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应用SYBR Green I的Real-time PCR方法定量检测空肠弯曲杆菌 总被引:2,自引:0,他引:2
空肠弯曲杆菌(Campylobacterjejuni)被认为是人类主要食源性病原菌之一。由于空肠弯曲杆菌特殊的生长条件和容易进入不可培养但存活的状态(Viablebutnonculturable,VNC),所以传统的生化鉴定结果不一定可靠,并且是一项费时而繁琐的工作。核酸检测方法的出现为空肠弯曲杆菌的检测带来了方便。本文基于LightCycler为平台,利用SYBRGreenI染料能特异与双链DNA结合而发荧光的特性,建立一种Real-timePCR方法来定量检测空肠弯曲杆菌。用该方法检测时,发现所有空肠弯曲杆菌(11株)都呈阳性,所有其它弯曲菌(3株)和其它菌株(5株)都是阴性。整个检测过程60min内可以完成,检测限度为5CFU,标准曲线的相关系数为1。结果表明基于SYBRGreenI的定量PCR方法既为空肠弯曲杆菌提供了一种特异、敏感、快速和简洁的定量检测方法,又为研究空肠弯曲杆菌致病机理提供了一种重要方法。 相似文献
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温度、培养基成分和渗透势对新疆雪莲种子萌发的影响 总被引:1,自引:1,他引:0
以新疆雪莲为研究对象,探讨了温度、培养基成分和渗透势对其种子萌发的影响,差异显著性分析结果表明:温度、培养基成分和渗透势显著影响新疆雪莲种子的萌发,其中温度对新疆雪莲种子萌发影响极显著(p<0.001),20/10℃变温条件下种子萌发率最高;渗透势和培养基成分对新疆雪莲种子萌发影响显著(p<0.05),种子萌发的最适培养基为1/2 MS0.PEG模拟水分胁迫研究表明:PEG高于-0.9 MPa时,种子不能萌发.回归分析表明:温度和渗透势与新疆雪莲种子萌发率之间显著相关.而培养基成分与其萌发率之间相关不显著. 相似文献
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单增李斯特菌是一种重要的人畜共患食源性致病菌,如何有效控制食品(尤其是即食食品)中的单增李斯特菌,是食品安全的重要任务,其中快速、准确的检测技术是关键因素之一.作者对单增李斯特菌的传统检测法、免疫学检测法和分子生物学检测法进行综述,并对目前国内单增李斯特菌检测过程中所存在的问题进行探讨,以期为今后的研究提供参考. 相似文献
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根据克罗诺杆菌(Cronobacter spp.)16S rRNA基因以及局部大分子合成(MMS)操纵子特异序列设计2对引物,经反应体系和条件优化,建立了双重PCR检测方法。特异性检测结果显示,Cronobacter spp.菌株PCR扩增均可见2条特异性条带,而其他菌株PCR扩增均为阴性。纯菌检测双重PCR的灵敏度为6.3×103 CFU.mL-1,而相对应单重PCR的灵敏度分别为6.3×101 CFU.mL-1和6.3×103 CFU.mL-1;人工污染的食品样品(奶粉、牛奶、鸡肉)在经过24 h增菌后,检测限均可达100 CFU.mL-1或100 CFU.g-1。在鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium)存在的条件下,双重PCR的检测限没有受到影响。表明本试验建立的双重PCR检测方法具有很好的特异性和灵敏度,能克服食品样品基质及杂菌的干扰,可应用于食品中Cronobacter spp.的检测。 相似文献
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从猪外周血淋巴细胞中克隆猪CD40L基因,构建表达载体pET-CD40L,转化大肠杆菌BL21(DE),表达获得相对分子质量约为48x103的重组融合蛋白.以纯化的重组蛋白免疫新西兰兔,获得抗猪CD40L的特异性抗体.间接ELISA检测到多克隆抗体效价达到1:12 800,Western-blot检测结果表明,得到的抗体既可与纯化的CD40L蛋白特异性结合,又可与表达猪CD40L的重组杆状病毒特异性结合. 相似文献
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以新疆雪莲叶片、叶柄和根为试验材料,研究了MS基本培养基附加不同质量浓度的植物激素对新疆雪莲愈伤组织诱导的影响。结果表明:单因素诱导中,NAA的诱导效果显著优于其它激素;以NAA为诱导激素,叶片与根,叶柄与根之间的诱导率存在极显著性差异,诱导效果:根>叶柄>叶片,最高诱导率分别为100%、98%、44%;NAA与6-BA激素组合对3种外植体愈伤组织的诱导中,叶片与叶柄诱导率之间存在极显著性差异,叶片、叶柄与根的诱导率之间存在显著性差异,诱导效果:叶片>叶柄>根,最高诱导率分别为98%、64%、23%。 相似文献