百合花青素合成调控的研究进展

花青素是一类广泛存在于植物中的水溶性天然色素,为观赏植物提供了赏心悦目的色彩,同时由于花青素还具有抗氧化、抗突变等生理功能,在开发天然色素、保健食品和天然抗氧化剂等方面有着重要的研究价值。该研究从花青素分离、提取及生物合成调控通路3个方面对目前在百合上开展的相关研究进行了总结,重点关注了百合花青素生物合成途径中的相关结构基因和调控基因,分析了百合花青素研究存在的问题和发展趋势,为百合花青素分子调控机制研究提供参考,对百合花青素的开发提供借鉴。     

卷丹百合LlARF12基因的克隆、表达及功能分析

【目的】探究卷丹百合珠芽发生前细胞和组织学层面的变化,讨论卷丹百合珠芽发生的内在机制。克隆生长素响应因子基因LlARF12,为解析LlARF12基因在卷丹百合珠芽发生过程中的作用机制提供参考。【方法】利用石蜡切片的方法对卷丹百合珠芽器官形成前的叶腋部位进行了组织学观测,从卷丹珠芽形成过程的转录组中筛选得到参与珠芽发生的关键基因LlARF12,克隆得到其编码区(CDS)序列,利用生物信息学软件对其进行分析预测,通过qRT-PCR对不同时期、不同种与品种的百合组织中的LlARF12基因进行表达模式分析,并通过VIGS技术对卷丹种球进行LlARF12基因沉默,从而验证其基因功能。【结果】克隆获得LlARF12基因长度为2 346bp,编码781个氨基酸;qRT-PCR结果显示,LlARF12在珠芽发生的小白点时期表达量显著低于未发生珠芽时期、在S1时期植株茎秆上部表达量显著低于茎秆下部、在能够自然发生珠芽的百合品种中表达量显著低于其他百合品种;沉默LlARF12基因导致卷丹珠芽发生时间提前,且发生的珠芽数量增多。【结论】在卷丹百合珠芽发生的S1时期之前,腋生分生组织已经开始启动,此处靠近表皮...     

不同百合种质资源对灰霉病的抗性

灰霉病是百合的主要病害之一,严重影响百合生产,筛选高抗种质资源是百合抗病育种的重要途径之一。本研究对不同百合种质资源叶片进行离体接种,结合扫描电镜观察,并进行活性氧、相关酶活性的测定。结果表明,卷丹百合属于高感(HS)种质,岷江百合-1、岷江百合-2、杂交种2065-1属于中抗(R)种质,宜昌百合、湖北百合、Champion Diamonds、雷林石、Craming Diamonds、红唇、杂交种2065-22属于高抗(HR)种质。接种灰霉菌后,高抗种质湖北百合叶片中过氧化氢含量变化更为剧烈,同时超氧阴离子含量会出现2次峰值,而高感种质卷丹百合则只有1次峰值。接种灰霉菌后,百合叶片中超氧化物歧化酶(SOD)活性与百合抗病性具有相关性。     

独脚金内酯及其抑制剂对卷丹珠芽生长发育的影响

为了探索独脚金内酯及其抑制剂对卷丹珠芽生长发育的影响,本试验以卷丹百合(Lilium lancifolium)为材料,分别用浓度为10μmol/L的外源GR-24和Tis-108溶液在叶腋处进行喷施,并测定卷丹百合及其珠芽的各项生理特性和形态指标,进行相关分析。结果表明:喷施浓度为10μmol/L的GR-24和Tis-108溶液,对卷丹的株高、茎粗、除花葶外的总叶片数、单株花蕾数、花期等均有明显的变化;Tis-108处理的卷丹花葶以下的珠芽直径、珠芽数量均大于CK处理和GR-24处理;与CK处理相比,GR-24处理延迟了珠芽的发生,Tis-108处理对珠芽的生长发育有促进作用。本研究有助于建立促进百合珠芽分生的方法,进而为解决生产实际提供方法和指导,并为下一步解析百合珠芽发生分子机理及相关调控基因研究提供理论基础。     

赤霉素及其抑制剂处理对卷丹和珠芽生长的影响

籽种产业是百合产业的基础和始发端,关系到产业能否持续、健康发展。有些百合种/品种在叶腋处能产生珠芽,珠芽是接近于脱毒的小籽球,利用珠芽可大大提高种球繁育效率。因此,百合珠芽生长发育的相关研究可以建立调控珠芽分生的方法,提供百合种球生产新的方式和思路,同时也为百合珠芽发生的分子机制研究奠定基础。本试验以卷丹百合(Lilium lancifolium)为材料,探索了赤霉素(GA3)赤霉素抑制剂(PAC)对卷丹及珠芽生长发育的影响,使用浓度为100 mg/L的外源GA3和PAC溶液、蒸馏水为对照定期对卷丹叶腋处进行喷施,测定卷丹和珠芽的各项形态指标,进行相关分析。试验结果为:GA3处理的卷丹株高、节间长、花苞长和宽较对照分别增长了69.73%、58.81%、29.15%、37.16%;而PAC相应减少了77.06%、69.86%、30.91%和8.93%,PAC使植株茎粗增加。喷施GA3使花期提前半个月而PAC推迟了18 d,另外,GA3对珠芽形成有一定抑制作用,使单株数量减少但是增加了单个珠芽重量,母株上的珠芽可以不经休眠直接萌发;PAC处理显著增加了珠芽厚度并且珠芽分化效率最高,为56.27%。本研究可为珠芽调控方法的建立和分子机制研究提供指导和借鉴。     

6个东方百合品种的染色体核型分析

采用染色体常规制片技术,对Parasol、Corvara等6个东方百合品种进行了染色体形态研究。结果表明:Parasol的核型公式为2n=24=8m(1SAT)+6sm(1SAT)+6st(1SAT)+4t,Corvara的核型公式为2n=24=6m(1SAT)+8sm(3SAT)+8st(2SAT)+2t,Lido的核型公式为2n=24=6m+6sm+12st(2SAT),Alessia的核型公式为2n=24=12m(3SAT)+4sm(2SAT)+8st,Anaise的核型公式为2n=24=10m+8sm+6st,Crystal Blanca的核型公式为2n=24=14m(4SAT)+4sm+6st。Alessia、Anaise和Crystal Blanca 3个品种的核型类型为2B型,核型不对称系数范围为64.81%~66.1%;Corvara和Lido的核型为3B型,核型不对称系数范围为70.71%~70.74%;Corvara的核型为2A型,核型不对称系数为70.3%。除Anaise外,其他5个品种的染色体均有随体,其中3个品种的第2对染色体上均携有随体。     

非洲猪瘟病毒K205R蛋白特异性纳米抗体的筛选与鉴定

【目的】利用噬菌体展示技术筛选非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV)K205R蛋白的特异性纳米抗体。【方法】将原核表达、纯化的ASFV K205R蛋白免疫双峰驼，采集全血，分离外周血淋巴细胞，提取总RNA并反转录，巢式PCR扩增VHH基因，构建VHH噬菌体文库，利用噬菌体展示技术筛选K205R特异性纳米抗体。【结果】成功构建库容量为5×10⁸的VHH噬菌体文库，然后利用噬菌体展示技术经过3轮淘选，特异性VHH噬菌体得到明显富集，氨基酸序列比对显示共筛选出5株K205R蛋白的特异性纳米抗体，分别为ASFV-K205R-Nb1、ASFV-K205R-Nb14、ASFV-K205R-Nb35、ASFV-K205R-Nb64和ASFV-K205R-Nb82。【结论】筛选的5株纳米抗体均具有良好的特异性，其中ASFV-K205R-Nb1、ASFV-K205R-Nb35和ASFV-K205R-Nb82具有更好的亲和力，为以纳米抗体作为灵敏探针建立的特异性强、灵敏度高、成本低的新型ASFV血清学诊断方法提供依据。