金针菇生物降解与染料脱色作用研究

为了解金针菇对染料的降解作用机制,研究测定了金针菇发酵液木质素降解酶系酶活,探究不同处理发酵液对3种化合染料的脱色影响。结果表明,液体培养条件下,化合染料的降解既可通过金针菇发酵液中的菌丝吸附,又能利用其分泌的木质素降解酶系转化。对化合染料起转化作用的并不是漆酶,而以菌体吸附为主,菌体对不同化合染料的吸附有一定选择性;已灭活的菌体与未灭活的菌体对染料的吸附效果也不同,表明温度可以改变菌体表面结构,使其更易吸附溶液中的染料。该研究对当前染料的处理具有重要应用价值。     

红色荧光蛋白基因银耳表达载体的构建及表达鉴定

以pET-28a-RFP质粒为模板,PCR扩增红色荧光蛋白(red fluorescent protein,RFP)基因,并克隆到真核表达载体pTE11上,置于RP27启动子调控之下,成功构建表达载体pTE11-RFP。采用PEG介导转化法,将pTE11-RFP转入银耳芽孢中。提取转化子基因组DNA,RFP基因特异性引物扩增获得与目的基因大小一致的特异条带;日光下肉眼观察转化子略显红色,荧光显微镜观察有明显的红色荧光。以上结果证明RFP基因已成功转入银耳芽孢并进行表达,RP27启动子可以调控外源基因RFP在银耳芽孢中的正确表达,为进一步研究外源基因在银耳芽孢生物反应器中的高效表达奠定了一定的基础。