过表达ZmIBH1-1提高玉米苗期抗旱性

【目的】干旱是严重影响玉米生长发育进程的一个重要因素。挖掘玉米抗旱相关基因,通过转基因功能验证和转录组分析,解析关键基因在响应干旱胁迫过程中的分子调控机制,为抗旱分子育种和遗传改良提供理论依据。【方法】以玉米自交系B104（WT）为背景材料,利用农杆菌介导方法构建过表达ZmIBH1-1转基因株系（ZmIBH1-1-OE）;通过对转基因植株进行草铵膦抗性筛选、标记基因和目的基因PCR检测,以及运用实时荧光定量PCR检测目的基因的表达情况,鉴定阳性植株和株系;以WT和ZmIBH1-1-OE转基因株系为材料,通过干旱处理（20% PEG6000）,进行表型鉴定和耐旱生理生化指标测定,验证ZmIBH1-1的抗旱功能;通过对干旱胁迫下玉米4叶期转录组的比较分析,鉴定出差异表达的基因（differentially expressed genes,DEGs）;结合DAP-seq（DNA affinity purification sequencing）分析,初步确定ZmIBH1-1蛋白直接调控与抗旱相关的下游靶基因,利用基因组可视化软件IGV（integrative genomics viewer）分析ZmIBH1-1蛋白结合候选靶基因的位置,然后通过Dual-Luciferase试验验证ZmIBH1-1蛋白与靶基因的调控关系。【结果】通过玉米遗传转化获得12个转化事件;T₃代中,能同时检测到标记基因Bar和目的基因ZmIBH1-1的植株有458个,实时荧光定量PCR检测结果表明,ZmIBH1-1-OE中ZmIBH1-1的表达量显著高于WT,株系3和株系8表达量最高,将其自交获得T₄代转基因株系用于后续试验。在干旱胁迫条件下,ZmIBH1-1-OE株系存活率、叶片相对含水量、叶绿素含量、可溶性蛋白含量及其生理生化指标（超氧化物歧化酶、过氧化物酶、过氧化氢酶活性）均显著高于WT,说明玉米中过量表达ZmIBH1-1赋予玉米更高的耐旱性。转录组分析结果表明,WT与ZmIBH1-1-OE株系在干旱胁迫下有1 214个差异表达基因;Gene Ontology（GO）功能富集分析结果表明,差异表达基因主要涉及生物过程、细胞组分和分子功能,如在生物过程中主要涉及到光合作用、应激响应、脱水响应等;KEGG富集分析表明,差异表达基因主要参与植物激素信号传导、新陈代谢等过程。结合转录组显著差异表达基因和DAP-Seq分析所得到ZmIBH1-1蛋白的靶基因,初步确定ZmIBH1-1蛋白直接调控与抗旱相关的11个候选靶基因,包括2个钙信号相关基因、3个半胱氨酸代谢相关基因、1个bHLH转录因子、1个应激响应蛋白、1个谷胱甘肽转移酶、1个氧化还原过程蛋白和2个乙烯响应因子;基因组可视化结果显示ZmIBH1-1蛋白可以结合靶基因启动子区;随后通过Dual-Luciferase试验进一步表明,ZmIBH1-1蛋白可以直接作用于11个候选靶基因,其中,ZmIBH1-1蛋白可以促进ZmCa-M、ZmSYCO、ZmbHLH54、ZmGlu-r1、ZmCLPB3和ZmP450-99A2的表达,抑制ZmAGD12、ZmCYS、ZmCYSB、ZmERF-107和ZmEIN3的表达。此外,在干旱胁迫下NAC、WRKY、MYB等转录因子在ZmIBH1-1-OE和WT株系中也存在差异表达。【结论】ZmIBH1-1的过表达可以增强玉米苗期的耐旱性;ZmIBH1-1蛋白通过直接调控乙烯信号通路中的ZmERF-107和ZmEIN3的表达提高玉米的耐旱性;ZmIBH1-1蛋白通过直接调控钙信号相关基因ZmCa-M和ZmAGD12增强玉米的耐旱性;ZmIBH1-1蛋白可能通过间接调控NAC、WRKY、MYB等转录因子响应干旱胁迫。     

草坪草耐践踏性的形态学、生理学及解剖学研究进展

综述了草坪草耐践踏性在形态学、生理学及解剖学三方面的研究进展,并对当前草坪草耐践踏性研究存在的问题作了探讨.     

三年纠纷 一锤定音 一起典型的焊接质量伤人案

２０００年７月，我站受甘肃省安西县人民法院委托，对７C１．５型农用挂车车厢自卸锁销座焊缝喉部断裂进行质量鉴定。２００１年５月，法院依据我站的质量鉴定报告，做出农用挂车销售商负担用户医疗费、误工费的判决。农用挂车销售商对我站质量鉴定结论未提出异议。一场拖延了三年的质量事故案件，终于得到解决。现场勘验受安西县人民法院的委托，我站派两位高工进行现场调查，参加现场调查的人员还有委托方代表，销售商代表和用户当事人。据当事人陈述：１９９８年８月２６日从安西县某农机经销商购买７C１．５型农用挂车。１９９８年９…     

细菌性败血症鱼病的防治方法

淡水养殖鱼类细菌性败血症病是我国养鱼史上危害鱼的种类最多，年龄范围最大、流行地区最广、流行季节最长、传播速度极快、造成损失最大的一种急性传染病。现将该病的症状、成因和防治方法总结如下。１细菌性败血症的病原、症状与危害对象该病原为嗜水气单胞菌、鲁克氏耶尔森氏菌等为主体的多种细菌。其主要症状是，患病早期，病鱼的口腔、头部、胸腹部、眼眶、鳃盖表皮和鳍条基部充血，鳃丝溃疡充血呈灰白色，严重者鳃丝腐烂。剖开腹腔有黄色或红色腹水，肝、脾、肾、胆肿大，内脏器官全部出现炎症，有的鱼肛门红肿并伴有肠液溢出，病鱼全…     

倪金权的河蟹死因解析与诊治

倪老板是本地最有名的养蟹专业户,10多年来他一直在6．7hm^2的蟹池上奋斗着。几年前。当河蟹抖抖病暴发成灾时。他凭着自己一颗执着的心，潜心钻研，攻克了连水产专家都兴叹的抖抖病简易治疗方法．兴化、江都等地的养蟹户专程驱车来邀请他。有几十万亩的养蟹大户从中受益。不料8月中旬以来。这位土专家养殖的河蟹每天死20～30kg，其间，他也使用了二溴海因等药物，但效果不甚明显，河蟹依然在不断死亡，老倪陷入了痛苦之中。     

基于LibQUAL＋评价模式的图书馆“用户满意度”调查与思考——以“浙江财经学院图书馆”为例

基于LibQUAL＋图书馆服务质量评价模式,浙江财经学院图书馆开展了面向全校的＂用户满意度＂问卷调查。介绍了调查问卷的设计以及调查结果所反映的用户对图书馆服务的看法与期望,分析图书馆服务工作中存在的问题及差距,并提出相关建议。     

红松与色赤杨混交林改土效果显著

红松阔叶混交林是长白植物区系顶级群落，由于长期受到人为采伐等非自然因素的干扰，现存量极少，代之形成了大面积红松、落叶松纯林和生产力低下的杂木林。红松人工纯林由于树种单一，导致林分的土壤肥力逐年下降。近年来，通过营造阔叶红松混交林、人工诱导阔叶红松林等措施，培育了大面积红松阔叶混交林，其中色赤杨与红松混交林是较为成功的一种混交林分，现将草河口地区红松与色赤杨混交林改土效果总结如下。     

拖拉机维护保养及常见故障的排除

拖拉机是大家非常熟悉的农用机械,我国也是拖拉机的使用大国.然而近几年来.拖拉机使用故障频繁发生,严重影响了拖拉机的寿命,阻碍了农村经济的发展为使拖拉机经常处于良好的技术状态,必须设法防止和减少故障的发生.除坚持按照使用说明书的规定维护保养外,在农闲时期的保养与维护也是预防拖拉机发生故障的重要措施之一.