免疫剂量和母源抗体对禽流感重组鸡痘病毒活载体疫苗免疫效力的影响

利用表达 H 5亚型禽流感病毒 (AIV)血凝素基因的重组鸡痘病毒 (r FPV- HA)以不同剂量免疫 1日龄 SPF鸡、有或无母源抗体 (FPV、AIV H5)的商品鸡 ,并于免疫后 2 1d利用同亚型 AIV通过肌肉注射进行致死性攻击 ,通过检测免疫后 HI抗体应答、比较攻毒后发病率和死亡率评价免疫剂量和母源抗体对 r FPV- HA免疫效力的影响。结果发现 ,免疫后 2 1d,15 %～ 2 0 %的 SPF鸡和无母源抗体商品鸡可检出 HI抗体 ,而含母源抗体商品鸡检测不到 HI抗体。利用H5亚型 AIV致死性攻击后 ,10 3～ 10 6 PFU的 r FPV- HA可保护 95 %～ 10 0 %的 SPF鸡和无母源抗体商品鸡抵御强毒攻击 ,使之免于发病和死亡 ;而不同剂量 r FPV- HA接种的含母源抗体商品鸡有 80 %～ 90 %发病和死亡。结果表明 ,在较宽的免疫剂量范围内 ,r FPV- HA对 SPF鸡和无母源抗体商品鸡可提供良好的保护 ,显示出一定的应用前景 ;母源抗体影响 r FPV- HA诱导的免疫应答 ,且提高免疫剂量亦不能克服其干扰作用 ,这提示在实际应用中需优化免疫程序 ,避免母源抗体干扰。     

牛瑟氏泰勒虫实验动物模型的研究

利用严重联合免疫缺陷 (SCID)鼠不能产生特异性免疫应答特性 ,用健康牛红细胞通过反复输血法置换SCID鼠体内的红细胞 ,再接种瑟氏泰勒虫 ,并定期给感染鼠输入健康牛红细胞。SCID鼠体内被置换的红细胞最高可达 90 %左右 ;瑟氏泰勒虫在SCID鼠体内能迅速增殖 ,在感染的第 1 0天前后 ,末梢血液中红细胞的染虫率高达 2 3 %左右。从SCID鼠末梢血液中能检出虫体的期限为 2 5～ 30d;感染鼠表现的临诊症状与感染牛的临诊症状相似。从而成功地建立了瑟氏泰勒虫的实验动物模型。     

猪附红细胞体病的病理学观察

用常规病理学方法，对5头患有附红细胞体病的仔猪进行病理解剖学和病理组织学观察。病理解剖学主要变化是血液稀薄，凝固不良，全身皮肤及粘膜、脂肪和脏器黄染，肝、脾肿大；病理组织学主要变化是肝、脾、肾等器官有含铁血黄素沉积和广泛的器官损害。     

猪附红细胞体感染对仔猪猪瘟免疫效果的影响

为探讨猪附红细胞体对仔猪猪瘟免疫效果的影响,本试验利用猪瘟抗体检测ELISA试剂盒,对已注射猪瘟疫苗的69头感染猪附红细胞体的仔猪和31头无猪附红细胞体感染的健康仔猪进行了猪瘟抗体检测。结果表明,感染猪附红细胞体仔猪的猪瘟抗体水平低下,其猪瘟疫苗整体免疫合格率(49·2%)明显低于健康仔猪(93·5%),且显性感染仔猪的免疫合格率(41·6%)明显低于隐性感染仔猪(53·5%)。说明猪附红细胞体严重干扰了猪瘟疫苗的免疫效果,且干扰程度与猪附红细胞体的感染程度呈正相关。     

肉孢子虫病的研究(Ⅰ:延边黄牛肉孢子虫病流行及种类的调查)

在延边黄牛肉孢子虫病的调查中用直接压片法检查了201头健康牛肉孢子虫包囊(微囊)的感染情况,并将含包囊的肉分别对犬、猫进行感染试验。结果:1.直接压片法的检出率为94.53%;2.肉孢子虫的感染率有随着牛的年龄增大而增高的倾向;3.病理组织标本中检出的包囊壁都薄,是 Sarcocystisbovicanis。在新鲜肉压片法检出的包囊也具有此种特征;4.随着包囊的增大,缓殖子的数量也相应地增多;5.用直接压片法检出的包囊肉对终宿主进行感染,确定了其种类。此文在延边首次成效。     

牛流产病例的诊断报告

为确诊牛频繁发生流产的病因,将30份牛血清分别用试管凝集反应和虎红平板凝集反应检测牛布氏杆菌抗体.结果表明,虎红平板凝集反应检测的阳性率为93.3%(28/30),试管凝集反应检测的阳性率为93.3%(28/30),2种检测方法结果一致,可初步诊断为布氏杆菌病.     

牛瑟氏泰勒虫热休克蛋白基因的克隆与序列分析

从病牛血液中提取总RNA,根据GenBank上发表的牛瑟氏泰勒虫HSP70基因序列设计合成1对引物,通过RT—PCR技术扩增出牛瑟氏泰勒虫HSP70基因,并将该基因克隆到pMD18-TSimple载体上,经PCR鉴定和EcoR工、Sal工双酶切鉴定为阳性的重组质粒测定及分析结果表明,该片段长1966bp,编码620个氨基酸残基．同源性分析表明,该序列与牛瑟氏泰勒虫HSP70基因同源性为95．78％．     

鉴别猪瘟强毒和弱毒的反转录-复合套式聚合酶链式反应(RT-nPCR)检测方法的建立

[目的]建立一种能区分猪瘟病毒（classical swine fever，CSFV）强毒和弱毒的反转录-复合套式聚合酶链式反应（RT-nPCR）检测方法。[方法]根据GenBank上登录的现有CSFV基因组全序列，选择高度保守区设计了一对CSFV通用引物，并在该对引物跨越区域的内部设计了猪瘟兔化弱毒疫苗和强毒特异性引物，建立了一种能区分猪瘟强毒和弱毒的RT-nPCR鉴别诊断方法。[结果]应用该方法从猪瘟兔化弱毒疫苗和石门强毒株基因组中扩增出了大小分别为447和343bp的一条特异性片段，从两种病毒基因组混合物中扩增出了大小为447和343bp的两条特异性片段，但对牛病毒性腹泻病毒和其它常见猪源病毒细胞培养物以及正常细胞基因组进行检测时均为阴性。该方法可以检测出0．04pg的CSFV RNA。对从黑龙江省采集的15份疑似猪瘟病料进行了检测，结果表明，有14份类似猪瘟强毒，1份类似弱毒疫苗。限制性片段长度多态性和种系发生分析证实了RT-nPCR的检测结果。[结论]本研究建立的RT-nPCR可以有效区分猪瘟强毒和弱毒，减少了未感染的免疫猪被误杀的可能性。