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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒双重液相基因芯片检测方法的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
为了实现快速检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)并同步鉴别高致病性PRRSV毒株(HPPRRSV),根据PRRSV囊膜蛋白GP2基因保守序列和HP-PRRSV特有的Nsp2基因区保守序列设计特异扩增引物和杂交探针,通过双重一步法RT-PCR不对称扩增和双重微球杂交反应,建立了双重液相基因芯片方法。对12株PRRSV以及其他12种猪病原体的检测显示,该法能特异性检测12株PRRSV毒株并准确鉴别其中7株HP-PRRSV,与其他病原体无交叉反应;对PRRSV、HP-PRRSV病毒液的检测低限均小于每个反应0.5TCID_(50);其组内、组间检测变异系数均10%;检测55份疑似临床样品并与商品化荧光RTPCR试剂盒比较检测结果,符合率达98.2%(54/55)。研究结果为适应临床快速检测PRRSV提供了一种新的分子生物学检测方法。 相似文献
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利用昆虫杆状病毒表达系统制备了H5N1亚型禽流感病毒(AIV)HA蛋白、类病毒脂质体和病毒样颗粒,分别作为包被抗原,建立了相应的检测H5N1亚型禽流感病毒抗体的ELISA方法。特异性试验、敏感性试验、重复性试验和稳定性试验结果表明,利用3种抗原包被所建立的ELISA方法均具有良好的重复性和稳定性,批间和批内变异系数均小于10%,但单独表达的HA蛋白和类病毒脂质体特异性更好,而且类病毒脂质体有更高的免疫反应性,与灭活全病毒相比安全性更高,故在H5N1亚型AIV抗体水平检测方面更具有应用前景。 相似文献
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段燕 《国家林业局管理干部学院学报》2013,12(3):34-37
近年来图书馆界对于“高校图书馆对外开放”这个议题的争论一直持续着。社会呼吁高校图书馆能够对外开放,而高校图书馆在资源储备及利用上的种种优势也决定了它有实现对外开放的条件。许多高校也已经进行了对外开放的尝试。但是,高校图书馆的对外开放也面临种种困难。今后,各高校图书馆应顺应时代潮流,解放思想,转变观念,加强自身建设,为全面对外开放打好坚实的基础,最终使高校图书馆成为真正意义上的“没有围墙的大学”。 相似文献
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对电机进行噪声测量项目时通过对噪声进行采集分析,采用比对信号特征的方法可以早期发现产品可能存在的某些潜在缺陷,为分析研究提供依据。文章在测量方法与实现方面给出了针对几种电机的研究结果。 相似文献
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文章通过对汽车覆盖件冲压成形仿真有限元方程及其算法的研究,认为动力显式解法更适合于冲压成形仿真。 相似文献
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龚自珍是清代的思想家、诗人、文学家和改良主义的先驱者。他的诗、文尽显更法、改制,揭露清朝统治者的腐朽,洋溢着爱国热情,被柳亚子誉为三百年来第一流。龚自珍的更法改制思想主要围绕三个领域展开:经济上,对于土地兼并之风的改革;政治上,对于君臣权力权重的改制;思想文化上,对于学术与政治关系的建议。面对着封建末世的黑暗和吏制的腐败,龚自珍没有浑浑噩噩以了此一生,而是提出了对后世影响重大的改良思想。文章就此谈论龚自珍为何会产生更法改制的思想,哪些方面以及怎样体现了他的改革思想,对其更法改制思想的评价。深受龚自珍思想的影响,在学术方面,要精于研究,为国家政治服务。现代社会,我们的学习应走向社会,走向国家。 相似文献
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文章通过对汽车覆盖件冲压成形仿真有限元方程及其算法的研究,认为动力显式解法更适合于冲压成形仿真。 相似文献
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利用基因克隆和体外转录技术制备病毒性出血性败血症病毒(VHSV)核酸检测标准物质。设计VHSV N基因的克隆引物,RT-PCR获得相应片段,连接至pGEM-T载体,测序后采用体外转录方法制备RNA纯品。初步定量稀释后,混合分装作为核酸标准物质候选物。采用核酸浓度测定与拷贝数换算的方法对转录的RNA片段进行定值。通过绘制荧光定量标准扩增曲线计算标准物质含量(拷贝数),并根据委托单位的定值结果进行不确定度的估算。均一性结果显示瓶间差异小于5%,稳定性试验表明室温20℃~25℃(相对湿度20%~25%)7 d,2℃~8℃保存1个月及-20℃保存6个月的含量均无明显变化。核酸标准物质定值为(6.625±0.149)×10~8copies/μL,可用作VHSV核酸检测的标准质控品。 相似文献
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[目的]建立具有高敏感性能区分猪繁殖与呼吸综合征病毒经典株和高致病株的双重RT-PCR检测方法.[方法]首先从退火温度与引物浓度先对猪繁殖与呼吸综合征病毒经典株、高致病株的单项RT-PCR方法的条件分别进行筛选与优化,然后对其双重RT-PCR方法的条件进行筛选与优化,并进行特异性与敏感性检测,最后初步应用于临床样品检测.[结果]建立的猪繁殖与呼吸综合征病毒经典株和高致病株双重RT-PCR检测方法不能检出猪流行性腹泻病毒和猪瘟病毒等当前流行较广的其他猪源RNA病毒,对猪繁殖与呼吸综合征病毒经典株、高致病株的检测灵敏度分别是100、200copies/μL.此方法对2020-2021年8个猪场的220份血清样品的检测结果显示,猪繁殖与呼吸综合征病毒经典株、高致病株的个体阳性率分别为7.73%和43.64%,与单项RT-PCR方法检测结果完全一致.[结论]建立了一种高敏感性的猪繁殖与呼吸综合征病毒经典株和高致病株双重RT-PCR检测方法. 相似文献