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[目的]构建适合春兰SRAP-PCR反应的最佳体系。[方法]对影响PCR反应的5个变量(dNTPs浓度、Mg~(2+)浓度、引物浓度、Taq酶量、模板DNA用量)采用L16(45)正交试验设计,建立春兰SRAP-PCR最适反应体系。[结果]最佳优化体系为0.25 mmol/L d NTPs、2.50 mmol/L Mg~(~(2+))、0.80μmol/L引物、1.00 U Taq酶、200.00 ng模板DNA,共20μL。扩增程序:94℃预变性4 min,反应前5个循环在94℃变性1 min、35℃复性1 min、72℃延伸1 min的条件下运行,随后的30个循环复性温度提高至50℃,最后72℃延伸10 min。[结论]该体系有利于SRAP分子标记在春兰材料上的应用,为春兰分子遗传育种奠定了基础。 相似文献
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以粉煤灰、腐殖土、水和绿矾作为草坪砖基质主要成分进行配合比设计,研究高羊茅、黑麦草、匍匐剪股颖3种草分别在4种配方条件下的植生效果,筛选了3种草各自适宜的基质配方。试验结果表明:在配方2 (粉煤灰∶腐殖土∶水∶绿矾=10∶20∶20∶1)条件下,3种草发芽数均可达最高,且高羊茅和黑麦草的株高最高;不同配方对3种草的颜色和质地没有显著影响,但配方1 (粉煤灰∶腐殖土∶水∶绿矾=10∶10∶10∶1)和配方2对于改善3种草的绿期、盖度和生物量等生长质量具有最佳效果;对于3种草而言,高羊茅在配方2条件下生态质量指标表现最好,而黑麦草和匍匐剪股颖则在配方1条件下表现最好,综合评分表明,高羊茅更适合作为植生草种。研究结果为草坪砖-基质配制及适生草种的选择提供了依据。 相似文献