水稻OsAAA1基因超表达载体构建及遗传转化

为了构建带Flag标签的OsAAA₁超表达载体,获得阳性转基因植株并分析其OsAAA₁基因表达情况。以日本晴的cDNA为模板,将OsAAA₁克隆至pU1301-Flag载体;重组质粒通过PCR、酶切及测序鉴定正确后,以农杆菌为介导进行遗传转化至日本晴;转基因植株通过分子鉴定正确后,采用Real-time PCR检测OsAAA₁基因的mRNA表达水平变化。成功构建了OsAAA₁-pU1301-Flag重组载体;遗传转化后获得33株转基因植株;通过分子鉴定筛选出26株阳性转基因植株;荧光定量PCR结果分析发现23株阳性转基因植株OsAAA₁基因的表达出现不同程度上调。与日本晴相比,有8株表达量达到30倍以上,其中有5株表达量超过40倍。成功构建了带Flag标签的OsAAA₁超表达载体;遗传转化结果表明OsAAA₁-Flag能整合到日本晴的基因组DNA中,从而使OsAAA₁基因的表达水平增加。本研究为后续通过Flag标签,在水稻植物体内直接挖掘与OsAAA₁互作的功能蛋白奠定了基础。     

罗非鱼湖病毒病及其检测技术研究进展

简述了罗非鱼湖病毒病及其流行病学特征,介绍了罗湖病毒的发现、基因组特征、致病机理以及诊断与防控措施。指出,罗非鱼湖病毒病为近年来新发重大疫病,目前已在全球范围内流行,给罗非鱼养殖产业带来了巨大经济损失。提出,目前对于罗湖病毒病无有效的治疗方法和疫苗,应以预防为主;由于不同地区罗湖病毒毒株有所差异,首先应充分调研各毒株相对应的敏感鱼种;加强罗非鱼生物安保措施管理与传播风险评价体系建设;罗湖病毒属于RNA病毒,变异快,且不同地理条件下基因组存在显著差异,应及时更新序列信息,改进诊断方法,正确区分不同地理株,开发更为精准、低价的快检技术与产品。