3X-NPY-PTD,导入到BL21宿主菌中,进行原核表达,并对表达产物进行鉴定、表达条件优化和纯化。并且经过活性检测,融合蛋白对鸡胚血管生成起促进作用。表明含有PTD结构的重组奶牛神经肽Y具有生物功能活性,为下一步的研究提供了物质基础。 相似文献