紫花苜蓿MsSQE1的克隆及对皂甙合成的功能分析

【目的】鲨烯环氧酶(squalene epoxidases,SQE)是苜蓿皂甙合成途径中的一种限速酶,与苜蓿皂甙的合成密切相关。通过对苜蓿鲨烯环氧酶(MsSQE1)基因的克隆及在苜蓿中过表达,探究鲨烯环氧酶对皂甙合成的作用机制。【方法】以模式植物蒺藜苜蓿鲨烯环氧酶基因序列设计引物,同源克隆苜蓿MsSQE1。对MsSQE1进行生物信息学分析;通过基因枪轰击技术,使MsSQE1在洋葱表皮瞬时表达,进行亚细胞定位。利用qRT-PCR方法分析该基因在根、茎、叶中的表达水平,以及在紫外辐射、ABA和GA3条件下的表达模式。在茉莉酸甲酯(MeJA)的诱导下,分析MsSQE1的转录水平,及对苜蓿皂甙含量的影响。利用根癌农杆菌转化体系,获得过表达MsSQE1的阳性转基因植株,并测定转基因植株的皂甙含量。【结果】克隆了MsSQE1的cDNA序列,开放阅读框1 578 bp,编码525个氨基酸,等电点为8.59。同源性比对分析,其氨基酸序列与蒺藜苜蓿中SQE1氨基酸序列同源性为98.6%,与拟南芥的同源性为80%。亚细胞定位显示,MsSQE1可能定位于细胞膜。组织特异性表达分析显示,MsSQE1在叶中的表...     

猪瘟、败血型链球菌和猪附红细胞体混合感染的综合防治措施

2005年1～5月份，在我市一些猪场发生了猪瘟、败血型链球菌与附红细胞体混合感染的疾病。现将诊治过程报告如下：     

解决农村环保问题建设生态和谐新农村

农村生态环境建设是新农村建设的重要内容之一,进一步改善农村生态环境.实现人与自然的和谐,是建设社会主义新农村和全面建设小康社会的基础.     

截形苜蓿蛋白质组学研究进展

蛋白质组学研究是功能基因组研究的重要手段.简述了蛋白质组学研究的概念和主要技术,详述了蛋白质组学在截形苜蓿组织或细胞器蛋白质组成、生长发育、响应生物和非生物胁迫等方面应用研究成果,分析了存在的问题与发展前景.     

药物诱导母猪白天产仔

目前，大部分母猪都是夜间产仔，由于护理和接产工作不及时，很容易造成仔猪被压死、窒息等非正常死亡，严重影响了养猪的经济效益。     

提高板坯预压效果的研究

为提高板坯预压效果，对ＵＦ树脂的制法和调胶进行了改进，试验结果表明，在ＵＦ树脂制造时加入氨基磺酸，调胶时加入保水剂，可使树脂水溶性增加，贮存期延长，胶液活性期长，并可防止干燥胶合现象。胶粘剂的预压效果好，所压制的胶合板质量符合ＧＢ９８４６．１－９８４６．１２－８８Ⅱ类胶合板标准，ＵＦ树脂成本不增加。     

节水从农业抓起(下)

(二)区域布局及发展重点 1.区域布局 为因地制宜地制定不同地区节水农业的发展方向和建设重点,考虑各行政区的自然地理状况、社会经济发展条件、农业区域特征等综合因素,国家有关部门将全国分为5大节水农业区,并划分了二级区。(见表1)     

农用车故障的诊断方法

引起农用车产生故障的原因,往往错综复杂。一个机构或部件出问题,同时引起几种故障;一种故障,可能是几个原因引起的。要排除故障,首先要了解各类故障的特点和现象,然后通过综合分析,找出产生故障的原因,最终才能判断故障的确切部位。农用车故障的分析与判断,通常有以下几种方法。     

简述保护性耕作与旱作农业耕作的异同

旱作农业是指依靠和充分利用降水及有限灌溉水源进行的农业生产,是雨养和集雨补灌两种农业生产活动的总称.     

紫花苜蓿MsCOL1基因RNAi表达载体的构建及转化

根据紫花苜蓿CONSTANS类似基因MsCOL1基因(登录号:DQ661682)序列,设计含有酶切位点的两对特异性引物,以紫花苜蓿cDNA为模板,分别合成用于构建干扰载体的正反义片段,将正反义片段分别插入表达载体pART27的相应位置,构建含有发夹结构的RNAi载体pART-S-A.利用农杆菌介导方法,将pART-S-A转化到紫花苜蓿中,经PCR检测,获得了7株转基因植株.经RT-PCR检测,证明转基因植株中MsCOL1基因表达量有所下降,其中5株的表达量明显的降低.结果表明,已构建成功具有发夹结构的RNAi载体pART-S-A,它可有效的抑制紫花苜蓿MsCOL1基因.