作物根际和叶围中产几丁质酶微生物的分布及其抑制真菌作用

从几十种作物的根际和叶围分离获得３５０株微生物，其中细菌和放线菌分别为２００株和１５０株。对所有这些分离物进行了抑制真菌试验和几丁质酶活性测定。在抑菌试验中，以棉花枯萎病菌、棉花黄萎病菌、黄瓜枯萎病菌，及西瓜枯萎病菌作为供试病原菌，有９６个分离物对其中的一种或一种以上的病原菌有抑制作用，其中１８个分离物对这４种病原菌都具有强烈的抑制作用。在几丁质酶活性方面，１０％的细菌和４０％的放线菌都能不同程度地产生几丁质酶。有些菌株几丁质酶活性强，抑菌作用也明显，有些菌株几丁质酶活性弱，抑菌作用弱或无作用，少数菌株几丁质酶活性强，但却无抑菌作用。用几丁质酶液处理病原菌孢子，其萌发率和芽管长度比对照显著降低     

发酵工程

一、发酵工程的含义 利用微生物生产有益于人类的产品已有上千年的历史。早在发明显微镜揭露微生物世界之前的古代,人们就已开始利用微生物酿酒和制酱等。发酵这个术语是法国微生物学家巴斯德(Louis Pasteur)于十九世纪中期提出的。他在深入研究微生物的生理活动过程中,发现有些微生物不需要氧气也能生活,他将这种生理现象称为“发酵”,以示与需氧才能生活的呼吸作用相区别。在当时,酿酒已发展成发酵工业。此后,在一个相当     

玉米赤霉烯酮生物合成条件的研究

从自然界中分离得到的玉米赤霉菌 G.zeae BAU_(-z8)菌系只具有在固体培养基中合成玉米赤霉烯酮的能力。经过亚硝基胍和紫外线对 BAU_(-z8)的诱变处理后,再经筛选和分离纯化,得到了具有在液体常温条件下生成玉米赤霉烯酮的突变株D_(4-21),并对其生成玉米赤霉烯酮的条件进行了研究。试验表明:培养基的碳源、氮源种类;碳、氮、磷的浓度及 C/N 值;初始 pH 值、培养温度、通气量等因素都对玉米赤霉烯酮产量有很大影响。通过试验,确定了摇瓶发酵培养基成份的最佳组合以及最适的培养条件为:葡萄糖18%、尿素0.27%、K_2HPO_4 0.05%、酵母膏0.10%、MgSO_4 0.25%、KCl 0.025%、pH5.4—5.5(自然)、装量:120ml/500ml 摇瓶、温度:21—24℃,经摇床震荡培养2周,产量可达2—2.2g/l。     

洛伐他汀产生菌土曲霉原生质体的制备与再生

报道了产生降血脂药物洛伐他汀（lovastatin)的土曲霉（Aspergillus terreus)的原生质体的制备与再生条件及原生质体形成过程,结果表明用溶壁酶5mg.mL^-1,Zymolyase 20T 2.5mg.mL^-1和蜗牛酶2．5mg.mL^-1配制的混合酶液,可制备出土曲霉生质体;其最佳酶解温度为34℃,作用5h,原生质体再生率达17％以上。     

北京郊区固氮螺菌的研究

自北京郊区的玉米根系分离出玉62菌株,用乙炔还原法测定其固氮酶活性比来自巴西的 Sp81高60%。自高梁根系分离出高63菌株。其形态、生理等特征都与玉62相似,两菌株均属巴西固氮螺菌(Azospirillum brasilense)以玉62为出发菌株,经亚硝基胍处理后,曾得到一些能在含有0.2%NH_4Ac 和KCN(或 NaN_3)的培养基上生长并有较高固氮酶活性的抗氮菌株。如127—6菌株在0.2%NH_4Ac 培养基上的固氮酶活性比玉62高3.5倍。但这种特性不易保持,经过一段时间,其酶活性下降。曾作几个菌株接种夏玉米的小区田间试验。虽然某些菌株对产量有一定的效果,但统计学上差异不显著。     

快生型大豆根瘤菌的耐盐机制和结瘤性状

1983年,我们自天津及新疆盐碱地分离了14株快生型大豆根瘤菌,一般都能耐0.3—0.4MNaCl,其中 RT19菌株为轻度嗜盐细菌,在无盐的 YM 培养液中生长缓慢,但在含有0.3MNaCl 的 YM 培养液中生长迅速,而且在0.6MNaCl 条件下仍可生长。该茵还可在酸性(pH5.0)和碱性(pH10.5)条件下生长,表现出较强的抗逆性。从美国引进的 USDA191等11株快生型大豆根瘤菌也能在0.3—0.4MNaCl 条件下生长。将这些菌株在夏播大豆112-2-4作结瘤试验,发现除 USDA191外,其他快生型大豆根瘤菌的结瘤和固氮能力一般较差。天津快生型大豆根瘤菌也有类似现象,但其中 RT14菌株表现出较高的固氮酶活性。USDA191能在13个不同的大豆品种结瘤,表明该菌具有广谱性。在0.2MNaCl 条件下,USDA191菌株细胞内的谷氯酸含量急剧上升,以平衡培养基的渗透性。而且,它的耐盐性与培养基所含的氨基酸有关。     

结合条件对羊抗兔抗体连接到细菌磁小体的影响

用羊抗兔抗体进行抗体连接到细菌磁小体(BMPs)实验，以探讨结合条件对抗体连接效率(以每毫克BMPs上连接抗体的微克数表示，单位为μg/mg)的影响。实验表明，冷冻干燥后的BMPs的抗体连接效率降低36%~55%；在液氮中(-196 ℃)预处理的抗体连接效率显著高于在-70 ℃和-20 ℃预处理的。室温(15 ℃)下反应18 h的抗体连接效率最高，为64.06 μg/mg，明显高于其它温度和连接时间的。反应体系中，BMPs用量由5 mg降到0.1 mg，抗体用量由10 μg增加到300 μg时，抗体连接效率逐渐上升，当BMPs用量为0.1 mg，抗体用量为300 μg时，抗体连接效率达762.37 μg/mg。PBS、HEPES、Tris-HCl、MOPS、VBS以及磷酸盐等溶液可用于抗体连接到BMPs体系中，在通常使用的缓冲液pH和浓度下，几种溶液的抗体连接效率变化范围为46.28±0.58 ~ 90.83±1.64 μg/mg；并且不同的溶液有相应的使抗体连接效率达到最高时的pH和溶液浓度，当HEPES的pH为3.5，浓度为20 mmol / L；Na3PO4的pH为5.6，浓度为5 mmol / L时，抗体连接效率分别为108.01和76.78 μg/mg。对连接到BMPs上的抗体进行SDS-PAGE定性检测结果表明，抗体连接到了BMPs的膜上。     

巴西固氮螺菌Yu62 glnB基因和glnZ基因的克隆和序列分析

ｇｌｎＢ基因编码的ＰⅠⅠ蛋白在巴西固氮螺菌的固氮过程中起着非常重要的调控作用,而ｇｌｎＺ是与ｇｌｎＢ高度同源的基因,其产物ＰＺ可能也在固氮调控中起作用。本研究用ＰＣＲ法克隆了巴西固氮螺菌Ｙｕ６２ ｇｌｎＢ基因和ｇｌｎＺ基因。ＤＮＡ序列分析表明ｇｌｎＢ和ｇｌｎＺ这２个基因的编码区的长度都为３３６ｂｐ,编码１１２个氨基酸。将巴西固氮螺菌Ｙｕ６２菌株与标准菌株Ｓｐ７的ｇｌｎＢ基因和ｇｌｎＺ基因分别进行比     

巴西固氮螺菌Yu62glnZ基因及其相邻基因的克隆和序列分析

通过原位杂交从巴西固氮螺菌（Azospirillum brasilense)Yu62的基因组文库中获得glnZ基因的阳性克隆，对该阳性克隆进行亚克隆和序列分析，结果表明glnZ基因位于3.7kb的SaLI片段上，glnZ基因编码区长336bp，编码的产物是Pz蛋白，由112个氨基酸组成，分子量为1.12kD。用Blastax软件对Pz蛋白的氨基酸序列在GenBank数据库中进行同源比较，结果表明Pz蛋白与其它几种固氮菌及大肠杆菌的GlnK蛋白的同源性（identities）达66％以上；与PⅡ蛋白的同源性达64％以上。glnZ基因上游是部分ubiH-like基因，与E.coli ubjH基因（编码辅酶Q，ubiquinone)N－端有31％的同源性（identity）和50％相似性（similarity)；glnZ基因下游是aat-like基因，与E.coli和Bacillus subtilis aat基因（编码天冬氨酸氨基转移酶，aspartate aminotransferase)有同源性和相似性都为26％和42％；aat-like基因下游是部分ftsK-like基因，与E.coli ftsK基因（编码肽聚糖，peptidoglycan)N-端有42％同源性和56％相似性，这几个基因在GenBank中的登录呈是AF279917。     

玉米联合固氮工程菌的增产和节约氮肥的效果

连续两年 (1999～ 2 0 0 0年 )在肥力中等的轻质砂壤土中 ,对玉米联合固氮工程菌 UB37和野生菌 UB1进行了玉米小区田间接种试验。试验结果表明 :在不同水平氮肥的条件下 ,接种工程菌比接种野生菌和不接菌的对照都有不同程度的增产。特别是在施 N水平为尿素 180 kg/hm2 的试验田中 ,接种工程菌比接种野生菌平均增产 10 % ,比不接菌对照平均增产 19% ,生物统计差异显著 (P=0 .0 5 )。在尿素 180 kg/ hm2条件下接种工程菌的玉米产量与在尿素 2 2 5 kg/hm2 下接种工程菌的产量相当 ,既可节省 2 0 %氮肥 ,又可达到增产 19%的效果