过表达ZmIBH1-1提高玉米苗期抗旱性

【目的】干旱是严重影响玉米生长发育进程的一个重要因素。挖掘玉米抗旱相关基因,通过转基因功能验证和转录组分析,解析关键基因在响应干旱胁迫过程中的分子调控机制,为抗旱分子育种和遗传改良提供理论依据。【方法】以玉米自交系B104（WT）为背景材料,利用农杆菌介导方法构建过表达ZmIBH1-1转基因株系（ZmIBH1-1-OE）;通过对转基因植株进行草铵膦抗性筛选、标记基因和目的基因PCR检测,以及运用实时荧光定量PCR检测目的基因的表达情况,鉴定阳性植株和株系;以WT和ZmIBH1-1-OE转基因株系为材料,通过干旱处理（20% PEG6000）,进行表型鉴定和耐旱生理生化指标测定,验证ZmIBH1-1的抗旱功能;通过对干旱胁迫下玉米4叶期转录组的比较分析,鉴定出差异表达的基因（differentially expressed genes,DEGs）;结合DAP-seq（DNA affinity purification sequencing）分析,初步确定ZmIBH1-1蛋白直接调控与抗旱相关的下游靶基因,利用基因组可视化软件IGV（integrative genomics viewer）分析ZmIBH1-1蛋白结合候选靶基因的位置,然后通过Dual-Luciferase试验验证ZmIBH1-1蛋白与靶基因的调控关系。【结果】通过玉米遗传转化获得12个转化事件;T₃代中,能同时检测到标记基因Bar和目的基因ZmIBH1-1的植株有458个,实时荧光定量PCR检测结果表明,ZmIBH1-1-OE中ZmIBH1-1的表达量显著高于WT,株系3和株系8表达量最高,将其自交获得T₄代转基因株系用于后续试验。在干旱胁迫条件下,ZmIBH1-1-OE株系存活率、叶片相对含水量、叶绿素含量、可溶性蛋白含量及其生理生化指标（超氧化物歧化酶、过氧化物酶、过氧化氢酶活性）均显著高于WT,说明玉米中过量表达ZmIBH1-1赋予玉米更高的耐旱性。转录组分析结果表明,WT与ZmIBH1-1-OE株系在干旱胁迫下有1 214个差异表达基因;Gene Ontology（GO）功能富集分析结果表明,差异表达基因主要涉及生物过程、细胞组分和分子功能,如在生物过程中主要涉及到光合作用、应激响应、脱水响应等;KEGG富集分析表明,差异表达基因主要参与植物激素信号传导、新陈代谢等过程。结合转录组显著差异表达基因和DAP-Seq分析所得到ZmIBH1-1蛋白的靶基因,初步确定ZmIBH1-1蛋白直接调控与抗旱相关的11个候选靶基因,包括2个钙信号相关基因、3个半胱氨酸代谢相关基因、1个bHLH转录因子、1个应激响应蛋白、1个谷胱甘肽转移酶、1个氧化还原过程蛋白和2个乙烯响应因子;基因组可视化结果显示ZmIBH1-1蛋白可以结合靶基因启动子区;随后通过Dual-Luciferase试验进一步表明,ZmIBH1-1蛋白可以直接作用于11个候选靶基因,其中,ZmIBH1-1蛋白可以促进ZmCa-M、ZmSYCO、ZmbHLH54、ZmGlu-r1、ZmCLPB3和ZmP450-99A2的表达,抑制ZmAGD12、ZmCYS、ZmCYSB、ZmERF-107和ZmEIN3的表达。此外,在干旱胁迫下NAC、WRKY、MYB等转录因子在ZmIBH1-1-OE和WT株系中也存在差异表达。【结论】ZmIBH1-1的过表达可以增强玉米苗期的耐旱性;ZmIBH1-1蛋白通过直接调控乙烯信号通路中的ZmERF-107和ZmEIN3的表达提高玉米的耐旱性;ZmIBH1-1蛋白通过直接调控钙信号相关基因ZmCa-M和ZmAGD12增强玉米的耐旱性;ZmIBH1-1蛋白可能通过间接调控NAC、WRKY、MYB等转录因子响应干旱胁迫。     

农民增收问题的分析和思考

近年来我国经济不断和发展,农村的收入也不断的提高,但有些边远地区的发展还很落后,存在基础不好,虽然有所增长,但是与整体经济的发展相比还很落后,还达不到现代社会发展的步伐,分析问题所在,找出主要原因,提出解决办法,为增加农民收入献计献策。     

母牛胎衣不下的原因及防治

胎衣也就是胎盘,在母牛产犊后,胎盘没有在正常生理时限内排出,即为胎盘停滞或胎衣不下。在正常情况下胎衣在产后3～5h内排出,个别的在10h左右。如超出12h胎盘未排出,就会开始腐败,子宫内膜将发炎,这不但影响产奶量,还会造成母牛难孕。胎衣不下在有些地区一直在30%左右,个别牧场高达80%。这严重影响了养牛业的正常发展。1胎衣不下的原因1.1饲料的不全价母牛在妊娠期营养不均衡,特别是在缺少维生素和矿物质时胎衣不下病例明显增加,原因是营养不足影响胎盘的成熟,使之不易从宫阜上脱落。另外也使子宫正常功能失调,所以胎衣不能正常排出来。1.2…     

应用聚类法确定土壤钾的亏缺临界值研究

通过对２０个肥力不同土壤样品的测试分析及盆栽试验，得到２０个土壤的钾含量及相对于最佳处理（ＯＰＴ）的百分产量。并就此两项指标，首次应用模糊聚类分析方法，求出土壤钾的亏缺临界值为７０．６μｇ／ｍｌ。     

红松与色赤杨混交林改土效果显著

红松阔叶混交林是长白植物区系顶级群落，由于长期受到人为采伐等非自然因素的干扰，现存量极少，代之形成了大面积红松、落叶松纯林和生产力低下的杂木林。红松人工纯林由于树种单一，导致林分的土壤肥力逐年下降。近年来，通过营造阔叶红松混交林、人工诱导阔叶红松林等措施，培育了大面积红松阔叶混交林，其中色赤杨与红松混交林是较为成功的一种混交林分，现将草河口地区红松与色赤杨混交林改土效果总结如下。     

拖拉机维护保养及常见故障的排除

拖拉机是大家非常熟悉的农用机械,我国也是拖拉机的使用大国.然而近几年来.拖拉机使用故障频繁发生,严重影响了拖拉机的寿命,阻碍了农村经济的发展为使拖拉机经常处于良好的技术状态,必须设法防止和减少故障的发生.除坚持按照使用说明书的规定维护保养外,在农闲时期的保养与维护也是预防拖拉机发生故障的重要措施之一.     

绒山羊传染性胸膜肺炎的诊疗

我市某绒山羊场 ,年初以来发生以咳嗽、呼吸困难、体温升高为主要临床症状的羊病。 2 0 0 1年 8月1 3日畜主带病羊来我站就诊。经流行病学调查、临床检验、剖检、组织学检查及细菌学检验 ,确诊为山羊传染性胸膜肺炎。报告如下。1　饲养管理情况　该场共饲养绒山羊 366只 ,其中种羊 30 7只 ,3～ 7月龄新产羔 5 9只 ,1月前全群用左旋咪唑注射液驱虫。以放牧为主 ,牧草以路边杂草及杨树、榆树叶为主 ,寒冬时节舍饲 ,投入一定量干草。圈舍向阳 ,面积 6m× 2 8m,有专用分娩舍 ,供水充足 ,交通方便。2　流行及发病情况　年初发现 4只种羊咳嗽、发…     

肉羊肥羔的饲养技术

羔羊肉指生后 1岁内 ,完全是乳齿的羊屠宰后的肉称羔羊肉。羔羊肉中有一种专称为肥羔羊肉 ,系指在 30日龄～ 60日龄断乳 ,然后马上转入育肥 ,在 4～ 6月龄 ,体重大约 32～ 35 kg进行屠宰所得的羔羊肉。这种羊肉纤维柔软 ,细嫩多汁 ,脂肪适量 ,营养丰富 ,味道鲜美 ,易消化 ,目前在国际市场上畅销 ,价格比大羊肉高 30 %～ 5 0 %。1　肥羔羊肉生产的有利因素羔羊肉所含瘦肉多 ,脂肪少 ,胆固醇含量低 ,肉质鲜嫩多汁 ,膻味小 ,易被人体消化吸收。羔羊生长发育快 ,从生后到 2月龄日增重可达1 80～ 2 30 g,2～ 1 0月龄日增重可达 1 0 0～ 1 5 0 g,…