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为筛选具有临床诊断价值的副猪嗜血杆菌(H.parasuis)单克隆抗体(MAb),本研究采用H.parasuis 5型强毒株(HPS-5)免疫BALB/c小鼠,利用常规细胞融合技术制备了一株稳定分泌MAb的杂交瘤细胞株。Western blot结果表明该MAb能够特异性识别所有H.parasuis标准菌株;免疫共沉淀技术与蛋白质谱分析显示该MAb所识别的蛋白为ATP结合盒转运蛋白(ABCT)家族的寡肽透过酶(OppA);利用MAb对噬菌体12肽库进行淘选,8个阳性噬菌体克隆展示有"KTPAE-R"保守序列,对应于H.parasuis SH29755株和SH0165株的469位~475位的氨基酸残基。对OppA氨基酸序列比对结果表明H.parasuis与其它10种猪常见细菌病病原序列一致性为9.1%~74.5%,本研究结果为进一步研究H.parasuis感染的病原学诊断建立了良好的基础。 相似文献
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根据GenBank中发表的GPMV SF02株的NP基因的核苷酸序列设计合成一对引物,采用RT-PCR扩增出与预期设计的1470bp大小相符的片断,将此扩增产物克隆入PMD18-T载体,进行序列测定和分析.结果表明:所扩增的NP基因的核苷酸长为1 470bp,共编码490个氨基酸.同源性分析表明:JS/1/97/Go与国内的SF02株的NP基因核苷酸同源性为98.6%,氨基酸同源性为99.6%.由此可见,鹅副粘病毒JS/1/97/Go分离株与SF02株的亲缘关系较近,同属于新城疫Ⅶ型基因.而其与LaSota株的核苷酸同源性为85.2%,氨基酸同源性为90.8%.说明该毒株相对于经典的NDV在NP基因上已发生了较大的变异. 相似文献
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本研究利用基因重组技术构建含有鹅副粘病毒(GPMV)主要保护性抗原F基因和LacZ报告基因的重组禽痘病毒转移载体;利用脂质体介导的方法将所构建的转移载体转染禽痘病毒(FPV)017株感染的鸡胚成纤维细胞(CEF),通过蓝白筛选获得重组病毒;Western blot和间接免疫荧光试验结果显示重组禽痘病毒中F基因在CEF中获得表达,并且表达产物具有良好的反应原性;本研究为进一步的研究重组禽痘病毒的免疫保护性奠定了基础. 相似文献
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通过将禽痘病毒接种15日龄鹅胚的绒毛尿囊膜的方法对其进行驯化,使其适应鹅胚,并出现典型病变;再以驯化第9代的病毒接种16日龄雏鹅,通过PCR的方法在接种后10d的鹅血液中检出病毒。根据已发表的禽痘病毒TK基因序列设计1对引物,采用PCR技术扩增出与预期设计的600bp大小相符的TK基因片段,将扩增产物克隆入pMD18-T载体,经酶切鉴定筛选出阳性克隆,进行序列测定和分析。序列分析表明:所扩增的TK基因的核苷酸长度为552bp,,共编码183个氨基酸。同源性分析表明:经鹅胚驯化的FPVTK基因片段与已发表的282E4株FPVTK基因比较核苷酸序列同源性为99.82%,氨基酸序列同源性为99.45%。 相似文献
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近几年,在临床工作中遇到几例鸡肝出血的病例,现介绍如下. 病例1:1999年10月2日哈尔滨市太平区民主乡某村路某饲养的14日龄800羽蛋鸡雏,有4羽沉郁死亡,外观表现为粘膜苍白,体瘦,羽毛不整洁,剖检发现各个器官均十分苍白,但无实质性病变.肝脏内有血肿,每个血肿均为独立的球状,体积大小不等,麦粒大小至云豆大小,其它未出现血肿的区域表现为苍白,有的血肿仿佛被一层薄膜包住,突出于肝脏表面.其中有一羽是肝脏破裂,血凝块把肝脏包围起来,剥离血凝块后可以发现出血处为1 cm的小口,在肝内可见到大小不均的血肿,当时我们只作为一病例进行记录和治疗,并在饲料中添加了维生素K3,连喂了5 d,但始终没有制止住死亡,5 d内死亡36只,剖检症状如前,后来我们在饮水中添加了大剂量的病毒唑,在4天后控制了死亡. 相似文献
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鹅副黏病毒病是由鹅副黏病毒引起的以消化道病变为主要特征的一种急性病毒性烈性传染病,发病率和死亡率可高达98%.此病最早于1997年7月被扬州大学王永坤等和华南农业大学辛朝安等在国内首次发现.王永坤等首先用SPF鸡胚分别从不同患病鹅群中分离出多株病毒,并经病毒形态、结构、理化、生物学特性和血清学研究,证明此病毒为副黏病毒科、副黏病毒亚科、腮腺炎病毒属APMV-1型中的成员. 相似文献